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1、生物选修六个课题知识点背诵选修 1 1 基础学问点背诵 (3 3 、4 4 、5 5 ) 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果一、基础学问 1 加酶洗衣粉是指含有 酶制剂 的洗衣粉,目前常用的酶制剂有四类:蛋白酶 、 脂肪酶 酶 、 淀粉酶 和 纤维素酶 。其中,应用最广泛、效果最明显的是 碱性蛋白酶 和 酸性脂肪酶 。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的 氨基酸 或小分子的 肽 ,使污迹从衣物上脱落。2 运用加酶洗衣粉时,影响酶活性的因素有 温度 、 pH 、 表面活性剂 等,为此科学家通过 基因工程 生产出了特别的酶,并制成酶制剂,解决了这个问题。3 在本课题中,我们主要探究有关
2、加酶洗衣粉的三个问题:一是普 通洗衣粉 和加酶洗衣粉对衣物污渍的 洗涤 效果有什么不同;二是在什么温度下运用加酶洗衣粉 效果 最好,三是 添加不同种类的酶 的洗衣粉,其洗剂效果有哪些区分。二、试验操作1 探究一般洗衣粉和加酶洗衣粉对衣物污渍的洗涤效果 ( (1 )试验遵循的原则:食盐 变量为洗涤剂,设计时应遵循 单一变量 原则、 相互比照 原 原则,有效地限制其他变量,如水的用 量、污染物的量、所用试验用布的质地大小、两种洗衣粉的用量,搅拌及洗涤时间。( (2 )试验过程 取两只大烧杯并 洗净量 ,用量筒分别量 500mL 蒸馏水放入其中,放入 40 0 C 。的水浴锅保温。将制好的污染布和洗
3、衣粉(一组为 干净纱布 和 一般洗衣粉 ,另一组为 相同大小的污布 布 和 等量加酶的洗衣粉 )分别放入两只烧杯中。用玻璃棒同时充分搅拌 相同 时间,一段时间后搅拌可重复进行。过相同的时间后视察洗涤效果,探究加酶洗衣粉运用时的最适温度。2 不同种类的酶洗衣粉对同一污渍的洗涤效果 ( (1 )试验原理:不同种类的 加酶洗衣粉所加的酶不同,而酶具有 专一性 ,所以对不同污渍的洗涤效果不同。( (2 )试验过程:依据表格设计试验步骤 编号 污渍 类型 洗涤效果 蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶 复合酶 一般洗衣酶 1 鸡血 √ √ 2 牛奶 √√ 3 菜油&ra
4、dic; √ 4 番茄汁 √√ 5 墨水 √6 染料 √1 1 一般洗衣粉中包含哪些化学成分?提示:一般洗衣粉中通常包含有:表面活性剂、水软化剂、碱剂、漂白剂等成分,有的洗衣粉中还含有增白剂、香精和色素,以及 填充剂等。2 2 在本课题中你准备运用什么方法和标准推断洗涤效果?提示:可在洗涤后比较污物的残留状况,如:已消逝、颜色变浅、面积缩小等,3 3 含有蛋白酶的洗衣粉的洗剂效果好,可以用丝绸作为试验材料吗?不能。因为丝绸的主要成分是蛋白质,它会被加酶洗衣粉中的蛋白酶分解,损坏衣物。】下列不属于酶制剂的是 A 蛋白酶B 脂肪酶C 淀粉
5、酶 D 麦芽糖酶 解析:目前常用的酶制剂有四大类:蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶。其中,应用最广泛、效果最明显的是碱性蛋白酶和碱性脂肪酶。碱性蛋白酶能将血渍、奶渍等含有的大分子蛋白质水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽,使污迹从衣物上脱落。脂肪酶、淀粉酶和纤维素酶也能分别将大分子的脂肪、淀粉和纤维素水解为小分子物质,使洗衣粉具有更强的去污实力。 酵母细胞的固定化 一、基础学问酶:优点:催化效率高,低耗能、低污染,大规模地应用于食品、化工等各个领域。实际问题:对环境条件敏感,易失活;溶液中的酶很难回收,不能再次利用,提高了生产成本;反应后的酶会混合在产物中,如不除去,会影响产品质量。设想:将酶固定
6、在不溶于水的载体上 固定化酶:优点酶既能与反应物接触、又能与产物分别 实际问题:一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,许多产物的形成 都 都是通过一系列的酶促反应才能得到的 设想:将合成这一系列酶的细胞固定固定化细胞:优点成本低、操作简单 二、固定化酶的应用实例高果糖浆是指 果糖含量 42% 左右的糖浆 能将葡萄糖转化为果糖的酶是 葡萄糖异构酶。运用固定化酶技术,将这种酶固定在一 种载体 上, 再将这些酶颗粒装到一个 反应柱 内,柱子底端装上分布着很多小孔的 筛板。酶颗粒 无 无法通过筛板的小孔 ,而 反应溶液却可以自由出入 。生产过程中,将葡萄糖溶液从反应柱的上端注入,使葡萄糖溶液流过
