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1、药理学实验实验教学讲义制药与生命科学学院编者：张琪2003年6月目录实验一 常用实验动物的捉持和给药方法实验二 药物作用的一般规律实验三 有机磷药物的中毒及其解救实验四 抗癫痫药和抗惊厥药实验五 氯丙嗪的安定作用（演示实验）实验一 常用实验动物的捉持和给药方法一、常用实验动物的捉持【目的】用正确的方法捉拿动物,以保证实验的正常进行和免于咬伤。【材料】蟾蜍、小白鼠大白鼠、家兔【方法】1. 蟾蜍(或青蛙)捉持法左手握持，食指和中指夹蟾蜍的左前肢，拇指压住右前肢,将两下肢拉直,用无名指和小指压住(见图1).2. 小鼠捉持法用右手拎着鼠尾,放于一粗糙面上,此时小鼠即向前跑,而右手拉住,小鼠则固定不动,
2、然后以左手拇指、食指及中指捏住其头部皮肤,小指、无名指和掌心夹住其背部皮肤及尾部(见图2)。 图1 蛙的胸淋巴囊注射法 图2 小白鼠捉持法3大鼠捉持法用右手拎着鼠尾,放于一粗糙面上,左手以厚布盖着鼠背或戴手套。用五指紧握住鼠颈背部皮肤,使其背位固定在掌心上,(熟练者,无需用布或手套,但须注意尽量勿激怒物,防止挣扎咬人)。4. 家兔的捉拿方法右手握住兔颈背部皮肤轻轻提起,再以左手托住其臂部,使兔呈坐位姿势.5. 小鼠性别辨认雌性：肛门与生殖器距离近，有阴道，符号以“”表示。雄性：肛门与生殖器距离远，有时可见睾丸露出。符号以“”表示。鼠和家兔性别辨认基本同小鼠。【注意事项】1. 捉持小鼠时须将鼠置
3、于粗糙面上。2. 捉持大鼠时须紧捏住颈背部皮肤,以防挣脱。3. 捉持家兔时,一手须托住臀部,切忌一手拎着两耳让其自由挣扎,而致脊髓损伤，造成瘫痪死亡。二、几种常用给药方法【目的】掌握几种常用实验动物的给药方法。【材料】动物同一。兔箱,注射器（1ml,2ml,5ml），灌胃针头，针头（4号、5号、6号）兔开口器,导尿管,生理盐水【方法】1.蟾蜍（或青蛙）淋巴囊注射蟾蜍（或青蛙）有数个淋巴囊（由膈膜隔成）（见图3）,常用者为胸淋巴囊和腹囊。由于蟾蜍（或青蛙）皮肤缺乏弹性,故在注射药液时为了避免在拔针后药液由针孔溢出,则进针时须通过淋巴膈(即由一淋巴囊注入到另一淋巴囊内),注入药液量一般为0.250
4、.5m1.（1）胸淋巴囊注射,捉持见前,选用5号、6号针头,自口腔刺入经下颌皮下,穿过咽淋巴膈注入胸淋巴囊内。（见图1）。（2）腹淋巴囊注射。针头自大腿部皮肤刺入,穿过股淋巴膈注入腹淋巴囊内。2.小白鼠灌胃给药用左手捉持小鼠(方法见前)将颈部拉直,右手持按有灌胃针头的注射器斗自口腔沿上腭轻轻插入（将注射器先竖后低下,随其吞咽动作通过咽喉下插22.5cm达胃部）,然后注入药图3 蛙的皮下淋巴囊图液,常用注入量为0.5ml,最大不超过lm1（见图4）。图4 小白鼠的灌胃法3. 小白鼠皮下给药用左手捉持小鼠，右手持注射器（选用5、6号针头）约以10角刺入前肢腋部或颈背部皮下,常用注入量为0.20.4
5、ml。注后,皮下可见一隆起小包,然后针头稍向后退出一段再转动针尖拨出,以防漏药。4. 小白鼠腹腔给药左手捉持小鼠,右手持注射器(选用5号、6号针头)以10角从下腹部剌入皮下,然后再以45角剌入腹腔,注入药液。穿刺部位不宜太高,否则药液注胸腔,常用注入量为0.5ml,不宜超过1m1(见图5)。5. 大白鼠给药基本上与小鼠相同,唯所用的给药工具稍大,给药量稍多而已。6. 兔耳静脉给药图5 小白鼠的腹腔注射法将兔固定于兔箱内，先拔去耳背外侧静脉注射处毛（便于辨认静脉）,然后用左手拇指和中指捏住耳尖部,食指垫在兔耳注射处的下面。右手持注射器(选用6号针头),先从耳尖端开始注射,约以5角刺入,刺入后用左
