[粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究]外周血移植.docx

上传人:1398****507 文档编号:44247091 上传时间:2022-09-20 格式:DOCX 页数:5 大小:13.13KB
返回 下载 相关 举报
[粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究]外周血移植.docx_第1页
第1页 / 共5页
[粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究]外周血移植.docx_第2页
第2页 / 共5页
点击查看更多>>
资源描述

《[粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究]外周血移植.docx》由会员分享,可在线阅读,更多相关《[粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中Ⅱ型树突状细胞的相关性研究]外周血移植.docx(5页珍藏版)》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。

1、粒系集落刺激因子与供体外周血移植物中型树突状细胞的相关性研究外周血移植 摘 要 目的:测定粒系集落刺激因子(G-CSF)动员前、后正常异基因供者外周血(PB)移植物中I型树突状细胞(DC1)、型树突状细胞(DC2)的数量及DC2/DC1比例;探讨G-CSF对于PB中DC1、DC2数量及DC2/DC1比例的影响。方法:以流式细胞术(FCM)检测11例G-CSF动员的异基因PB造血干细胞移植物(G-PBSC)中的DC1、DC2数量与DC2/DC1比例;并与8例正常供者动员前PB进行比较。结果:正常异基因PB造血干细胞(PBSC)供者以G-CSF动员后,能选择性增加移植物中DC2数量(26.7610

2、6/L vs 14.92106/L;P=0.029)和DC2/DC1比例(2.021.43 vs 1.000.37;P=0.044),但DC1无显著改变。结论:移植前以G-CSF动员正常异基因PBSC供者,可选择性提高DC2的数量,而DC1数量无明显增加。 关键词 粒系集落刺激因子 树突状细胞 异基因外周血造血干细胞移植 急性移植物抗宿主病 doi:10.3969/j.issn.1007-614x.2010.01.114 资料与方法 19例PB标本均取自2006年6月2007年2月接受Allo-PBSCT的正常供体,其中动员后PB 11例,未动员PB 8例。DC鉴定:DC为阳性表达抗HLA-D

3、R-PE CY5兼阴性表达髓、淋系特异性混合标记Lin-FITC。DC分型:抗CD11c PE或抗CD123 PE用来确定DC亚群。供体PBSC动员和采集:供体接受rhG-CSF(吉粒芬),5g/kg,每12小时1次连续皮下注射,-40天;第5和(或)第6天以血细胞分别机采集PBSC。 单抗和溶血剂:单抗Lineage Cocktail1-FITC购自BD公司,鼠抗人HLA-DR-PE-CY5、鼠抗人CD11c-PE、人CD123-PE、Caltag Cal-LyseTM溶血剂均购自Caltag公司。 流式细胞仪(FACS):所用FACS为Beckman Colter公司产品,型号EPICS-

4、XL。数据获得和分析软件为CellQuest3.2。 标本采集和抗体标记:抽取G-CSF动员前、后PB 2ml,肝素抗凝,按说明书操作,取干燥干净离心管3支,每管加簇新抗凝PB 100l,试验管(A/B管)和比照管(O管)按表1加入荧光标记抗体,室温223避光孵育15分钟后加入Caltag Cal-LyseTM溶血剂,室温避光再放置10分钟,继加去离子水1ml,室温避光放置10分钟。300g离心5分钟,弃上清,磷酸缓冲盐(PBS)1ml洗涤2次,然后加入500l PBS,混匀后马上上机检测。见表1。 流式细胞术(FCM)检测分析:运行FACSComp,调整PMT电压和荧光补偿,检查仪器灵敏度。

5、运用CellQuest软件获得1万万个细胞。用FSC设阈值,解除细胞碎片的干扰。在SSC/FSC散点图中设门。三色试剂分析法检测PBDC亚群的设门策略:在SSC对Lineage 1的细胞分布图中以Lin-设门,用Lin-区的细胞在双重设门中获得HLA-DR与CD11c双阳性的细胞,并同时获得HLA-DR与CD123双阳性的细胞,其中Lin-HLA-DR+CD11c+细胞为DC1,Lin-HLA-DR+CD123+细胞为DC2。用CellQuest软件分析CD11c阳性及CD123阳性的DC分别在所测PB标本白细胞(WBC)中的百分比。所取标本均以手工计数PBWBC,DC1、DC2肯定数为WBC

6、肯定数乘以相应的百分数。 统计方法:应用SPSS11.5软件包处理数据。 结 果 动员前后PBWBC的数量改变:正常供体在动员前PBWBC肯定计数为7.01109/L,而动员后PBWBC显著增至43.11109/L(P=0.000)。 动员前后PBDC1的数量改变:G-CSF动员前、后供体PBDC1肯定数分别为14.21106/L和18.02106/L,两者无统计学差异(P=0.541)。 动员前后PBDC2的数量改变:供体经G-CSF动员后PBDC2数量(26.76106/L)显著超过动员前(14.92106/L)的水平(P=0.029)。 动员前后PB中DC2/DC1的比例改变:动员前PB

7、中DC2/DC1的比例为1.000.37,而在动员后该比例高达2.021.43,差异有统计学意义(P=0.044)。 讨 论 探讨证明,G-PBSC移植物中的确具有高DC2优势。正常供者经短期G-CSF刺激后,PBDC1在动员前、后无明显改变,而PBDC2较之动员前确有显著性增高。考虑到WBC手工计数可以影响到PBDC肯定计数结果的精确性,故进一步分析动员前、后DC2/DC1比例的改变,这样即可完全消退WBC手工计数所造成的偏差。 体外试验证明,从G-PBSC移植物中分别纯化的DC1亚群,在未经CD40L或TNF-激活的状态下,也可以刺激初始型CD4+CD45RA+T细胞产1型CK增多,朝向T

8、h1型细胞极化;但未经活化的DC2亚群却不能激活CD4+CD45RA+T细胞。可见G-PBSC移植物的Th2型极化现象好像不能以移植物中的未活化DC2亚群的干脆效应来说明。 参考文献 1 Pan L,Delmonte J Jr,Jalonen CK,Ferrara JL.Pretreatment of donor mice with granlocyte colony-stimlating factor polarizes donor T lymphocytes toward type-2 cytokine production and reduces severity of experime

9、ntal graft-versushost disease.Blood.1995:86,4422. 2 Zeng D,Dejbakhsh-Jones S,Strober S.Granlocyte colony- stimlating factor reduces the capacity of blood mononuclear cells to induce graft-versus-host disease:impact on blood progenitor cell transplantation.Blood.1997:90,453. 3 Reddy V,Hill GR,Pan L,et al.G-CSF modlates cytokine profile of dendritic cells and decreases acute graft-vs-host disease through effects on the donor rather than the recipient.Transplantation.2000:69,691.

展开阅读全文
相关资源
相关搜索

当前位置:首页 > 应用文书 > 工作计划

本站为文档C TO C交易模式,本站只提供存储空间、用户上传的文档直接被用户下载,本站只是中间服务平台,本站所有文档下载所得的收益归上传人(含作者)所有。本站仅对用户上传内容的表现方式做保护处理,对上载内容本身不做任何修改或编辑。若文档所含内容侵犯了您的版权或隐私,请立即通知淘文阁网,我们立即给予删除!客服QQ:136780468 微信:18945177775 电话:18904686070

工信部备案号:黑ICP备15003705号© 2020-2023 www.taowenge.com 淘文阁