第八章免疫学检测课件.ppt

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1、第1页,此课件共39页哦 免疫球蛋白(免疫球蛋白(IgIg)是具有抗体活性或无抗体活性而在)是具有抗体活性或无抗体活性而在化学结构上与抗体相似的球蛋白。因此,化学结构上与抗体相似的球蛋白。因此,一切抗体都是免疫一切抗体都是免疫球蛋白,但免疫球蛋白不一定都是抗体球蛋白,但免疫球蛋白不一定都是抗体。IgIg存在于机体的血存在于机体的血液、体液、外分泌液和淋巴细胞膜上。液、体液、外分泌液和淋巴细胞膜上。根据免疫球蛋白功能和理化性质将其分为根据免疫球蛋白功能和理化性质将其分为5 5类类IgGIgG、IgAIgA、IgMIgM、IgDIgD、IgEIgE。第2页,此课件共39页哦 IgG IgG是人体是

2、人体含量最多和最主要的含量最多和最主要的IgIg(75%75%),是唯一能),是唯一能够通过胎盘的够通过胎盘的IgIg,属于,属于再次免疫应答抗体再次免疫应答抗体,正常情况成人正常情况成人高于儿童,女性略高于男性。高于儿童,女性略高于男性。IgGIgG:7.67.6-16.6 g/L16.6 g/L1.I1.IgGgG增高增高:见于慢性感染、慢性肝炎、自身免疫见于慢性感染、慢性肝炎、自身免疫 性疾病、多发性骨髓瘤等性疾病、多发性骨髓瘤等 2.IgG2.IgG减低:见于各种免疫缺陷病,重链、轻链病减低:见于各种免疫缺陷病,重链、轻链病 肾病综合症、病毒感染肾病综合症、病毒感染、甲亢等甲亢等第3页

3、,此课件共39页哦 正常人血清中正常人血清中IgAIgA含量占血清总含量占血清总IgIg的的10%10%-15%15%IgAIgA分为血清型分为血清型IgAIgA与分泌型(与分泌型(SIgASIgA)两种。)两种。SIgASIgA的免的免疫功能更重要,具有保护黏膜的功能,与局部感染、炎疫功能更重要,具有保护黏膜的功能,与局部感染、炎症、肿瘤等病变密切相关。症、肿瘤等病变密切相关。IgAIgA:0.70.7-3.5 g/L3.5 g/L1.I1.IgAgA增高增高:见于见于IgAIgA型型MMMM、慢性炎症、类风关、慢性炎症、类风关、肝硬化、肾病等。肝硬化、肾病等。2.IgA 2.IgA减低:见

4、于呼吸道感染、非减低:见于呼吸道感染、非IgAIgA型型MMMM、重、重 链、轻链病、自身免疫病、原发和链、轻链病、自身免疫病、原发和 继发性免疫缺陷病。继发性免疫缺陷病。第4页,此课件共39页哦 IgMIgM是分子量最大的是分子量最大的IgIg(10%10%),以五聚体形式存在,),以五聚体形式存在,它不能透过血管璧,主要分布在血管内,有防止败血症它不能透过血管璧,主要分布在血管内,有防止败血症的发生的重要作用。的发生的重要作用。人体感染之后,人体感染之后,IgMIgM是出现是出现最早的抗体最早的抗体。IgMIgM:0.50.5-2.6 g/L2.6 g/L1.I1.IgMgM增高增高:见于

5、初期病毒感染、自身免疫病、肝见于初期病毒感染、自身免疫病、肝 硬化等硬化等 2.IgM 2.IgM减低:见于减低:见于IgAIgA型型MMMM、先天性免疫缺陷病、先天性免疫缺陷病、肾病综合症、免疫抑制剂治疗后等肾病综合症、免疫抑制剂治疗后等第5页,此课件共39页哦 IgEIgE是血清中最少的是血清中最少的 一种一种IgIg。与变态反应、寄生虫。与变态反应、寄生虫感染及皮肤过敏有关感染及皮肤过敏有关 IgEIgE:0.5-2.6 g/L0.5-2.6 g/L1.IgG1.IgG增高:增高:IgEIgE型型MMMM、重链病、肝病、自身免疫、重链病、肝病、自身免疫 病、各种过敏性疾病、寄生虫感染等病