6、手拇指、食指及中指捏住针头接头处及兔耳加以固定,以防兔突然挣扎,针尖脱出血管,注射时注意不能有气泡注入,常用注入量为l0ml以下（等渗溶液可达 10ml以上）,针头拨出时须用棉球压住注射部位以防出血。(见图6，图7)图6 兔耳血管 图7 兔耳的静脉注射法黑实线表示静脉，中空线表示动脉7兔灌胃给药将兔固定于兔箱内,用木制开口器横插于口腔内并向内上方转动直至兔舌被压出为止,然后将导尿管从开口器中的小孔插入沿上腭后壁轻轻的送入食道,约1520cm左右，以达胃部,注意不能插入气管,可将导尿管的外端浸入水内,观察有无气泡放出,无气泡方能注入药液,药液推完后再注入45ml水或少许空气,目的将导尿管内药液全
7、部推至胃中,而后紧捏导管迅速拔出,否则在拔的过程中,水可由导尿管中滴至气管内。图8 家兔的灌胃法【注意事项】1蟾蜍淋巴囊注射须通过淋巴膈。2小白鼠灌胃给药须将颈部拉直；灌胃时将注射器先竖后低下；最好空腹。3小白鼠皮下给药针头拨出时,针头须转动几下,以防漏药4小白鼠腹腔给药穿刺部位不能太高，以防刺入胸腔5大自鼠给药须稳捉大鼠,其余同小鼠。6兔耳静脉给药拔毛；刺入静脉后须用手指固定针头及兔耳；不能注入空气针头拨出时须用棉球止血；注射液须澄明，适宜pH等。7兔灌胃给药须将兔舌压出；导尿管插入后须检查是否确在胃中；药液注完 后须补注45ml水或少许空气将管中药液冲至胃内；拔管时须将管嘴捏紧，以防管中液
8、体漏入气管内。实验二 药物作用的一般规律实验2.1 不同剂型对药物作用的影响【实验目的和原理】 比较乌拉坦不同剂型对小白鼠作用的差别，认识胶浆剂延缓药物扩散的作用。【实验器材与药品】 1ml注射器2副，铁丝笼1个，天平称1台，8乌拉坦水溶液，8乌拉坦胶浆液（含2.5羧甲基纤维素）。【实验对象】 小白鼠【实验步骤和方法】 取体重接近，性别相同的小白鼠2只，编号并称重。1号鼠皮下注射8乌拉坦水溶液0.15ml/10g，2号鼠皮下注射8乌拉坦胶浆液0.15ml/10g,观察小鼠对此注射药物的反应。记录小鼠出现步态蹒跚，匍匐不动或卧倒，翻正反射消失等反应的时间。比较小鼠注射乌拉坦不同制剂后造成中枢抑制
9、的深度，作用出现的快慢与持续时间的长短。【实验结果】鼠号药物给药途径剂量（mg/kg）剂型现象1号2号 实验2.2 乌拉坦不同给药途径对药物作用的影响【实验目的和原理】 观察不同给药途径对药物作用的影响【实验器材和药品】 1ml注射器4副，灌胃针头1个，6号针头4个，铁丝笼1个，8乌拉坦水溶液【实验对象】 小白鼠【实验步骤和方法】 取体重接近的小白鼠3只，编号并称重。观察小鼠正常活动情况及翻正反射，然后用8乌拉坦水溶液，分别从不同途径（灌胃，皮下注射和 腹腔注射）给药0.1ml/10g,观察小鼠反应，记录小鼠腹腔注射8乌拉坦的时间，翻正反射消失及恢复时间，计算睡眠潜伏期和睡眠持续时间。【实验结
10、果】鼠 号给药途径剂量（mg/kg）睡眠潜伏期（min）睡眠时间1号2号3号实验三 有机磷药物的中毒及其解救 【目的】观察有机磷药物中毒的症状。根据阿托品和解磷定对有机磷中毒的解救效果初步分析两药的解毒原理。【材料】家兔 4 只兔固定箱 注射器 测瞳尺 剪刀 酒精棉球 干棉球5%敌百虫溶液 0.1%阿托品注射针剂 2.5%解磷定注射针剂【方法】1. 取家兔4只，称其体重，固定于兔箱内，观察并记录下列指标： 呼吸频率、幅度、瞳孔大小、唾液分泌、尿粪排泄及有无肌震颤。2. 用酒精棉球涂擦兔耳，使血管扩张。按 80mg/1.6ml/kg 耳缘静脉注射给敌百虫。观察上述各项指标变化情况。待中毒症状明显