7、反应柱,与 酶 接触,转化成果糖,从反应柱的下端流出。反应柱能连续运用半年,大大降低了生产成本,提高了果糖的产量和质量。三、固定化细胞技术固定化酶和固定化细胞是利用 物理或 或 化学方法将酶或细胞固定在肯定空间内的技术,包括 包埋法、 、 化学结合法 和 物理吸附法。一般来说,酶更适合采纳 化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳 包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的 细胞难以被 吸附或 或 结合 ,而个小的酶简单从 从 包埋材料 中漏出。胞 包埋法法固定化细胞即将微生物细胞 匀称地 包埋在不溶于水的 多孔性载体中。常用的载体有 明胶 、 琼脂糖、海藻酸钠 、 、醋酸纤维素和 和
8、 聚丙硒酰胺 等。四、试验操作( ( 一) ) 制备固定化酵母细胞制备固定化酵母细胞须要的材料是 g 0.1g 干酵母 、 蒸馏水 、 、烧杯、 CaCL2、海藻酸钠、 、注射器 、 酒精灯 、 玻 玻 璃棒 棒 、 铁架台 和 石棉网 1. 酵母菌的活化活化就是处于 休眠 状态 的微生物重新复原正常的生活状态。2. 配制物质的量尝试为 0.05mol/L 的 的 CaCl 2 溶液 3. 配制海藻酸钠溶液 加热溶化海藻酸钠时要留意:加热时用小火或则间断加热、反复几次、并且边加热边搅拌4. 海藻酸钠溶液与酵母菌细胞混合 5. 固定化酵母细胞 以恒定的速度缓慢地将注射器中的溶液滴加到配制好的 C
9、aCL2 溶液中,并浸泡 0 30 分钟( 时间) 。( ( 二) ) 用固定化酵母细胞发酵1. 将固定好的酵母细胞用 蒸馏水洗 冲洗 2-3 次。2. 发酵时的温度就为 5 25 度,时间2 24 4 小时 。五、结果分析与评价(一)视察 凝胶珠的颜色和形态假如制作的凝胶珠颜色过浅、呈白色,说明海藻酸钠浓度偏低、固定的酵母细胞数目较少;假如形成的凝胶珠不是圆形或椭圆形,则说 明海藻酸钠浓度偏高 ,制作失败,须要再作尝试。(二)视察发酵的葡萄糖溶液利用固定的酵母细胞发酵产生酒精,可以看到产生了许多 气泡,同时会闻到 酒味补充:干脆运用酶、固定化酶和固定化细胞催化的优缺点 :类型优点不足干脆运用
10、酶。催化效率高,低耗能、低污染等。对环境条件特别敏感,简单失活;溶液中的酶很难回收,不能被再次利用,提高了生产成本;反应后 酶会混在产物中,可能影响产品质量。固定化酶酶既能与反应物接触,又能与产物分别,同时,固定在载体上的酶还可以被反复利用。一种酶只能催化一种化学反应,而在生产实践中,许多产物的形成都通过一系列的酶促反应才能得到的。固定化细胞成本低,操作更简单。固定后的酶或细胞与反应物不简单接近,可能导致反应效果下降等。1 1 细胞的活化。提示:在缺水的状态下,微生物会处于休眠状态。活化就是让处于休眠状态的微生物重新复原正常的生活状态。酵母细胞所须要的活化时间较短,一般须要0.5 1 1 小时
11、。2 2 如何检验凝胶珠的质量是否合格。提示:检验凝胶珠的质量是否合格,可以采纳以下方法。一是用镊子夹起一个凝胶珠放在试验桌上用手挤压,假如凝胶珠不裂开,没有液体流出,就表明凝胶珠的制作胜利。二是在试验桌上用力摔打凝胶珠,假如凝胶珠很简单弹起,也表明制备的凝胶珠是胜利的。3 3 酶和细胞分别适应哪种固定方法?提示:一般来说,酶更适合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而 个小的酶简单从包埋材料中漏出。】酶和细胞分别适应哪 种固定方法? 提示:一般来说,酶更适合采纳化学结合和物理吸附法固定,而细胞多采纳包埋法固定化。这是
12、因为细胞个大,而酶分子很小;个大的难以被吸附或结合,而个小的酶简单从包埋材料中漏出。 DNA 的粗提取与鉴定一、提取 A DNA 的方法提取生物大分子的基本思路是选用肯定的物理或化学方法分别具有不同物理或化学方法分别具有不同物理或化学性质的生物大分子于 。对于 DNA 的粗提取而言,就是要利用 DNA或 或 RNA 、 蛋白质和脂质取 等在物理和化学性质方面的差异,提取 DNA, , 去除其他成分。1 )DNA 的溶解性DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的 NACL 中溶解度使 不同,利用这一特点,选择适当的盐浓度就能使 DNA充分溶解,而使杂质沉淀,或者相反,以达到分别目的。此外,DNA