6、、各种过敏性疾病、寄生虫感染等 2.IgG 2.IgG减低:先天性和获得性丙种减低:先天性和获得性丙种IgIg缺陷病、恶性缺陷病、恶性 肿瘤、长期可的松治疗。肿瘤、长期可的松治疗。第6页,此课件共39页哦血清免疫球蛋白(血清免疫球蛋白(Ig)测定临床意义)测定临床意义1.Ig减低减低 见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷见于各类先天性和获得性体液免疫缺陷、联合免疫缺陷的病人及长期使用免疫抑制剂的患者、联合免疫缺陷的病人及长期使用免疫抑制剂的患者。2.Ig单项增高单项增高 仅有某一种仅有某一种Ig增高而其他增高而其他Ig不增高。不增高。主要见于免疫增殖性疾病。主要见于免疫增殖性疾病。浆细胞病;浆细

7、胞病;过敏性疾过敏性疾病。病。3.Ig多项增高多项增高 表现为表现为IgG、IgA、IgM均增高。常均增高。常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以及系统见于各种慢性感染、慢性肝病、肝癌、淋巴瘤以及系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。性红斑狼疮、类风湿性关节炎等自身免疫性疾病。第7页,此课件共39页哦 补体补体(complement(complement,C)C)是存在于人血清与组织是存在于人血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的糖蛋白,可被抗原液中的一组经活化后具有酶活性的糖蛋白,可被抗原抗体复合物或其他因素激活。激活后的补体表现出复抗体复合物或其他因素激活。激活后的补体表

8、现出复杂的生物效应,既参与防御、免疫调控的正常免疫应杂的生物效应,既参与防御、免疫调控的正常免疫应答,也参与对组织的免疫损伤。补体含量的测定,对答,也参与对组织的免疫损伤。补体含量的测定,对一些疾病的诊断、疗效观察具有重要意义。一些疾病的诊断、疗效观察具有重要意义。第8页,此课件共39页哦一、总补体溶血活性检测一、总补体溶血活性检测(CH50)(CH50)主要反映补体经典激活途径的综合水平。主要反映补体经典激活途径的综合水平。1.CH501.CH50增高增高 见于各种急性炎症、组织损伤和某见于各种急性炎症、组织损伤和某些恶性肿瘤等。些恶性肿瘤等。2.CH502.CH50减低减低 (1 1)补体

9、成分大量消耗:血清病、链球菌感染后)补体成分大量消耗:血清病、链球菌感染后肾小球肾炎、类风湿性关节炎等肾小球肾炎、类风湿性关节炎等(2 2)补体大量丢失:外伤、手术和大失血)补体大量丢失:外伤、手术和大失血(3 3)补体合成不足:肝硬化、慢性肝炎和重型肝)补体合成不足:肝硬化、慢性肝炎和重型肝炎等炎等 第9页,此课件共39页哦 补体溶血程度与活性相关,呈一特殊的补体溶血程度与活性相关,呈一特殊的S S曲线曲线 一般以一般以50%50%溶血作为检测终点(即溶血作为检测终点(即CH50CH50)第10页,此课件共39页哦二、血清二、血清C3C3测定测定无论经典途径还是旁路途径无论经典途径还是旁路途

