酶免疫技术课件.ppt

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1、酶免疫技术第1页，此课件共59页哦第二节酶免疫技术的分类第二节酶免疫技术的分类一、均相酶免疫测定一、均相酶免疫测定二、非均相酶免疫测定二、非均相酶免疫测定第三节酶联免疫吸附试验第三节酶联免疫吸附试验一、基本原理一、基本原理二、方法类型及反应原理二、方法类型及反应原理思考题思考题小结小结第2页，此课件共59页哦基本要求1、掌握：酶免疫技术的特点和分类掌握：酶免疫技术的特点和分类2 2、掌握：酶联免疫吸附试验、掌握：酶联免疫吸附试验3 3、掌握：酶免疫测定的应用、掌握：酶免疫测定的应用4 4、了解：膜载体的酶免疫测定及应用、了解：膜载体的酶免疫测定及应用第3页，此课件共59页哦放放射射免免疫疫技技

2、术术发发光光免免疫疫技技术术酶酶免免疫疫技技术术三大经典标记技术三大经典标记技术三大经典标记技术第4页，此课件共59页哦第一节第一节 酶免疫技术的特点酶免疫技术的特点第5页，此课件共59页哦主要试剂主要试剂:酶标记的抗体或抗原酶标记的抗体或抗原酶标物特点：酶标物特点：免疫学活性免疫学活性 酶对底物的催化活性酶对底物的催化活性抗原抗体反应的特异性抗原抗体反应的特异性+酶高效催化反应的专一性酶高效催化反应的专一性原理及特点原理及特点第6页，此课件共59页哦特点：特点：灵敏度高、特异性强、准确灵敏度高、特异性强、准确性好性好酶标记试剂能够较长时间保酶标记试剂能够较长时间保持稳定持稳定操作简便、对环境

3、没有污染。操作简便、对环境没有污染。易与其它技术偶联易与其它技术偶联衍生出适用范围更广的新方衍生出适用范围更广的新方法法。原理：原理：酶标抗体（抗原）与抗原酶标抗体（抗原）与抗原（抗体）的特异性反应（抗体）的特异性反应酶对底物的显色反应酶对底物的显色反应对抗原或抗体进行定位、定性对抗原或抗体进行定位、定性或定量的测定分析或定量的测定分析 原理及特点原理及特点第7页，此课件共59页哦标记酶的要求：标记酶的要求：活性高活性高 性质稳定性质稳定 专一性强专一性强 酶催化底物的显色信号易于判断和测量酶催化底物的显色信号易于判断和测量 方法敏感，重复性好，简单易行方法敏感，重复性好，简单易行 酶的底物易

4、于配制保存，酶及底物价廉酶的底物易于配制保存，酶及底物价廉 一、酶和酶作用底物一、酶和酶作用底物第8页，此课件共59页哦辣根过氧化物酶（辣根过氧化物酶（HRPHRP）糖蛋白（主酶）糖蛋白（主酶）亚铁血红素（辅基）亚铁血红素（辅基）主酶与酶活性无关主酶与酶活性无关 辅基是酶的活性中心辅基是酶的活性中心RZRZ值：值：403nm 403nm（辅基）（辅基）与与275nm275nm（主酶）（主酶）ODOD值之比值之比 RZRZ值与酶活性无关，值与酶活性无关，酶活性单位比酶活性单位比RZRZ值更值更为重要为重要 ELISAELISA中应用最为广泛中应用最为广泛的标记用酶的标记用酶 常用酶常用酶酶和酶作

5、用底物酶和酶作用底物第9页，此课件共59页哦碱性磷酸酶（碱性磷酸酶（APAP）菌源性菌源性AP AP 肠粘膜肠粘膜APAP 半乳糖苷酶（半乳糖苷酶（-Gal-Gal）用于均相酶用于均相酶免疫测定免疫测定 常用酶常用酶酶和酶作用底物酶和酶作用底物第10页，此课件共59页哦HRPHRP的底物的底物 DHDH2 2+H+H2 2O O2 2 D+2H D+2H2 2O O HRPHRP供氢体供氢体DHDH2 2习惯上被称为底物，底物有多种习惯上被称为底物，底物有多种 H H2 2O O2 2为受氢体，为受氢体，HRPHRP对受氢体的专一性很高对受氢体的专一性很高 常用底物常用底物酶和酶作用底物酶和酶

