血涂片染色、制备及观察.docx

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1、首都师范大学生命科学学院实验报告姓名 胡琪霞 刘畅 学号1120800011 1120800017 成绩课程名称细胞学实验 时间 星期三(上/下)上午实验题目血涂片染色、制备及观察【实验目的】1.掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态【实验原理】1 .血液中的各种血细胞均是由造血干细胞在体内特定环境下增殖和分化的结果: 不同分化程度的造血干细胞与其周围的基质及各种细胞因子相互作用,完成细胞 增殖、分化、迁移等过程,最终产生多种具有一定数量和特定功能的细胞类型。 如红细胞、白细胞、淋巴细胞、NK细胞等。2.血细胞中红细胞、白细胞和血小板的一些简单区别如下表所示:血细胞红细胞白细胞血小板形态

2、双凹圆盘状白色,体积比红细胞大, 比重比红细胞小性状不规那么细胞核无(哺乳动物成熟红细胞)有有分类无粒细胞(嗜中性、嗜碱 性、嗜酸性)、单核细胞无3 .根据不同的细胞种类及细胞的不同成分,对酸性及碱性染料的结合能力不同, 而使各种细胞呈现出各自的特点本实验使用吉姆萨染料:由天青(蓝)2号和酸 性染料伊红混合配制而成。染色原理如下表:血细胞嗜酸性粒细胞嗜碱性粒细胞/淋巴细胞嗜中性粒细胞结合染料酸性染料伊红碱性染料天青天青&伊红染色结果粉红色蓝紫色淡紫色【实验材料】L器材:载玻片、推片、显微镜、微量吸管、移液枪4 .试剂:姬姆萨染色液、磷酸缓冲液、甲醇5 .标本:抗凝血。【实验步骤】1.血涂片制备

3、(1)用移液枪吸取10微升抗凝血于载玻片的一侧,然后用盖玻片压在血液上(盖玻片与载玻片之间夹角保持30。- 45 )(2)将推片匀速向前,勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度:快、大(厚)。慢、小(薄)(3) 一张满意的血涂片应厚薄均匀2.血涂片染色(1)涂片快速干燥I(2)用稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜,染色lOminI(3) PBS磷酸缓冲液漂洗(切勿先倒掉染液)I(4)涂片经水洗干燥后即可镜检3.镜检。【实验结果】L现象:2.分析:在光学显微镜的视野下,我们明确观察到了两种血细胞红细胞和白 细胞。其中红细胞数目很多,由于内含血红蛋白的缘故使细胞显红色,白细胞数 量相对很少,只有几个,呈球形,体积比红细胞要大。此外,尽管放大倍数到达了 40倍,但仍由于不够清晰而无法通过染色结果看 清具体白细胞的种类。

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