10、径C3C3都参与,可反映出补都参与,可反映出补体的活化情况。体的活化情况。C3C3增高增高各种急性炎症、传染病早期、某些恶性各种急性炎症、传染病早期、某些恶性肿瘤(以肝癌最明显)及排异反应等。肿瘤(以肝癌最明显)及排异反应等。C3C3降低降低肾炎的病因鉴别:链球菌感染肾炎血清肾炎的病因鉴别:链球菌感染肾炎血清C3C3减少,减少,病毒性肾炎血清病毒性肾炎血清C3C3含量正常,还见于含量正常,还见于SLESLE、肝硬化、慢、肝硬化、慢性肝病等。性肝病等。第11页,此课件共39页哦二、血清二、血清C4C4测定测定是补体经典激活途径的一个重要组分。是补体经典激活途径的一个重要组分。C4C4增高增高 各

11、种传染病、急性炎症、组织损伤、多发性骨髓瘤各种传染病、急性炎症、组织损伤、多发性骨髓瘤等等。C4C4降低降低自身免疫性肝炎、狼疮性肾炎、自身免疫性肝炎、狼疮性肾炎、SLESLE、病毒性感染、病毒性感染、肝硬化等。、肝硬化等。第12页,此课件共39页哦 人类淋巴细胞是机体免疫系统中的一重要细胞人类淋巴细胞是机体免疫系统中的一重要细胞群。根据其功能和来源、大致可分为群。根据其功能和来源、大致可分为 T细胞、细胞、B细胞细胞、NK细胞细胞三大类。三大类。检测各群细胞的数量和功能的变化或异常,可帮助了检测各群细胞的数量和功能的变化或异常,可帮助了解机体的免疫功能状况以及与免疫有关的疾病发病的机制解机体

12、的免疫功能状况以及与免疫有关的疾病发病的机制、预后判断等。、预后判断等。第13页,此课件共39页哦 一、T细胞亚群的检测细胞亚群的检测T细胞花结形成试验细胞花结形成试验所得的百分率基本上代表了所得的百分率基本上代表了T细胞占淋巴细胞细胞占淋巴细胞的百分率。的百分率。升高:升高:自身免疫性疾病及器官移植排斥反自身免疫性疾病及器官移植排斥反应等。应等。降低:降低:免疫缺陷性疾病等。免疫缺陷性疾病等。T细胞转化试验细胞转化试验转化率降低,见于细胞免疫缺陷或细胞免疫转化率降低,见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下患者。功能低下患者。第14页,此课件共39页哦 T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定 T细胞膜

13、表面分子具有不同的抗原性,主要有细胞膜表面分子具有不同的抗原性,主要有CD2+、CD3+、CD4+、CD8+等。等。CD3CD3+表达于所有成熟的表达于所有成熟的T淋巴细胞表面,淋巴细胞表面,T细胞特有细胞特有标志,反映标志,反映T细胞总数的变化。细胞总数的变化。CD3+又可分为又可分为CD4CD4+、CD8CD8+CD3CD3+/CD4/CD4+T T辅助辅助细胞(细胞(ThTh)CD3CD3+/CD8/CD8+T T抑制细胞抑制细胞(Ts)(Ts)第15页,此课件共39页哦 淋巴细胞各亚群之间的互相制约和互相辅助作用是维淋巴细胞各亚群之间的互相制约和互相辅助作用是维持机体正常的免疫应答反应

14、的保障。持机体正常的免疫应答反应的保障。CD3 CD3+降低降低:自身免疫性疾病,如自身免疫性疾病,如SLE、RA CD3 CD3+/CD4/CD4+降低降低:恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷、艾恶性肿瘤、遗传性免疫缺陷、艾 滋病、应用免疫抑制剂等。滋病、应用免疫抑制剂等。CD3CD3+/CD8/CD8+降低降低:自身免疫性疾病、变态反应性疾病自身免疫性疾病、变态反应性疾病 CD4CD4+/CD8/CD8+比值增高:比值增高:恶性肿瘤、自身免疫病,病恶性肿瘤、自身免疫病,病 毒性感染等毒性感染等 CD4 CD4+/CD8/CD8+比值降低:比值降低:艾滋病(艾滋病(0.50.5)第16页,此课件共39