6、作用底物第11页，此课件共59页哦HRPHRP的常见底物的常见底物 邻苯二胺邻苯二胺 OPDOPD四甲基联苯胺四甲基联苯胺 TMBTMB5-5-氨基水杨酸氨基水杨酸5-ASA 5-ASA 2,2-2,2-氨基氨基-二二(3-(3-乙基乙基-苯并噻唑啉苯并噻唑啉磺酸磺酸-6)-6)铵盐铵盐 ABTSABTS常用底物常用底物酶和酶作用底物酶和酶作用底物第12页，此课件共59页哦OPDOPD反应后显橙黄色，反应后显橙黄色，加酸终止反应后呈加酸终止反应后呈棕黄色，测定波长棕黄色，测定波长492nm492nm。不稳定，。不稳定，致癌性。致癌性。TMBTMB反应后显蓝色反应后显蓝色 ，加酸终止反应后变为加

7、酸终止反应后变为黄色黄色,测定波长测定波长450nm 450nm，稳定，无致癌性，稳定，无致癌性，ELISAELISA中应用最广泛中应用最广泛的底物。的底物。HRPHRP的常见底物的常见底物 酶和酶作用底物酶和酶作用底物第13页，此课件共59页哦APAP的的底物底物-Gal-Gal的底物的底物 对对-硝基苯磷酸酯（硝基苯磷酸酯（pNPP pNPP）4-4-甲基伞酮基甲基伞酮基-D-D半半-乳糖苷（乳糖苷（4MUG 4MUG）经经APAP作用后的产物为黄色对硝基作用后的产物为黄色对硝基酚，最大吸收峰波长为酚，最大吸收峰波长为405 nm405 nm。酶作用后，生成高强度荧酶作用后，生成高强度荧光

8、物光物 ，用荧光计，用荧光计 测量。测量。常用底物常用底物酶和酶作用底物酶和酶作用底物第14页，此课件共59页哦酶免疫技术的核心组成部分酶免疫技术的核心组成部分 酶结合物酶结合物（conjugateconjugate）酶标记物酶标记物 通过化学反应或免通过化学反应或免疫学反应，让酶与疫学反应，让酶与抗体或抗原形成的抗体或抗原形成的结合物结合物 二、酶标记抗体或抗原二、酶标记抗体或抗原第15页，此课件共59页哦抗原要求纯度高，抗原性完整抗原要求纯度高，抗原性完整 抗体需要特异性好、效价高、亲抗体需要特异性好、效价高、亲合力强以及比活性较高，能批量生合力强以及比活性较高，能批量生产，易纯化。产，易

9、纯化。制备方法要求制备方法要求酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第16页，此课件共59页哦制备方法要求制备方法要求技术方法简单、产率高，重复性好技术方法简单、产率高，重复性好标记反应不影响酶和抗原或抗体的标记反应不影响酶和抗原或抗体的活性活性酶标记物稳定酶标记物稳定 ，不形成聚合物，不形成聚合物酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第17页，此课件共59页哦制备方法制备方法过碘酸钠法（直接法）过碘酸钠法（直接法）常用于常用于HRPHRP标记抗体或抗原标记抗体或抗原 戊二醛交联法戊二醛交联法酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第18页，此课件共59页哦戊二醛交联法戊二醛交联法戊二醛分子中有两个相同的醛基，可

10、分别与戊二醛分子中有两个相同的醛基，可分别与HRPHRP和蛋白质分子中的氨基结合。该法有一和蛋白质分子中的氨基结合。该法有一步法和二步法。二步法标记效率比一步法步法和二步法。二步法标记效率比一步法高，酶标记物质量较均一。高，酶标记物质量较均一。酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第19页，此课件共59页哦改良过碘酸钠法：改良过碘酸钠法：HRPHRP分子中与酶活性无关中的糖蛋白组分，分子中与酶活性无关中的糖蛋白组分，在过碘酸钠作用下，其中的多糖氢基被在过碘酸钠作用下，其中的多糖氢基被氧化成活泼的醛基氧化成活泼的醛基后者即可与抗体蛋白中的游离氨基交联，后者即可与抗体蛋白中的游离氨基交联，再经硼酸化钠还

