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1、荧光免疫技术第1页，此课件共64页哦第一第一节概述概述一、一、荧光的基本知光的基本知识二、二、荧光物光物质第二第二节荧光抗体技光抗体技术一、一、标本的制作本的制作二、二、荧光抗体的制光抗体的制备三、三、荧光抗体染色与光抗体染色与结果判断果判断四、四、荧光光显微微镜的基本的基本结构构第2页，此课件共64页哦第三第三节荧光免疫分析的光免疫分析的类型型一、一、时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定二、二、荧光偏振免疫光偏振免疫测定定三、三、荧光光酶免疫免疫测定定第四第四节荧光免疫技光免疫技术在医学在医学检验中的中的应用用一、一、荧光抗体技光抗体技术的的应用用二、二、荧光免疫光免疫测定的定的应用用思考思考题
2、小小结第3页，此课件共64页哦第一第一节概概 述述第4页，此课件共64页哦荧光（光（fluorescence）荧光物光物质吸收激吸收激发光的能量后，光的能量后，电子从基子从基态跃迁到迁到激激发态，当其回复至基，当其回复至基态时，以，以发射光形式射光形式释放出能量，放出能量，称称为荧光。光。一、一、荧光的基本知光的基本知识第5页，此课件共64页哦发射光射光谱和激和激发光光谱 发射光射光谱是指固定激是指固定激发波波长，在不同波，在不同波长下下记录的的样品品发射射荧光的光的强度。度。激激发光光谱是指固定是指固定检测发射波射波长，用不同波，用不同波长的激的激发光激光激发样品品记录的相的相应的的荧光光发
3、射射强度。度。荧光的基本知光的基本知识第6页，此课件共64页哦荧光效率光效率定定义:荧光物光物质分子将光能分子将光能转变成成荧光的百分率光的百分率计算公式算公式:荧光效率光效率=荧光的基本知光的基本知识第7页，此课件共64页哦荧光寿命光寿命定定义:荧光物光物质被激被激发后所后所产生的生的荧光衰减到一定程度光衰减到一定程度时所用的所用的时间。各种各种荧光物光物质的的荧光寿命不同。光寿命不同。荧光的基本知光的基本知识第8页，此课件共64页哦荧光淬光淬灭 定定义:荧光物光物质在某些理化因素作用下，在某些理化因素作用下，发射射荧光减弱甚至消退光减弱甚至消退称称为荧光淬光淬灭。如紫外。如紫外线照射、高（
4、照射、高（20）、苯胺、酚、硝基）、苯胺、酚、硝基苯、苯、I-等等。荧光的基本知光的基本知识第9页，此课件共64页哦荧光偏振光偏振 FHFL PFHFL荧光的基本知光的基本知识第10页，此课件共64页哦荧光物光物质最大吸收光最大吸收光谱最大最大发射光射光谱应用用异硫异硫氰酸酸荧光素光素 (FITC)(FITC)490490495nm495nm520520530nm 530nm（黄（黄绿色）色）FATFAT、荧光偏振免疫光偏振免疫测定定四乙基四乙基罗丹明丹明 (RB200)(RB200)570570575nm575nm595595600nm600nm（橙（橙红色）色）FITCFITC的的衬比染色
5、或双比染色或双标记FATFAT四甲基异硫四甲基异硫氰酸酸罗丹丹明明 (TRITC)(TRITC)550nm550nm620nm620nm（橙（橙红色）色）FITCFITC的的衬比染色或双比染色或双标记FATFAT藻藻红蛋白（蛋白（PEPE）490-560nm490-560nm595nm595nm（红色）色）双双标记FATFAT、流式、流式细胞胞术7-7-氨基氨基-4-4-甲基香豆素甲基香豆素354nm354nm430nm430nm（蓝色）色）双双标记或多或多标记FATFATEuEu3+3+螯合物螯合物340nm340nm613nm613nm时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定荧光物光物质是一是一类