15、页哦二、二、B细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定CD19+、CD20+、CD22+。CD19+是最重要的是最重要的B细胞标记分子。细胞标记分子。升高升高见于见于B细细胞系统的恶性肿瘤;胞系统的恶性肿瘤;降低降低见于体液免疫缺陷病及使用见于体液免疫缺陷病及使用化疗或免疫抑制剂后。化疗或免疫抑制剂后。第17页,此课件共39页哦 第四节第四节 肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测肿瘤标志物是指能够区分肿瘤或非肿瘤的化学肿瘤标志物是指能够区分肿瘤或非肿瘤的化学物质,包括肿瘤抗原、激素、受体、酶与同工酶、物质,包括肿瘤抗原、激素、受体、酶与同工酶、癌基因及其产物等百余种。癌基因及其产物等百余种。甲胎蛋白甲胎蛋白(

16、AFPAFP)测定)测定 癌胚抗原癌胚抗原(CEACEA)测定)测定 组织多肽抗原组织多肽抗原(TPATPA)测定)测定 前列腺特异抗原前列腺特异抗原(PSAPSA)测定)测定 癌抗原癌抗原125125(CA125CA125)测定)测定 癌抗原癌抗原15-315-3(CA15-3CA15-3)测定)测定 第18页,此课件共39页哦(一)甲胎蛋白(一)甲胎蛋白(AFP)测定)测定参考值:血清参考值:血清25ug/L临床意义临床意义1.AFP是目前诊断是目前诊断肝细胞癌肝细胞癌最特异的标志物,高于最特异的标志物,高于300ug/L 诊断阈值。诊断阈值。2.病毒性肝炎、肝硬化时,随着受损肝细胞的修复

17、再病毒性肝炎、肝硬化时,随着受损肝细胞的修复再生,幼稚化的肝细胞重新具有产生生,幼稚化的肝细胞重新具有产生AFP的能力,但常低的能力,但常低于于200ug/L。3.妊娠及其他亦可高妊娠及其他亦可高。第19页,此课件共39页哦(二)癌胚抗原(二)癌胚抗原(CEACEA)测定)测定恶性肿癌患者的血清中可发现恶性肿癌患者的血清中可发现CEACEA含量异常升高。含量异常升高。常用于诊断常用于诊断消化器官的癌症消化器官的癌症(结肠癌、胃癌、胰腺癌、(结肠癌、胃癌、胰腺癌、转移性肝癌等)。转移性肝癌等)。(三)组织多肽抗原(三)组织多肽抗原(TPATPA)测定)测定TPATPA是一种非特异性肿瘤标志物,血

18、清中是一种非特异性肿瘤标志物,血清中TPATPA增高增高主要用于辅助诊断主要用于辅助诊断迅速增殖的恶性肿瘤迅速增殖的恶性肿瘤,且在恶性肿瘤,且在恶性肿瘤的疗效观察方面敏感性较高。的疗效观察方面敏感性较高。第20页,此课件共39页哦(四)前列腺特异抗原(四)前列腺特异抗原(PSAPSA)测定)测定PSAPSA是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶,是一种由前列腺上皮细胞分泌的蛋白酶,在在前列腺癌前列腺癌时,前列腺腺管破坏导致血清时,前列腺腺管破坏导致血清PSAPSA水平水平明显升高。明显升高。(五)癌抗原五)癌抗原125125(CA125CA125)测定)测定CA125CA125为一种糖蛋白性肿瘤相

19、关抗原,存在于为一种糖蛋白性肿瘤相关抗原,存在于卵巢肿瘤的上皮细胞内,主要用于辅助诊断恶性卵巢肿瘤的上皮细胞内,主要用于辅助诊断恶性浆液性浆液性卵巢癌卵巢癌等。等。(六)癌抗原(六)癌抗原15-315-3(CA15-3CA15-3)测定)测定CA15-3CA15-3是一种是一种乳腺癌乳腺癌相关抗原,对乳腺癌的诊相关抗原,对乳腺癌的诊断及术后随访临测有一定的价值。断及术后随访临测有一定的价值。第21页,此课件共39页哦第22页,此课件共39页哦自身抗体的临床应用自身抗体的临床应用第23页,此课件共39页哦一、类风湿因子(一、类风湿因子(RFRF)的检测)的检测RFRF是一种抗变性是一种抗变性Ig