11、原终止反应，得到稳定再经硼酸化钠还原终止反应，得到稳定的酶标结合物。的酶标结合物。酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第20页，此课件共59页哦纯化及鉴定纯化及鉴定标记完成后应除去反应液中的游离酶、游离抗标记完成后应除去反应液中的游离酶、游离抗体或抗原、酶聚合物以及抗体或抗原聚合物，体或抗原、酶聚合物以及抗体或抗原聚合物，避免游离酶增加非特异显色，以及游离抗体或避免游离酶增加非特异显色，以及游离抗体或抗原起竞争作用而降低特异性染色强度抗原起竞争作用而降低特异性染色强度 常用的纯化方法：常用的纯化方法：葡聚糖凝胶葡聚糖凝胶G-200/G-150G-200/G-150过柱层析纯化过柱层析纯化50%50

12、%饱和硫酸铵沉淀提纯饱和硫酸铵沉淀提纯酶标记抗体或抗原酶标记抗体或抗原第21页，此课件共59页哦固相抗体或抗原是非均相酶免技术中将游固相抗体或抗原是非均相酶免技术中将游离和结合的酶标记物迅速分离的最常用方法离和结合的酶标记物迅速分离的最常用方法 固相抗体或抗原就是把抗体或抗原结合到固固相抗体或抗原就是把抗体或抗原结合到固相载体的表面相载体的表面 三、固相载体三、固相载体第22页，此课件共59页哦要求要求 结合抗体或抗原的容量大结合抗体或抗原的容量大 抗体或抗原牢固地固定在其表面抗体或抗原牢固地固定在其表面 不影响免疫反应性不影响免疫反应性 利于反应充分进行利于反应充分进行 固相方法简便易行，快

13、速经济固相方法简便易行，快速经济种类种类塑料制品塑料制品 微颗粒微颗粒膜载体膜载体 固相载体固相载体第23页，此课件共59页哦将抗原或抗体结合于固相载体将抗原或抗体结合于固相载体用用1%1%5%5%的牛血清白蛋白或的牛血清白蛋白或5%5%20%20%小牛血清消除小牛血清消除固相载体表面未结合的位点，消除非特异性吸附固相载体表面未结合的位点，消除非特异性吸附包被包被coatingcoating封闭封闭blockingblocking包被与封闭包被与封闭第24页，此课件共59页哦第二节酶免疫技术分类第二节酶免疫技术分类 第25页，此课件共59页哦酶酶免免疫疫技技术术酶免疫组化酶免疫组化酶免疫测定酶

14、免疫测定均均 相相非均相非均相固相酶免疫测定固相酶免疫测定液相酶免疫测定液相酶免疫测定组织切片或其它标本中抗原的定位组织切片或其它标本中抗原的定位 液体标本中抗原或液体标本中抗原或抗体的定性和定量抗体的定性和定量第26页，此课件共59页哦用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定用于小分子激素和半抗原（如药物）的测定 酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶标记物与相应的抗原或抗体结合后，标记酶的活性会发生改变，不用分离结合和游离酶标酶的活性会发生改变，不用分离结合和游离酶标记物，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗记物，通过测定标记酶的活性的改变，而确定抗原或抗体的含量。原或抗体的含量。原理原理

15、一、均相酶免疫测定一、均相酶免疫测定第27页，此课件共59页哦最具代表性的两种技术最具代表性的两种技术酶放大免疫测定技术酶放大免疫测定技术EMITEMITenzyme-mutiplied immunoassay technique克隆酶供体免疫分析克隆酶供体免疫分析 CEDIACEDIAcloned enzyme donor immunoassay 均相酶免疫测定均相酶免疫测定第28页，此课件共59页哦EMITEMIT示意图示意图第29页，此课件共59页哦CEDIACEDIA示意图示意图第30页，此课件共59页哦分类：分类：液相酶免疫测定液相酶免疫测定 固相酶免疫测定固相酶免疫测定 以聚苯乙烯

16、等材料作为固相载体的酶联免疫吸附试验以聚苯乙烯等材料作为固相载体的酶联免疫吸附试验（ELISAELISA）是目前最为常用的固相酶免疫测定是目前最为常用的固相酶免疫测定与均相不同与均相不同之处之处需分离游离与结合的酶标记物需分离游离与结合的酶标记物二、非均相酶免疫测定二、非均相酶免疫测定第31页，此课件共59页哦第三节酶联免疫吸附试验第三节酶联免疫吸附试验 第32页，此课件共59页哦底物显色底物显色定性或定量的分析定性或定量的分析原理原理包被包被反应反应加入待测抗体或加入待测抗体或抗原和酶标抗原抗原和酶标抗原或抗体或抗体洗涤洗涤使结合在固相上使结合在固相上的抗原抗体复合物的抗原抗体复合物与未结合