6、能吸收激能吸收激发光的光能而光的光能而发射射荧光的物光的物质。常用的常用的荧光物光物质 二、二、荧光物光物质第11页，此课件共64页哦第第二二节 荧光抗体技光抗体技术第12页，此课件共64页哦荧光抗体技光抗体技术的基本原理的基本原理 荧光素光素标记抗体与切片中抗体与切片中组织细胞抗原反胞抗原反应，洗，洗涤分离后分离后荧光光显微微镜观察呈察呈现特异特异荧光的抗原抗体复合光的抗原抗体复合物及其部位，物及其部位，对组织细胞抗原胞抗原进行定性和定位行定性和定位检测，或或对自身抗体自身抗体进行定性和滴度行定性和滴度测定。定。第13页，此课件共64页哦荧光抗体技光抗体技术的内容的内容 荧光抗体制光抗体制备
7、标本制作本制作荧光抗体染色光抗体染色荧光光显微微镜检查第14页，此课件共64页哦抗体要求抗体要求 高特异性高特异性高高亲和力和力 经纯化提取化提取IgG 一、一、荧光抗体的制光抗体的制备第15页，此课件共64页哦有能与蛋白有能与蛋白质形成共价健的化学基形成共价健的化学基团，与蛋白，与蛋白质结合后不易解离，而未合后不易解离，而未结合的色素及其降解合的色素及其降解产物易于清除。物易于清除。荧光效率高，与蛋白光效率高，与蛋白质结合后，仍保持合后，仍保持较高的高的荧光效率。光效率。荧光色光色泽与背景与背景组织的色的色泽对比比鲜明。明。与蛋白与蛋白质结合后不影响蛋白合后不影响蛋白质原有的生化与免疫性原有
8、的生化与免疫性质。标记方法方法简单、安全无毒。、安全无毒。与蛋白与蛋白质的的结合物合物稳定，易于保存。定，易于保存。荧光素要求光素要求荧光抗体的制光抗体的制备第16页，此课件共64页哦抗体的抗体的荧光素光素标记标记原原理理:利利用用抗抗体体蛋蛋白白的的自自由由氨氨基基与与FITC的的异异硫硫氰基基在在碱碱性性溶溶液液中中形形成成硫硫碳碳酰胺胺键，使抗体与，使抗体与FITC结合成合成荧光抗体。光抗体。标记方法方法:搅拌法：拌法：适于适于标记体体积较大、蛋白含量大、蛋白含量较高的抗体。高的抗体。标记时间 短，短，荧光素光素用量少，但有非特异性染色。用量少，但有非特异性染色。透析法：透析法：适于适于
9、标记样品量少，蛋白含量低的抗体。品量少，蛋白含量低的抗体。标记比比较匀，匀，非非特异染色特异染色较低。低。荧光抗体的制光抗体的制备第17页，此课件共64页哦去除游离去除游离荧光素及其降解光素及其降解产物：物：透析或凝胶透析或凝胶过滤去除去除荧光素未光素未结合和合和结合合过度的抗体：度的抗体：阴离子交阴离子交换层析法析法去除交叉反去除交叉反应或非期望抗体：或非期望抗体：动物肝粉吸收或固相抗原吸收物肝粉吸收或固相抗原吸收荧光抗体的光抗体的纯化化荧光抗体的制光抗体的制备第18页，此课件共64页哦荧光素与蛋白光素与蛋白结合率：合率：F/P=抗体效价：抗体效价：双向免疫双向免疫扩散散试验抗体特异性：抗体
10、特异性：吸收吸收试验、抑制、抑制试验抗体抗体特异性染色滴度：抗体抗体特异性染色滴度：倍比稀倍比稀释荧光抗体的光抗体的鉴定定荧光抗体的制光抗体的制备第19页，此课件共64页哦-20：保存保存12年年真空干燥：真空干燥：长期保存期保存荧光抗体的保存光抗体的保存荧光抗体的制光抗体的制备第20页，此课件共64页哦组织切片：切片：冷冷冻切片、石蜡切片（最常用）切片、石蜡切片（最常用）印片：印片：肝、脾、淋巴肝、脾、淋巴结等器官或等器官或组织 涂片：涂片：各种体液、穿刺液、各种体液、穿刺液、细菌培养物和菌培养物和细胞胞悬液液培养培养细胞：胞：单层培养培养细胞胞标本的本的类型型二、二、标本的制作本的制作第2
11、1页，此课件共64页哦冷冷冻切片：切片：操作操作简单，抗原，抗原损失少，失少，组织细胞胞结构欠清晰。构欠清晰。石蜡切片：石蜡切片：组织细胞胞结构构显现清楚，抗原清楚，抗原损失多。失多。组织切片的切片的类型型标本的制作本的制作第22页，此课件共64页哦固定固定剂：乙醇、甲醇、丙乙醇、甲醇、丙酮、甲、甲醛等等保保存：存：4、-20标本本的固定和保存的固定和保存标本的制作本的制作第23页，此课件共64页哦直接法直接法直接直接荧光抗体染色法示意光抗体染色法示意图 荧光素光素标记的特异性的特异性抗体直接与相抗体直接与相应抗原抗原反反应。三、三、荧光抗体染色及光抗体染色及结果判断果判断第24页，此课件共6