13、不溶于酒精溶液,但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理,将 可以将 DNA 与蛋白质进一步的分别。2 )DNA 对酶、高温柔洗涤剂的耐受性 蛋白酶能水解蛋白质,但是对DNA没有受 影响。大多数蛋白质不能忍受 60 80 o C 的高温,而 DNA 在 在0 80 度以上才会变性。洗涤剂能够瓦解细胞膜对 ,但对 DNA 没有影响。3 )DNA 的鉴定在 酒精条件下,DNA 遇 遇二苯胺会被染成蓝色,因此二苯胺定 可以作为鉴定 DNA 的试剂。二、试验设计1 )试验材料的选取 凡是含有DNA的生物材料都可以考虑,但是运用 的生物组织,胜利的可能性更大。在下面的生物材料中选取适合的试验材料:
14、鱼卵、猪肝、菜花(花椰菜)、香蕉、鸡血、哺乳动物的红细胞、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、在液体培育基的大肠杆菌 2 )破裂细胞,获得含 DNA 的滤液动物细胞的破裂比较容 易 , 以鸡血细胞为例,在鸡血细胞液中加入肯定量的蒸馏水 ,同时用 玻璃棒 搅拌,过滤后收集滤液即可。假如试验材料是植物细胞,须要先用 洗涤剂 溶解细胞膜。例如,提取洋葱的 DNA 时,在切碎的洋葱中加入肯定的 洗涤剂 和 食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液。3 )去除滤液中的杂质 4 )DNA 的析出与鉴定 将处理后的溶液过滤 , 加入与滤液体积 相等、冷却的 酒精溶液 ,静置 2 2- -3 3 分钟 , ,溶液中
15、会出现 白色丝状物 ,这就是粗提取的 DNA 。用玻璃棒 向一个方向 搅拌,卷起丝状物,并用滤纸吸取 上面的水分。支 取两支 20ml 的试管,各加入物质的量浓度为2MOL/L的 的 NaCl 溶液 5ml ,将丝状物放入 入其中一支试管中,用玻璃棒搅拌,使丝状物溶解。然后,向两支试管中各加入 4ml 的 的二苯胺试剂 。混合匀称后,将试管置于 沸水 热 中加热 5min ,待试管冷却后,比较两支试管有 溶液颜色的改变,看看溶解有 DNA 的溶液是否变 蓝 蓝。三、操作提示每 以血液为试验材料时,每 100ml 血液中须要加入 3g 柠檬酸钠,防止 血液凝固。加入洗涤剂后,动作要 轻缓、 、
16、柔软,否则简单产生大量的泡沫,不利于后续步骤地操作。加 入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要 轻缓,以免 剧 加剧 A DNA 分子的断裂,导致DNA 分子不能形成絮状沉淀。二苯胺试剂要 现配现用 ,否则会影响鉴定的效果。四、结果分析与评价1 1 为什么加入蒸馏水能使鸡血细胞裂开?答:蒸馏水对于鸡血细胞来说是一种低渗液体,水分可以大量进入血细胞内,使血细胞胀裂,再加上搅拌的机械作用,就加速了鸡血细胞的裂开( ( 细胞膜和核膜的裂开) ) ,从而释放出 出 DNA 。2 2 加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么?答:洗涤剂是一些离子去污剂,能溶解细胞膜,有利于 A DNA 的释放;食盐的主要成 分是 Na
17、Cl ,有利于 A DNA 的溶解。3 3 假如研磨不充分,会对试验结果产生怎样的影响?答:研磨不充分会使细胞核内的 A DNA 释放不完全,提取的 A DNA 量变少,影响试验结果,导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等。4 4 此步骤获得的滤液中可能含有哪些细胞成分?答:可能含有核蛋白、多糖和 A RNA 等杂质。5 5 为什么反复地溶解与析出 DNA ,能够去除杂质?答:用高盐浓度的溶液溶解 DNA ,能除去在高盐中不能溶解的杂质;用低盐浓度使 A DNA 析出,能除去溶解在低盐溶液中的杂质。因此,通过反复溶解与析出 DNA ,就能够除去与 与 A DNA 溶解度不同的多种杂质。