17、的分离与未结合的分离1234一、基本原理一、基本原理第33页，此课件共59页哦固相的抗原或抗体固相的抗原或抗体 酶标记物（酶结合物酶标记物（酶结合物）酶反应的底物酶反应的底物 三个必要试剂三个必要试剂 二、方法类型及反应原理二、方法类型及反应原理第34页，此课件共59页哦双抗体夹心法双抗体夹心法（非竞争结合）（非竞争结合）检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗检测含有至少两个抗原决定簇的多价抗原。原。利用连接固相载体上的抗体和酶标抗体利用连接固相载体上的抗体和酶标抗体可分别与样品中被检测抗原分子上两个可分别与样品中被检测抗原分子上两个不同抗原决定簇结合，形成固相抗体不同抗原决定簇结合，形成固相抗体

18、抗原酶标抗体免疫复合物。抗原酶标抗体免疫复合物。ELISA检测抗原的方法检测抗原的方法第35页，此课件共59页哦双抗体夹心法双抗体夹心法方法：方法：用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，用已知抗体包被，加入待检血清，再加酶标抗体，加底物显色加底物显色应用：应用：二价或二价以上的较大分子抗原测定二价或二价以上的较大分子抗原测定 乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、乙型肝炎表面抗原、甲胎蛋白、HCGHCG等等ELISAELISA检测抗原的方法检测抗原的方法第36页，此课件共59页哦1、已知抗体包 被于载体表面3、加酶标抗体 与抗原结合4、加酶作用的底物产生颜色2、加待检物抗原与抗体结合4、加酶作用的

19、底物 不产生颜色双抗体夹心法测抗原双抗体夹心法测抗原1、已知抗体包 被于载体表面2、加待检物无抗 原与抗体结合3、加酶标抗体 无抗原结合+-E EE EE EE EE EE EE EE EE E第38页，此课件共59页哦竞争法竞争法 方法：方法：用已知抗体包被，加入待测血清，再加酶标抗原，酶标用已知抗体包被，加入待测血清，再加酶标抗原，酶标抗原与待检物竞争与包被物结合。加底物显色抗原与待检物竞争与包被物结合。加底物显色。应用：应用：用于只有一个抗原决定簇的小分子半抗原（药物、激用于只有一个抗原决定簇的小分子半抗原（药物、激素等）素等）ELISAELISA检测抗原的方法检测抗原的方法第39页，此

20、课件共59页哦.第40页，此课件共59页哦竞争法测抗原竞争法测抗原+-E EE EE EE EE EE EE E2 2、加待检物、加待检物抗原与酶标抗抗原与酶标抗原竞争与抗体原竞争与抗体结合结合3 3、加酶作用、加酶作用的底物不显色的底物不显色或显色弱或显色弱3 3、加酶作用、加酶作用的底物显色的底物显色1 1、已知抗体包、已知抗体包被于载体表面被于载体表面1 1、已知抗体包、已知抗体包被于载体表面被于载体表面2 2、加待测物、加待测物和酶标抗原，和酶标抗原，酶标抗原与抗酶标抗原与抗体结合体结合E E第41页，此课件共59页哦间接法间接法方法方法 用已知抗原包被，加入待测血清，再加酶标的抗人用

21、已知抗原包被，加入待测血清，再加酶标的抗人IgGIgG（抗抗体（抗抗体或二抗）加底物显色。或二抗）加底物显色。优点优点 一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体一种酶标抗抗体检测各种与抗原相应的抗体应用应用 常用于常用于HCVHCV抗体、抗体、HIVHIV抗体和梅毒螺旋体抗体等的测定抗体和梅毒螺旋体抗体等的测定ELISAELISA检测抗体的方法检测抗体的方法第42页，此课件共59页哦第43页，此课件共59页哦1、已知抗原吸附于载体表面2、加待检物无抗体与抗原结合3、加酶标抗Ig与抗体结合4、加酶作用的底物产生颜色1、已知抗体吸附于载体表面2、加待检物有抗体与抗原结合3、加酶标的抗Ig抗体4、加酶