12、4页哦间接法接法特异性抗体与相特异性抗体与相应抗原抗原反反应，荧光素光素标记的抗的抗抗体再与第一抗体抗体再与第一抗体结合。合。间接接荧光抗体染色法示意光抗体染色法示意图 荧光抗体染色及结果判断第25页，此课件共64页哦双双标记法法 两种两种荧光素分光素分别标记的两种不同的特异性抗体，与同一的两种不同的特异性抗体，与同一标本反本反应，荧光光显微微镜观察两种察两种颜色色荧光。光。荧光抗体染色及光抗体染色及结果判断果判断第26页，此课件共64页哦 设立立实验对照照:阳性阳性对照和阴性照和阴性对照照区分特异和非特异染色区分特异和非特异染色阳性阳性细胞胞显色分布色分布:胞胞质型、胞核型和膜表面型型、胞核
13、型和膜表面型荧光抗体染色光抗体染色结果判断果判断荧光抗体染色及光抗体染色及结果判断果判断第27页，此课件共64页哦 “-”：无或无或仅见极微弱极微弱荧光。光。“+”：荧光光较弱但清楚可弱但清楚可见。“+”：荧光明亮。光明亮。“+”：耀眼耀眼强荧光。光。特异特异荧光光强度度“+”以上判定以上判定为阳性，阳性，对照光照光应呈呈“-”或或“”。根据呈根据呈+的血清最高稀的血清最高稀释度判定特异性抗体效价。度判定特异性抗体效价。荧光抗体染色光抗体染色结果判断果判断荧光抗体染色及光抗体染色及结果判断果判断第28页，此课件共64页哦荧光光显微微镜 利用一定波利用一定波长的激的激发光光对样品品进行激行激发，
14、产生一定波生一定波长的的荧光，光，对样品品结构或其构或其组分分进行定性、定位、行定性、定位、定量定量观察察检测。四、四、荧光光显微微镜的基本的基本结构构第29页，此课件共64页哦光源：光源：高高压汞灯、氙灯或汞灯、氙灯或卤素灯素灯 滤光片：光片：隔隔热、激、激发和吸收和吸收滤光片光片光路：光路：透射光、落射光透射光、落射光聚光器：聚光器：明明视野、暗野、暗视野和相差野和相差荧光聚光器光聚光器镜头：消色差消色差镜头 荧光光显微微镜荧光光显微微镜的基本的基本结构构第30页，此课件共64页哦隔隔热滤光片：光片：阻断阻断红外外线通通过而隔而隔热。激激发滤光片：光片：位于光源和物位于光源和物镜之之间，能
15、，能选择性地透性地透过紫外紫外线可可见波波长 的光域，的光域，提供合适的激提供合适的激发光。光。吸收吸收滤光片：光片：位于物位于物镜和目和目镜之之间，阻断激，阻断激发光而使光而使发射的射的荧光透光透过，保，保护眼睛。眼睛。荧光光显微微镜滤光片光片荧光光显微微镜的基本的基本结构构第31页，此课件共64页哦透射光：透射光：照明光照明光线从从标本本下下经聚光器透聚光器透过标本本进入入物物镜。落射光：落射光：照明光照明光线从从标本本上上经垂直照明器落射到垂直照明器落射到标本，本，经标本反射本反射进入入物物镜。透射透射荧光光显微微镜光路光路(a)落射落射荧光光显微微镜光路光路(b)荧光光显微微镜光路光路
16、荧光光显微微镜的基本的基本结构构第32页，此课件共64页哦第第三三节 荧光免疫分析的光免疫分析的类型型第33页，此课件共64页哦荧光免疫分析的基本原理光免疫分析的基本原理 将抗原抗体反将抗原抗体反应与与荧光物光物质发光分析相光分析相结合，用合，用荧光光检测仪检测抗原抗体复合物中特异性抗原抗体复合物中特异性荧光光强度，度，对液体液体标本中微量或超微量物本中微量或超微量物质进行定量行定量测定。定。第34页，此课件共64页哦荧光抗体技光抗体技术荧光免疫光免疫测定定均相均相荧光免疫光免疫测定定（homogeneous fluorescence immunoassay）非均相非均相荧光免疫光免疫测定定（
