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1、血涂片制备染色及血涂片制备染色及白细胞形态观察白细胞形态观察根据不同的细胞种类及细胞的不同成分，根据不同的细胞种类及细胞的不同成分，对酸性及碱性染料的结合能力不同，而使对酸性及碱性染料的结合能力不同，而使各种细胞呈现出各自的特点。各种细胞呈现出各自的特点。本实验使用吉姆萨染料：由本实验使用吉姆萨染料：由天青天青(蓝蓝)2号号和和酸性染料伊红酸性染料伊红混合配制而成。混合配制而成。掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞掌握血涂片的制备和染色方法及白细胞的正常形态的正常形态原理原理 目的目的器材器材 载玻片、推片、显微载玻片、推片、显微镜、微量吸管、移液枪镜、微量吸管、移液枪试剂试剂 姬姆萨染色液、磷
2、酸姬姆萨染色液、磷酸缓冲液、甲醇缓冲液、甲醇标本标本 抗凝血抗凝血注意：操作中请穿实验服并注意：操作中请穿实验服并带一次性手套操作。带一次性手套操作。血血 涂涂 片制片制 备备推片（夹角保持30 -45）载玻片血液（10微升）将推片匀速向前，勿停顿。涂片的厚薄取决于速度和角度：快、大(厚)。慢、小（薄）一张满意的血涂片应厚薄均匀 头 体 尾鲜明涂片干燥后用铅笔在血涂片的头部写上姓名和编号李四B 1 2 3血血 涂涂 片片 染色染色稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色稀释后的姬姆萨染色液覆盖整个血膜染色15minPBS磷酸缓冲液漂洗磷酸缓冲液漂洗（切勿先倒掉染液）（切勿先倒掉染液）涂片经水洗干燥
3、后即可镜检涂片经水洗干燥后即可镜检李李四四1 12 23 3涂片快速干燥后加甲醇固定涂片快速干燥后加甲醇固定2-3min血涂片的观察血涂片的观察1.1.染色情况染色情况(满意、偏酸、偏碱）满意、偏酸、偏碱）2.2.细胞分布情况细胞分布情况红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双红细胞：淡红色，无核的圆形细胞，因红细胞为双凹形，故凹形，故边缘部分边缘部分染色较染色较深深，中心较浅中心较浅，直径，直径7-8微微米米嗜中性：体积略大于红细胞，细胞核被染成紫色分叶状，可分1-5叶。直径10-12微米嗜酸性：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通嗜酸性：略大于嗜中性白细胞，细胞核染成紫色，通常为常为
4、2叶，叶，胞质充满嗜酸性大圆颗粒胞质充满嗜酸性大圆颗粒，被染成，被染成鲜红色鲜红色。直径直径10-15微米。微米。嗜碱性：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小嗜碱性：体积略小于嗜酸性白细胞，细胞质中有大小不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的不等被染成紫色的颗粒，颗粒数目较嗜酸性白细胞的颗粒少，核颗粒少，核1-2叶，染成淡蓝色。叶，染成淡蓝色。淋巴细胞：可观察到中、小型两种。小淋巴细胞与红细胞大小相似，圆形，核致密，染成深紫色。周围仅一薄层嗜碱性染成淡蓝的细胞质。单核细胞：体积最大，细胞圆形。胞质染成灰蓝色。核呈肾形或马蹄形，染色略浅于淋巴细胞的核。直径14-20微米1.你认为本次实验操作中需要注意的问题是什么？2.试描述一下你所看到的白细胞，包括细胞的形态/大小及染色情况。其中，你看到的红细胞又是一个什么情形？分析讨论分析讨论