22、作用的底物不产生颜色间接法测抗体间接法测抗体-E EE EE EE EE EE EE EE EE E+第44页，此课件共59页哦双抗原夹心法双抗原夹心法原理：原理：类似双抗体夹心法类似双抗体夹心法操作步骤操作步骤：类似类似 应用：应用：乙型肝炎表面抗体乙型肝炎表面抗体ELISAELISA检测抗体的方法检测抗体的方法第45页，此课件共59页哦竞争法竞争法原理：原理：类似检测抗原的竞争法类似检测抗原的竞争法 应用应用：乙型肝炎病毒核心抗体乙型肝炎病毒核心抗体(HBcAb)(HBcAb)和和乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒e e抗体抗体(HBeAb)(HBeAb)的检测的检测 ELISAELISA检测抗体的

23、方法检测抗体的方法第46页，此课件共59页哦HBcAbHBcAb竞争法：竞争法：核心抗原包被在固相载体上形成固相抗原，加入核心抗原包被在固相载体上形成固相抗原，加入待测标本和酶标记的特异性核心抗体待测标本和酶标记的特异性核心抗体此时待测标本中的此时待测标本中的HBcAbHBcAb与酶标记与酶标记HBcAbHBcAb竞争与核竞争与核心抗原结合心抗原结合显色的强弱与待测标本中的显色的强弱与待测标本中的HBcAbHBcAb含量成反比。含量成反比。ELISA检测抗体的方法检测抗体的方法第47页，此课件共59页哦HBeAbHBeAb竞争法：竞争法：先将先将HBeAbHBeAb包被在固相载体上形成固相抗体

24、，加入待包被在固相载体上形成固相抗体，加入待测标本和中和抗原测标本和中和抗原HBeAbHBeAb此时待测标本中的此时待测标本中的HBeAbHBeAb和固相抗原竞争结合中和抗和固相抗原竞争结合中和抗原原HBeAbHBeAb，待测标本中，待测标本中HBeAbHBeAb浓度越高，与固相抗体浓度越高，与固相抗体结合的越少结合的越少显色的强弱与待测标本中的显色的强弱与待测标本中的HBeAbHBeAb含量成反比。含量成反比。ELISA检测抗体的方法检测抗体的方法第48页，此课件共59页哦捕获法捕获法 应用：应用：病原体急性感染诊断中的病原体急性感染诊断中的IgMIgM型抗体型抗体 甲型肝炎甲型肝炎HAV-

25、IgMHAV-IgM抗体抗体 乙型肝炎病毒核心乙型肝炎病毒核心HBc-IgMHBc-IgM抗体抗体ELISAELISA检测抗体的方法检测抗体的方法第49页，此课件共59页哦捕获法捕获法 原理：原理：抗人抗人IgMIgM链抗体包被链抗体包被捕获待测标本中捕获待测标本中IgMIgM类抗体类抗体加入特异性抗原和酶标记特加入特异性抗原和酶标记特异性抗原的抗体异性抗原的抗体 底物显色底物显色 第50页，此课件共59页哦捕获法原理捕获法原理+-E EE EE EE EE E 1 1、固相化抗人、固相化抗人IgMIgM1 1、固相化抗人、固相化抗人IgMIgM2 2、加待测物、加待测物特异性特异性IgMIg

26、M与与非特异性非特异性IgMIgM和抗人和抗人IgMIgM结合结合3 3、加特异性、加特异性抗原，与特异抗原，与特异性抗体结合性抗体结合4 4、加酶标抗体、加酶标抗体与特异性抗原结与特异性抗原结合，加底物显色合，加底物显色2 2、加待测物、加待测物只有非特异性只有非特异性IgMIgM和抗人和抗人IgMIgM结合结合3 3、加特异性抗、加特异性抗原，不能与非原，不能与非特异性特异性IgMIgM结合结合4 4、加酶标抗体、加酶标抗体无抗原结合，无抗原结合，加底物不显色加底物不显色第51页，此课件共59页哦第第四四节节 酶免疫测定的应用酶免疫测定的应用第52页，此课件共59页哦均均相相酶酶免免疫疫测