11、时，记录之。如给敌百虫2025分钟后，无中毒症状出现，可再追加 1/3 初剂量。3. 立即给其中2只家兔耳缘静脉注射0.l%阿托品4.0mg/4ml/kg，另2只静脉注射2.5%解磷定50mg/2.0ml/kg 急救。观察中毒症状是否减轻，待中毒症状明显减轻记录以上各指标。若给药后中毒症状未见明显减轻，可再按初剂量 1/3 追加。【注意事项】1. 给药前，擦干唾液及粪便，剪去兔眼睫毛。实验中不要移动兔箱。2. 给完敌百虫后应立即洗手，以防中毒。【报告要点】呼 吸瞳孔直径唾液分泌尿粪排泄肌震颤给药前给敌百虫后给阿托品后给药前给敌百虫后给解磷定后实验四 抗癫痫药和抗惊厥药一、药物的抗电惊厥作用【目
12、的】观察苯妥英钠和苯巴比妥对电惊厥的保护作用。【材料】小鼠3-4只钟罩 天平 注射器 药理生理多用仪0.5% 苯妥英钠溶液0.5% 苯巴比妥钠溶液生理盐水【方法】1. 调机：将药理生理多用仪的剌激方式旋钮置于“单次”位置，“A”频率置于“8Hz”, 后面板上的开关拨向“电惊厥”一边,电压调至最大。2. 将输出线前端的两鳄鱼夹用生理盐水浸湿,分别夹在小鼠两耳上。接通电源,按“启动”按钮,即可使小鼠产生前肢屈曲,后股伸直的强直惊厥（如未产生强直惊厥,可将“频率”旋钮拨到“4Hz”试之,否则另换小鼠。)3. 选择 3 只典型强直惊厥小鼠,称重标记。分别腹腔注射0.5%苯妥英钠0.75mg/0.15m
13、1/10g,0.5%苯巴比妥 0.75mg/0.15ml/10g及生理盐水0.15ml/10g.4. 给药后4Omin,再以各鼠的原惊厥阈值给予剌激,观察并记录各鼠是否出现挣扎反应或强直惊厥。【报告要点】收集全实验室数据进行统计处理。表 1巴比妥类药物的抗电惊厥作用 反应程度 组别药 物1 2 3 4 5 6 7 8 均 数SD生理盐水给药前给药后苯妥英钠给药前给药后苯巴比妥给药前给药后二、药物的抗中枢兴奋药惊厥作用【目的】观察丙戊酸钠对回苏灵惊厥的保护作用。【材料】小鼠 2 只钟罩、天平、注射器0.04% 回苏灵溶液2% 丙戊酸钠洛液生理盐水【方法】1. 取小鼠 2 只,编号,称记体重。2.
14、 分别腹腔注射丙戊酸钠 6mg/0.3ml/10g 和生理盐水 0.3m1/10g。3. 30 分钟后,再皮下注射 0.08mg/0.2ml/10g回苏灵。观察各鼠反应的快慢和强度(痉挛、跌倒、强直或死亡)。【报告要点】收集全实验室数据进行统计学处理。表二 丙戊酸钠的抗惊反厥作用 反应强度组 别药 物1 2 3 4 5 6 7 8 均 数SD生理盐水丙戊酸钠实验五 氯丙嗪的安定作用（演示实验）【目的】观察氯丙嗪对小白鼠激怒反应的影响。【材料】四只小鼠 异笼喂养 药理生理多用仪附激怒刺激盒 注射器 针头 天平 0.1%盐酸氯丙嗪溶液 【方法】1. 调节刺激器刺激参数为：工作状态激怒输出电压最小刺
15、激方式连续B时间1秒频率8Hz把交流电压输出线插入后面板的“交流电压输出”插座中，另一端的鳄鱼夹分别夹在附件盒的红、黑接线柱上。2. 选择激怒的小鼠： 放二只雄性异笼小鼠于附件盒中，接通电源，调节交流电压输出强度，逐渐由小增大，直至小白鼠出现激怒反应为止（激怒反应指标：二鼠竖立，对峙，互相撕咬）。如小鼠不互相撕咬，则弃去。选二对由明显激怒反应的小鼠，记录阈电压（见图1）。3. 一对腹腔注射氯丙嗪0.15mg/0.15ml/10g，另一对腹腔注射生理盐水0.15ml/10g。4. 给药后20min，分别再以给药前的阈值电压进行刺激，观察二对小白鼠给药前后的反应的差异。表 1 氯丙嗪对小鼠激怒反应的影响组 别激怒阈值电压潜 伏 期氯丙嗪组给药前给药后对 照 组给药前给药后表2 组 别 潜伏期 药物1 2 3 4 5 6 7 8 均 值SDCPZ 给药前 给药后NS给药前 给药后