18、6 6 方案二与方案三的原理有什么不同?答:方案二是利用蛋白酶分解杂质蛋白,从而使提取的 A DNA 与蛋白质分开;方案三利用的是 是 A DNA 和蛋白质对高温耐受性的不同,从而使蛋白质变性,与 A DNA 分别。7. A DNA 的溶解度与 l NaCl 溶液浓度的关系:当 当 l NaCl 溶液浓度低于 L 0.14mol/L 时,随浓度的上升,A DNA 的溶解度降低;当 l NaCl 溶液浓度高于 L 0.14mol/L 时,随浓度上升,A DNA 的溶解度上升。8. 制备鸡血细胞液时,要在簇新的鸡血中加入柠檬酸钠的缘由制备鸡血细胞液时,要在簇新的鸡血中加入抗 凝剂 柠檬酸钠,防止血
19、液凝固。其原理是柠檬酸钠能与血浆中 Ca2+ 发生反应,生成柠檬酸钙络合物,血浆中游离的 Ca2+ 大大削减,血液便不会凝固,因为鸡血红细胞,白细胞都有细胞核,A DNA 主要存在于细胞核中,所以在离心或静置沉淀后,要弃出上层清液 血浆。9 9 提取 A DNA 的第一步是材料的选取,其目的是肯定要选取 A DNA 含量较高的生物材料,否则是 会由于试验过程中或多或少的损失而造成检测的困难;其次步是 A DNA 的释放和溶解,这一步是试验胜利与否的关键,要尽可能使细胞内的 A DNA 全部溶解;第三步是 A DNA 的纯化,即依据 A DNA 的溶 解特性、对酶及高温的耐受性的不同等特性,最大
20、限度地将 A DNA 与杂质分开;最终一步是对 A DNA 进行鉴定,这是对整个试验的结果的检测。10 在 A DNA 的析出的步骤中用到玻璃棒搅拌时,留意动作要轻缓,以免加剧 A DNA 分子的断裂,导致 A DNA 分子不能形成絮状沉淀。11 盛放鸡血细胞液的容器,最好是塑料容器。鸡血细胞破裂以后释放出的 DNA ,简单被玻内 璃容器吸附,由于细胞内 A DNA 的含量原来就比较少,再被玻璃容器吸附去一部分,提取到的 的 A DNA 就会更少。因此,试验过程中最好运用塑料的烧杯和试管,这样可以削减提取过程的 的 A DNA 的损失。 典例解析 本试验中有三次过滤:过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细
21、胞液 的 过滤含粘稠物的 0.14mol/LNaCl 溶液 有 过滤溶解有 DNA 的 的 2mol/LNaCl 溶液 以上三次过滤分别为了获得( A )A 含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液 B 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、含 DNA 的滤液 C 含核物质的滤液、滤液中 DNA 粘稠物、纱布上的 DNAD 含较纯的 DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含 DNA 的滤液 解析: 用蒸馏水稀释鸡血细胞液,使血细胞的细胞膜、核膜裂开,释放出核物质,此时过滤含 只能得到含 DNA 和其 他物质如蛋白质的滤液,这种滤液必需经过试验中其他步骤得相继处的 理,方能得到较纯的 DNA
22、 。DNA 在 在 0.13mol/LNaCl 溶液中溶解度最低,成丝状粘稠物,可经过滤留在纱布上。 血红蛋白的提取和分别 基础学问1 凝胶色谱法 凝胶色谱法也称做 安排色谱法,是依据 相对分子量的大小分别蛋白质的有效方法。凝胶事实上是一些由 微小的多孔球体构成的多孔球体,在小球体内部有很多贯穿的通道,相对分子质量不同的蛋白质分子通过凝胶时速度不同,相对分子质量较小的蛋白质简单 进入凝胶内部 的通道,路程 较长 ,移动速度 较慢;而 相对分子质量 较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在 凝胶的外部移动,路程较短 ,移动速度较快。相对分子质量不同的蛋白质分子因此得以分别。2 缓冲溶液 缓冲溶
23、液的作用是 在肯定范围内,缓冲溶液能够抵制外界的酸和碱对溶液 H PH 的影响,维持 H PH 不变 。缓冲溶液通常由 1 1- -2 2 种缓冲剂 溶解于水中配制而成的。生物体内进行的各的 种生物化学反应都是在肯定的 pH 下进行的,例如:血浆的 pH 是 7.45 ,要在试验条件下的 精确模拟生物体内的过程,必需保持体外的 pH 与体内的基本一样。3 电泳 电泳是指 带 带 电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。很多重要的生物大分子,如多的 肽、核酸等都具有可解离的基团,在肯定的 pH 下,这些基团会带上 正电或负电 。在电场荷 的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷 相反 的电极移动。电