27、测定定主主要要用用于于药药物物和和小小分分子子物物质质的的检检测测。非非均均相相免免疫疫测测定定中中的的ELISAELISA应应用用更更为为广广泛泛，ELISAELISA广广泛泛用用于于传传染染病病的的诊诊断断，病病毒毒如如病病毒毒性性肝肝炎炎（甲甲肝肝抗抗体体、“乙乙肝肝三三对对”、丙丙肝肝抗抗体体、丁丁肝肝抗抗体体、戊戊肝肝抗抗体体）、风风疹疹病病毒毒、疱疱疹疹病病毒毒、轮轮状状病病毒毒等等；细细菌菌如如结结核核杆杆菌菌、幽幽门门螺螺杆杆菌菌等等。也也用用于于一一些些蛋蛋白白质质检检测测，如如各各种种免免疫疫球球蛋蛋白白、补补体体、肿肿瘤瘤标标志志物物（甲甲胎胎蛋蛋白白、癌癌胚胚抗原、前列

28、腺特异性抗原等）。抗原、前列腺特异性抗原等）。第53页，此课件共59页哦第54页，此课件共59页哦乙肝病毒表面抗原乙肝病毒表面抗原采用单克隆抗采用单克隆抗HBs包被反应板，加入包被反应板，加入待测标本，同时加入多克隆抗待测标本，同时加入多克隆抗HBsHRP，当标本中存在，当标本中存在HBsAg时，该时，该HBsAg与包被抗与包被抗HBs结合形成复合结合形成复合物，加入物，加入TMB底物产生显色反应。底物产生显色反应。第55页，此课件共59页哦1、从冷藏室取出试剂盒，室温放从冷藏室取出试剂盒，室温放30分钟，将浓分钟，将浓缩洗涤液缩洗涤液1：20稀释稀释2、加入待测标本、加入待测标本0、05毫升

29、，并设阴阳性对照和空毫升，并设阴阳性对照和空白孔。白孔。3、加酶结合物每孔、加酶结合物每孔0、05毫升，空白对照孔不加，毫升，空白对照孔不加，37孵育孵育30分钟。分钟。4、洗板、洗板5、加显色剂，先加显色剂、加显色剂，先加显色剂A，再加显色剂，再加显色剂B，混，混匀，匀，37避光孵育避光孵育15分钟分钟.6、终止反应。、终止反应。7、测定、测定OD值。值。第56页，此课件共59页哦结果判断：结果判断：Cutoff值计算：值计算：COV阴性对照平均阴性对照平均OD值值21标本标本OD值值COV为阳性，标本为阳性，标本OD值，值，COV为阴性为阴性阴性对照阴性对照OD值低于值低于0、05作作0、

30、05计算，计算，高于高于0、05按实际按实际OD值计算。值计算。第57页，此课件共59页哦酶免疫技术是标记免疫技术的一种，它是以酶标记的抗酶免疫技术是标记免疫技术的一种，它是以酶标记的抗原或抗体作为主要试剂的免疫检测方法，在抗原与抗体原或抗体作为主要试剂的免疫检测方法，在抗原与抗体的特异性反应完成后，通过酶对底物的作用进一步提高的特异性反应完成后，通过酶对底物的作用进一步提高敏感性。酶免疫技术可分为酶免疫组织化学技术和酶免敏感性。酶免疫技术可分为酶免疫组织化学技术和酶免疫测定两大类疫测定两大类,后者根据抗原抗体反应后是否需要分后者根据抗原抗体反应后是否需要分离结合与游离的酶标记物而分为均相和非

31、均相两种离结合与游离的酶标记物而分为均相和非均相两种类型。类型。均相酶免疫测定主要用于小分子激素和半抗原的测均相酶免疫测定主要用于小分子激素和半抗原的测定，非均相酶免疫测定根据是否使用固相支持物，定，非均相酶免疫测定根据是否使用固相支持物，又可分为液相和固相酶免疫测定两种类型。最常用又可分为液相和固相酶免疫测定两种类型。最常用的是以聚苯乙烯等材料作为固相载体的酶联免疫吸的是以聚苯乙烯等材料作为固相载体的酶联免疫吸附试验（附试验（ELISAELISA）,其原理可以有夹心法、竞争法、其原理可以有夹心法、竞争法、间接法和捕获法等。间接法和捕获法等。小小 结结第58页，此课件共59页哦目前目前ELISAELISA双抗体夹心法是双抗体夹心法是A A、酶标记特异性抗体用于抗原的检测、酶标记特异性抗体用于抗原的检测B B、属于竞争结合测定、属于竞争结合测定C C、先将待测抗原包被于固相载体上、先将待测抗原包被于固相载体上D D、标记一种抗体可检测多种抗原、标记一种抗体可检测多种抗原E E、能用于半抗原物质的检测、能用于半抗原物质的检测第59页，此课件共59页哦