17、heterogeneous fluorescence immunoassay）荧光免疫技光免疫技术荧光免疫技光免疫技术是将抗原抗体反是将抗原抗体反应的特异性与的特异性与荧光技光技术的敏的敏感性相感性相结合，合，对抗原或抗体抗原或抗体进行定性、定位或定量行定性、定位或定量检测。荧光免疫技光免疫技术的的类型型第35页，此课件共64页哦荧光免疫光免疫测定的方法定的方法类型型 非均相非均相荧光免疫光免疫测定：定：时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定、定、荧光光酶免疫免疫测定定均相均相荧光免疫光免疫测定：定：荧光偏振免疫光偏振免疫测定定第36页，此课件共64页哦自自发荧光寿命短光寿命短:1ns10ns镧系元素
18、寿命系元素寿命长:10s1000s短寿命短寿命荧光完全衰光完全衰变后再后再测定定镧系系元素特异元素特异荧光光 基本原理基本原理时间分辨分辨检测原理示意原理示意图时间分辨分辨一、一、时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第37页，此课件共64页哦stokes位移位移:激激发光光谱和和发射光射光谱的波的波长差差镧系元素系元素Stokes位移大位移大(273nm)，激，激发光光谱和和发射光射光谱不重叠不重叠stokes位移位移基本原理基本原理时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第38页，此课件共64页哦发射光射光谱带较窄：窄：613nm10nm，干，干扰少少 激激发光光谱带较宽：300nm350nm，灵敏度高
19、，灵敏度高基本原理基本原理发射光射光谱和激和激发光光谱时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第39页，此课件共64页哦比活性：比活性：单位位时间每个每个标记分子被探分子被探测的信号量的信号量荧光激光激发光源光源1000次次/S激激发，比活性提高，比活性提高基本原理基本原理荧光光标记物的相物的相对比活性比活性时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第40页，此课件共64页哦结合合-二二酮体体Eu3+解离解离酸性增酸性增强液液荧光增光增强Eu3+标记抗原抗抗原抗体复合物体复合物基本原理基本原理信号增信号增强时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第41页，此课件共64页哦 镧系元素系元素铕(Eu3+)（最常用）（最常用
20、）钐(Sm3+)铽(Tb3+)钕(Nd3+)镝(Dy3+)标记物物荧光物光物质荧光寿命光寿命(ns)(ns)荧光物光物质荧光寿命光寿命(ns)(ns)非特异非特异荧光背景光背景1 11010SmSm3+3+-NTA-NTA6500065000人血清蛋白人血清蛋白4.14.1SmSm3+3+-PTA-PTA6000060000球蛋白球蛋白3.03.0EuEu3+3+-NTA-NTA714000714000细胞色素胞色素C C3.53.5EuEu3+3+-PTA-PTA925000925000FITCFITC4.54.5TbTb3+3+-PTA-PTA9600096000丹黄丹黄酰氯1414DyD
21、y3+3+-PTA-PTA10001000罗丹明丹明B B3.03.0常见荧光物质的荧光寿命时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第42页，此课件共64页哦标记方法方法 双功能螯合双功能螯合剂：1-（对-苯偶氮）苯偶氮）-EDTA异硫异硫氰酸苯基酸苯基-EDTA异硫异硫氰酸苯甲基酸苯甲基-DTTA二乙二乙烯三胺五乙酸（三胺五乙酸（DTPA）标记方法：方法：一步法：先螯合一步法：先螯合Eu3+，再，再连接蛋白接蛋白质二步法：先二步法：先连接蛋白接蛋白质，再螯合，再螯合Eu3+时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第43页，此课件共64页哦方法方法类型型 双抗体双抗体夹心法心法固相抗体固相抗体竞争法争法固相抗