24、泳利用了待分别样品中各分子 带电性质的差异 以及分子本身的 大小、形态的不同,使带电分子产生不同的 的 迁移速度 ,从而实现样品中各种分子的分别。两种常用的电泳方法是 琼脂糖凝胶电泳 和 聚丙烯酰胺凝胶电泳 ,在测定蛋白质分子用 量时通常运用 SDS- - 聚丙烯酰胺凝胶电泳。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶中的迁移率 取决于 它所带净电荷的多少 以及 分子大小 等因素。4 蛋白质的提取和分别 蛋白质的提取和分别一般分为四步:样品处理、 、 粗分别 、 、纯化和 和 纯度鉴定 。5 样品处理 血液由 血浆 和 各种血细胞组成,其中红细胞最多。红细胞具有 携带运输氧气和二氧化碳 的特点。红细胞中有一种特别
25、重要的蛋白质血红蛋白 ,其作用是 运输氧气和二氧化碳 ,血红蛋白有 4 4个肽链组成,包括两条条 肽链和两条 B B 肽链 ,其中每条肽链环绕一个 亚铁血红素 基团 ,磁基团可携带一分子氧或一分子二氧化碳。血红蛋白因含有血红素呈现红色。红细胞的洗涤 洗涤红细胞的目的是 去除杂蛋白,采集的血样要刚好采纳 低速短时间 分别红细胞,然后用胶头吸管吸出上层透亮的 黄色血浆,将下层 暗红色的 液体倒入烧杯,再加入 五倍体积的生理盐水,缓慢搅拌非常钟,低速短时间离心,如此重复洗涤三次,直至上清液不再呈现黄色,表明红细胞已洗涤干净。血红蛋白的释放 在 蒸馏水 和 甲苯作用下,红细胞裂开释放出血红蛋白。分别血
26、红蛋白溶液为 将搅拌好的混合溶液离心后,试管中的溶液分为 4 层。第一 层为无色透亮的 甲苯层 ,第 2 层为白色薄层固体,是脂溶性物质的德沉淀层第 ,第 3 层是红色透亮液体,这是 血红蛋白的水溶液第 ,第 4 层是其他杂质的暗红色沉淀物。将试管中的液体用滤纸过滤,除去之溶性沉淀层,于分液漏斗中静置片刻后,分出下层的红色透亮液体。透析取 取 1mL 的血红蛋白溶液装入 透析袋有 中,将透析袋放入盛有 300mL 的物质为 的量的浓度为 20mmol/L 的 磷酸缓冲液析 中,透析 12h 。透析可以去除样品中分子量较小 的杂质,或用于更换样品的 缓冲液 。6 凝胶色谱操作 第一步要 制作 凝
27、胶色谱柱的制作 ,其次步要 凝胶色谱柱的装填,因为 干的凝胶和用缓冲液平衡好的凝胶体积差异很大, 所以装柱前须要依据色谱柱的内体积计算所须要的凝胶量。在装填凝胶柱时,不得有 气泡 存在。因为气泡会 搅乱洗脱液中蛋白质的洗脱次序,降低分别效果。第三步是 样品的加入和洗脱。 疑难点拨 1 1 凝胶色谱法分别蛋白质的原理凝胶色谱法也称为安排色谱法,它是依据分子量的大小分别蛋白质的方法之一。所用的凝胶事实上是一些微小的多孔球体,这些小球体大多数是由多糖类化合物构成,小球体内部有很多贯穿的通道,当一个 含有各种分子的样品溶液缓慢流经时,各分子在色谱柱内进行两种不同的运动,即垂直向下的运动和无规则的扩散运
28、动,相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小的蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程较长,移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最终流出,这种现象又叫分子筛现象。此外,凝胶本身具有三维网状结构,相对分子质量大的分子通过这种网状结构上的空袭时阻力大,而相对 分子质量小的分子通过时阻力小,因此不同分子量的蛋白质分子可以获得分别。2 2 与其他真核细胞相比,红细胞的特点及这一特点对进行蛋白质的分别的意义哺乳动物及人的成熟的红细胞是双面凹圆饼状,没
29、有细胞核和细胞器。其含有的血红蛋白是有色蛋白,因此在凝胶色谱分别时可以通过视察颜色来推断什么时候应当收集脱液。这使血红蛋白的分别过程特别直观,大大简化了试验操作。3 3 电泳的作用及其原理电泳是指带电粒子在电场的作用下发生迁移的过程。很多重要的生物大分子,如氨基酸、多肽、蛋白质、核苷酸、核酸等都具有可解离基团,它们在某个特 定的 H pH 下会带上正电或负电;在电场的作用下,这些带电分子会向着与其所带电荷相反的电极方向移动。电泳技术就是在电场的作用下,利用待分别样品中各种分子带电性质以及分子本身大小、形态等性质的差异,使带电分子产生不同的迁移速度,从而达到对样品进行分别、鉴定或提纯的目的。4.