22、原固相抗原竞争法争法时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第44页，此课件共64页哦方法方法类型型时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定（双抗体定（双抗体夹心法）示意心法）示意图双抗体双抗体夹心法心法固相抗体和固相抗体和Eu3+标记抗体与待抗体与待检抗原抗原结合，形成固相抗体合，形成固相抗体-待待检抗原抗原-Eu3+标记抗体复合物，酸性抗体复合物，酸性增增强液下，液下，Eu3+解离，解离，340nm激激发光下光下发射射613nm荧光。光。时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第45页，此课件共64页哦方法方法类型型固相抗体固相抗体竞争法争法待待检抗原和抗原和Eu3+标记抗原与固相抗体抗原与固相抗体竞争争结合合,温
23、育洗温育洗涤后在固相中加入后在固相中加入荧光增光增强液液,测定定荧光光强度，度，荧光光强度与待度与待检抗原含量成反比。抗原含量成反比。时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第46页，此课件共64页哦方法方法类型型固相抗原固相抗原竞争法争法待待检抗原和固相抗原抗原和固相抗原竞争争结合定量的合定量的Eu3+标记抗体，温育抗体，温育洗洗涤后在固相中加入后在固相中加入荧光增光增强液液,测定定荧光光强度，度，荧光光强度与待度与待检抗原含量成反比。抗原含量成反比。时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第47页，此课件共64页哦灵敏度高灵敏度高：最小最小检出量出量10-18mol/L分析范分析范围宽：45个数量个数量级
24、标记物物稳定：有效使用期定：有效使用期长测量快速，易自量快速，易自动化化易受易受污染，本底增高染，本底增高方法方法评价价时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定定第48页，此课件共64页哦光光线通通过偏振偏振滤光片后，光片后，形成一个方向的平面光称形成一个方向的平面光称为偏振光偏振光。偏振偏振荧光光(绿光光,525nm550nm)偏振光偏振光(蓝光光,485nm)荧光物光物质基本原理基本原理二、二、荧光偏振免疫光偏振免疫测定定第49页，此课件共64页哦 抗原抗体抗原抗体竞争反争反应AgF分子小，分子小，转动速度快，偏振速度快，偏振荧光弱光弱 AgF-Ab分子大，分子大，转动速度慢，偏振速度慢，偏振荧光光
25、强 若待若待检抗原多，抗原多，则AgF-Ab少，少，AgF多，偏振多，偏振荧光弱光弱待待检抗原含量与偏振抗原含量与偏振荧光光强度成反比度成反比荧光偏振免疫光偏振免疫测定原理示意定原理示意图 基基本本原原理理荧光偏振免疫光偏振免疫测定定第50页，此课件共64页哦方法方法评价价 样品用量少品用量少荧光素光素标记试剂稳定，使用寿命定，使用寿命长重复性好重复性好快速，易自快速，易自动化化适于小、中等分子物适于小、中等分子物质检测灵敏度灵敏度较非均相非均相荧光免疫光免疫测定法低定法低荧光偏振免疫光偏振免疫测定定第51页，此课件共64页哦基本原理基本原理荧光光酶免疫免疫测定定荧光物光物质产生示意生示意图