30、 你能从凝胶色谱的分别原理分析为什么凝胶的装填要紧密、匀称吗?答:凝胶事实上是一些微小的多孔球体,小球体内部有很多贯穿的通道。相对分子质量较大的蛋白质分子不能进入凝胶颗粒内部,只能分布在颗粒之间,通过的路程较短,移动速度较快;相对分子质量较小的 蛋白质分子比较简单进入凝胶内的通道,通过的路程较长,移动速度较慢。因此,样品中相对分子质量较大的蛋白质先流出,相对分子质量中等的分子后流出,相对分子质量最小的分子最终流出,从而使各种相对分子质量不同的分子得以分别。假如凝胶装填得不够紧密、匀称,就会在色谱柱内形成无效的空隙,使本该进入凝胶内部的样品分子从这些空隙中通过,搅乱洗脱液的流淌次序,影响分别的效
31、果。 典例解析 用凝胶色谱法分别蛋白质时,分子量大的蛋白质( D )A 路程较长,移动速度较慢 B 路程较长,移动速度较快C 路程较短,移动 速度较慢 D 路程较短,移动速度较快 解析:在小球体内部有很多贯穿的通道,当相对分子质量不同的蛋白质通过凝胶时,相对分子质量较小的蛋白质简单进入凝胶内部的通道,路程较长,移动速度较慢;而相对分子质量较大的蛋白质无法进入凝胶内部的通道,只能在凝胶外部移动,路程较短,移动速度较快。 经典列题剖析题 例题 1 、关于果酒制作过程中的叙述正确的是( B )A 先去烂子粒和枝梗,再用清水冲洗污物B 发酵的温度维持在 20 最好 C 发酵过程中须要适时打开瓶盖放气,
32、以防发酵瓶裂开D 须要不 断的充入氧气 解析:为防杂菌污染,烂子粒应当冲洗之前去除,而去枝梗应在冲洗之后;酵母菌酒精发为 酵需在无氧条件下进行,通气时只能拧松瓶盖不行打开瓶盖;最相宜温度为 20 。题 例题 2 、关于果醋制作过程中的叙述正确的是( C )A 打开发酵瓶是因为全过程须要通入氧气,排出二氧化碳 B 醋酸菌在糖源和氧气足够时,能将葡萄糖分解成醋酸和二氧化碳 C 当糖源不足时,醋酸菌可将酒精分解成醋酸 D 要使果酒变成果醋只需通入氧气,加入醋酸菌就可以了 解析:醋酸菌和酵母菌发酵的区分在于前者需氧,不产生二氧化碳,而且发酵的最适温度也不同。题 例题 3 、腐乳制作过程中影响其风味和品
33、质的因素有哪些?( A )盐的用量 酒的种类和用量 发酵温度 发酵时间 辛香料的用量 A B C D 解析:盐、酒、辛香料不仅用来调味,还可抑菌,防腐乳变质。相宜的盐的用量和酒的浓度还影响发酵中蛋白酶的作用发挥;发酵时间和温度都会影响腐乳的风味。题 例题 4 、将 10 毫升酵母菌液放在相宜的温度下培育,并且于不同时间内等量匀称取样 4 次,和 分别测定样品中酵母菌的数量和 PH ,结果如下表。请分析回答:样品 酵 母 菌 的 数 量(个/mm 3 )PH 1 1210 4.8 2 820 5.4 3 1210 3.7 4 1000 5.0 表中样品取样先后次序是2 、4 、1 、3对酵母菌而
34、言,10 毫升该培育液的环境负荷量为 1.21 ×10 7 个。为 若第五次匀称取样时,样品中的酵母菌数量为 760 (个/mm 3 ),产生这一结果的缘由是, 培育液中的养分物质不断被消耗,pH 值减小,部分酵母菌因养分缺乏不适应而死亡并解体。 解析: (1 )由于酵母菌进行有氧呼吸和无氧呼吸都产生二氧化碳,使发酵液的酸性增加。依据样品 品 PH 大小,越早取样 PH 越大,由此取样依次为 2 、4 、1 、3 。( (2 )经过培育 10mL 培育液中有菌数 1210 个/mm 3 为 ,环境负荷量应为 1.21 ×10 7 。( (3 )培育液中的养分物质不断被消
35、耗,pH 值减小,部分酵母菌因养分缺乏不适应而死亡并解体。题 例题 5、 、 水果罐头盖上印有如发觉盖子鼓起,请勿选购的字样,引起盖子鼓起的最可能缘由是( B )A 、好氧型细菌呼吸,产生 CO 2 和 和 H 2 O B 、酵母菌呼吸,产生 CO 2 和 和 C 2 H 5 OH C 、乳酸菌呼吸,产生 CO 2 和 和 C 3 H 6 O 3D 、酵母菌呼吸,产生 CO 2 和 和 H 2 O 解析 罐头是密封、杀菌的,但不解除有微生物的孢子等存活下来,只有进行无氧呼吸的微生物可以生存;罐头鼓胀是过期后微生物生活产气的结果,乳酸菌无氧呼吸产生乳酸,无气体产生;酵母菌既可以在有氧条件下生活,
36、也可以在无氧条件下发酵产生酒精和二氧化碳。题 例题 6、 、了 有人测定了 A 、B 、C 、D 四种植物体内多种酶的活性与温度的关系,结果如下图在 所示。依据图中的信息,你认为在 25 摄氏度条件下,竞争实力最强的生物和对温度适应范围最广的生物分别是( A )AB 和 和 D BB 和 和 C CB 和 和 ADA 和 和 C 催 CD化 100A B效率50 ( ( % ) 0510 15 20 25 3035 40 解析 酶活性具有肯定的温度范围和相宜温度,温度过高酶会失活,低温对酶活性抑制;在肯定温度下,最相宜该温度 的酶活性最强,该生物生活的也最好,竞争力就强;酶有活性的范围最大,生
37、物的生存温度范围就越广。题 例题 7、 、( (05 年杭州高三第一次检测)下图是人体内某个化学反应的示意图,图中代表酶的英文字母是( A ) 解析 酶是起催化作用的,它在反应前后的性质保持不变,据图可以说明 A 所代表的物质是酶。所以在特定条件和肯定的时间内,酶的催化作用可以始终保持。题 例题 8、 、( (04 年北京东城区综合检测)试验探讨 pH 对酶活性的影响,打算 5 支含有等量但 胃蛋白酶溶液但 pH 各不相同的试管,每支试管加 1 块 块 1 cm 3 的正方体凝固蛋白块, 试管均于 置于 25 室温条件下,将各试管蛋白块消逝的时间记录于下表:的 酶溶液的 pH 蛋白块消逝的时间
38、(min )1 2 3 4 5 13 9 11 45 >60 ( (1 )酶活性最强时的 pH 是 2 。( (2 )蛋白块消逝的时间与酶活性强弱的关系是 酶活性越大,蛋白质分解越快,蛋白块消逝的时间越短 。( (3 )请以 2 种方法改进试验,使试验在更短的时间内完成。由 方法:将题给温度由 25 提高至大约 37 。方法:将原题中正方体蛋白块处理得成 更小(如切成 0.5 ×0.5 ×0.5=0.125 cm 3 ) ,这相当于消化道内进行的 物理性消化 ( (4 )在人体消化道中,能分泌本试验中酶的部位是 胃 。( (5 )为确认蛋白块的消逝是由于酶的作用,
39、还应对试验进行什么设计 将 另增加一个试管,放入等量的蛋白块并将 pH 调得适当,但不加酶溶液 题 例题 9 9 、蚪 现有相同容积的玻璃缸几只,利用自然的清水、同龄且发育状态相同的小蝌蚪 60只、饲喂蝌蚪的饲料、未经处理的具有生物活性的甲状腺激素,并把具有生物活性的甲状腺激素放在 50 的温水中处理 10 min 。依据这些现有的条件,请你设计一个试验,验证甲(1) 试验方案的设计第一步,取玻 璃缸 3 3 只,分别标记为甲、乙、丙;其次步,分别加入等量的清水和 0 20 只蝌蚪;第三步,假如甲缸每天饲喂饲料,丙缸每天饲喂用具有生物活性的甲状腺激素相拌的饲料,则乙缸怎样饲喂?每天饲喂用经过处
40、理过的甲状腺激素相拌的饲料 (2) 结果分析若乙、丙缸的蝌蚪发育同步,快速变态为小青蛙,而甲缸还是蝌蚪状态,说明甲状腺激素经过 50 的温水处理后,对其生物活性没有影响 ;若甲、乙缸的蝌蚪发育同步,而丙缸发育变态快速,说明白甲状腺激素经过 50 的温水处理后, 完全丢失了生物活性。若乙缸的蝌蚪发育比甲缸快,比丙缸慢,则说明白甲状腺激素经过 50 的温水处理后,使生物活性有所降低(3) 该试验设置甲、丙两组试验的目的是起比照作用 答案 (2 2 )甲状腺激素经过 50 的温水处理后,对其生物活性没有影响甲状腺激素经过 50 的温水处理后,完全丢失了生物活性甲状腺激素经过 50 的温水处理后,使生