26、碱性磷酸碱性磷酸酶标记抗体或抗原，抗体或抗原，固相固相载体包被抗原或抗体，体包被抗原或抗体，酶分解分解4-MUP，脱磷酸根基，脱磷酸根基团形成形成4-MU，360nm激激发光照光照射，射，发出出450nm荧光。光。三、三、荧光光酶免疫免疫测定定第52页，此课件共64页哦酶和和荧光底物光底物荧光光酶免疫免疫测定定标记用用酶及及荧光底物光底物 标记酶底物底物荧光光产物物激激发光光(nm)(nm)荧光光(nm)(nm)相相应信号信号碱性磷酸碱性磷酸酶4-MUP4-MUP4-MU4-MU3603604504501010-半乳糖苷半乳糖苷酶4-MUG4-MUG4-MU4-MU36036045045010
27、10辣根辣根过氧化物氧化物酶HPAHPA二聚体二聚体3173174144140.030.03荧光光酶免疫免疫测定定第53页，此课件共64页哦方法方法类型型 双抗体双抗体夹心法心法双抗原双抗原夹心法心法固相抗原固相抗原竞争法争法荧光光酶免疫免疫测定定第54页，此课件共64页哦方法方法类型型双抗体双抗体夹心法心法固相抗体和固相抗体和酶标记抗体与抗体与待待检原反原反应，形成固相抗，形成固相抗体体-抗原抗原-酶标抗体复合物，抗体复合物，加入底物加入底物进行行酶促促发光反光反应，发光量与待光量与待检抗原含抗原含量成正比。量成正比。荧光光酶免疫免疫测定（双抗体定（双抗体夹心法）示意心法）示意图 荧光光酶免
28、疫免疫测定定第55页，此课件共64页哦方法方法类型型双抗原双抗原夹心法心法固相抗原和固相抗原和酶标抗原与待抗原与待检抗体反抗体反应，形成固相，形成固相抗原抗原-待待检抗体抗体-酶标抗原复合物，加入底物抗原复合物，加入底物进行行酶促促发光，光，发光量与待光量与待检抗体含量成正比。抗体含量成正比。荧光光酶免疫免疫测定定第56页，此课件共64页哦方法方法类型型固相抗原固相抗原竞争法争法待待检抗原和固相抗原抗原和固相抗原竞争争结合定量的合定量的酶标抗体，洗抗体，洗涤除去除去未未结合部分，固相抗原与合部分，固相抗原与酶标抗体形成的复合物被留下来，加抗体形成的复合物被留下来，加入底物入底物进行行酶促促发光
29、反光反应，荧光光强度与待度与待检抗原含量成反比。抗原含量成反比。荧光光酶免疫免疫测定定第57页，此课件共64页哦方法方法评价价 用用酶和和荧光底物的化学反光底物的化学反应作作为放大系放大系统，提高灵敏度提高灵敏度背景背景荧光干光干扰测定，用固相定，用固相荧光光酶免疫免疫测定效果好定效果好荧光光酶免疫免疫测定定第58页，此课件共64页哦第第四四节 荧光免疫技光免疫技术在医学在医学检验中的中的应用用第59页，此课件共64页哦自身抗体自身抗体检测抗核抗体抗核抗体(均均质型型)抗核抗体抗核抗体(核膜型核膜型)抗核抗体抗核抗体(斑点型斑点型)一、一、荧光抗体技光抗体技术的的应用用第60页，此课件共64页
30、哦病原体病原体检测寄生虫（猴胚寄生虫（猴胚肾细胞内弓形虫）胞内弓形虫）细菌（藤黄微球菌菌（藤黄微球菌)荧光抗体技光抗体技术的的应用用第61页，此课件共64页哦免疫病理免疫病理检测肿瘤（人肝癌瘤（人肝癌细胞）胞）荧光抗体技光抗体技术的的应用用第62页，此课件共64页哦细胞表面抗原和受体胞表面抗原和受体检测将游离将游离细胞作胞作荧光抗体特异染色后，在特殊光抗体特异染色后，在特殊设计的的仪器中通器中通过喷嘴逐个流出，嘴逐个流出，经单色激光照色激光照射射发出的出的荧光信号由光信号由荧光光检测计检测，并自，并自动处理各种数据。理各种数据。特殊特殊应用：流式用：流式细胞分析胞分析荧光免疫技光免疫技术可用于
31、淋巴可用于淋巴细胞表面胞表面CD抗原、抗原抗原、抗原受体、受体、补体受体、体受体、Fc受体等的受体等的检测以及淋巴以及淋巴细胞胞及其及其亚群的群的鉴定和定和计数。数。荧光抗体技光抗体技术的的应用用第63页，此课件共64页哦时间分辨分辨荧光免疫光免疫测定：定：蛋白蛋白质、激素、激素、药物、物、肿瘤瘤标记物、病原体抗原物、病原体抗原/抗体等抗体等荧光偏振免疫光偏振免疫测定：定：药物、物、维生素、激素、常生素、激素、常规生化生化项目等目等荧光光酶免疫免疫测定：定：病毒抗体、病毒抗体、细菌和毒素抗原、激素、菌和毒素抗原、激素、肿瘤瘤标志物等志物等二、二、荧光免疫光免疫测定的定的应用用第64页，此课件共64页哦