41、物活性有所降低(3) 起比照作用例 例 10 、在 在 A DNA 分子的粗提取试验中,两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是(B B)A. 稀释血液、冲洗样品B. 使血细胞破 裂,降低 l NaCl 浓度使 A DNA 析出C. 使血细胞裂开,增大 A DNA 溶解度D. 使血细胞裂开,提取含杂质较少的 DNA解析:在该试验过程中,第一次加入蒸馏水的目的是使血细胞过度吸水而裂开,以便核物质溶解。其次次加入蒸馏水是为了降低 l NaCl 浓度至 0.14mol/l ,因为此时的 A DNA 溶解度最小,可使 A DNA 析出。例 例 11 、在制备鸡血细胞液的过程中,加入柠檬酸钠的目的是(A )A.
42、防止凝血B. 加快 A DNA 析出C. 加快 A DNA 溶解D. 加速凝血中 解析:柠檬酸钠的作用是利用柠檬酸根离子与血浆中 Ca2+ 离子结合成柠檬酸低 钠,降低 Ca2+离子浓度,使有关凝血酶活性降低。因此柠檬酸钠是抗凝血物质,防止凝血,有利于鸡血细胞液的制备。例 例 12 、 去除 A DNA 杂质时,可干脆在滤液中加入(A A),反应 10 15minA. 嫩肉粉B. 蒸馏水C. 2mol/lNaCl D. 酒精解析:嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质例 例 13 、A DNA 在 在 l NaCl 溶液中溶解度有二重性,随着 l NaCl 溶液的改变而改变。(1 1 )请在下列
43、l NaCl 溶液中选出溶解度能使 A DNA 析出最彻底的一种(A A)和溶解度最高的一种(B B)A. 0.14m ol/l B. 2mol/lC. 0.15mol/lD. 0.3mol/l(2 2)A DNA 不溶于酒精溶液,但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液,利用这一原理可以 除 除去杂质 ,可以推想溶于酒精中的物质可能有某些脂质、蛋白质、糖类或其他大分子物质。(3 3 )利用 A DNA 与 与 二苯胺 变蓝色的特性,将该物质作为鉴定 DNA 的试剂。其试验过程要点是向放有 DNA 的试管中加热 4ml 的 二苯胺试剂 。混合匀称后,将试管置于 沸水中水热 浴加热 5min ,待试
44、管 冷却后 ,视察试管中溶液颜色的改变,这个试验也明 说明 DNA 耐 高 温。知 解析:依据试验原理可知 DNA 在 在 0.14mol/l 的 的 l NaCl 溶液中溶解度最低,在高浓度 2mol/l中,溶解度最高。A DNA 存在于染色体上,为了把 A DNA 和其他物质分开,实行 A DNA 不溶于酒精用 的方法,目的是除去杂质;利用 A DNA 与二苯胺(沸水浴)成蓝色的特性,可以鉴定提取的DNA 。例 例 14 、 关于 A DNA 在 在 l NaCl 溶液中的溶解度,下面叙述中正确的时(D D)A. 随着 l NaCl 溶液浓度的增大,A DNA 在 在 l NaCl 溶液中的溶解度也增大B. 随着 l NaCl 溶液浓度的削减,A DNA 在 在 l NaCl 溶液中的溶解度也削减C. A DNA 在 在 N Nl aCl 溶液中的溶解度与 l NaCl 溶液的浓度无关D. 当 当 l NaCl 溶液的浓度为 l 0.14mol/l 时,A DNA 的溶解度最低例 例 15 、 在A DNA 的粗提取与鉴定的试验中,将提取获得的含有 A DNA 的粘稠物(还含有较多杂质)分别处理如下:第一,放入 l 0.14mol/l 的 的 l NaCl 溶液,搅拌后过滤,得滤液 A A 和粘稠物 a a其次,放入 l 2mol/l 的 的 l NaCl 溶液,搅拌后过