20、GIgG自身抗体,主要是自身抗体,主要是IgMIgM,存在于类,存在于类风湿性关节炎患者的血清中和关节液内。风湿性关节炎患者的血清中和关节液内。RFRF与体内变性的与体内变性的IgGIgG结合形成免疫复合物后致组织炎性损结合形成免疫复合物后致组织炎性损伤,发生骨关节炎及血管炎。伤,发生骨关节炎及血管炎。参考值参考值 增强免疫比浊法增强免疫比浊法:2020临床意义临床意义 类风湿关节炎患者的阳性率为类风湿关节炎患者的阳性率为70%70%。SLESLE为为30%30%。其他。其他结缔组织病也有一定的阳性,如多发性肌炎、硬皮病、干结缔组织病也有一定的阳性,如多发性肌炎、硬皮病、干燥综合征等。燥综合征

21、等。第24页,此课件共39页哦第25页,此课件共39页哦二、抗核抗体检测二、抗核抗体检测(一)抗核抗体测定(一)抗核抗体测定抗核抗体(抗核抗体(ANAANA)是一组将自身真核细胞的各种细是一组将自身真核细胞的各种细胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称,主要是胞核成分为靶抗原的自身抗体的总称,主要是IgGIgG。并。并无器官和种族的特异性。无器官和种族的特异性。试验多用鼠肝片作为抗原,通过间接荧光法可检出试验多用鼠肝片作为抗原,通过间接荧光法可检出四种荧光核型:四种荧光核型:均质型、核膜均质型、核膜型、颗粒型、核仁型。型、颗粒型、核仁型。ANAANA检测在临床诊断与鉴别诊断中是一个极为重要检测在临床

22、诊断与鉴别诊断中是一个极为重要的的筛选筛选试验。绝大多数自身免疫性试验。绝大多数自身免疫性 病均可呈阳性。病均可呈阳性。第26页,此课件共39页哦(二二)可提取性核抗原(可提取性核抗原(ENAENA)抗体谱测定)抗体谱测定 ENAENA是可提取性核抗原的总称。抗是可提取性核抗原的总称。抗ENAENA抗体是针对细胞抗体是针对细胞核中可提取性核抗原的自身抗体,约有十余种,主要核中可提取性核抗原的自身抗体,约有十余种,主要有有ds-DNAds-DNA、SmSm、RNPRNP、SSASSA、SSBSSB、Jo-1Jo-1、Scl-70Scl-70等等。不同的自身免疫性疾病可产生不同的抗不同的自身免疫性

23、疾病可产生不同的抗ENAENA抗抗体。根据体。根据ENAENA抗原分子量及抗原特性不同对其进行检测抗原分子量及抗原特性不同对其进行检测,如免疫印迹技术,如免疫印迹技术(IBT)(IBT)。第27页,此课件共39页哦第28页,此课件共39页哦第29页,此课件共39页哦第30页,此课件共39页哦(四)抗胞质和抗组织抗体检测(四)抗胞质和抗组织抗体检测抗线粒体抗体(抗线粒体抗体(AMAAMA)是一组以线粒体为是一组以线粒体为靶抗原的自身抗体,主要是靶抗原的自身抗体,主要是IgGIgG。阳性主要见于原发。阳性主要见于原发性胆汁性肝硬化。性胆汁性肝硬化。抗甲状腺球蛋白抗体(抗甲状腺球蛋白抗体(ATGAT

24、G)是诊断甲是诊断甲状腺自身免疫性疾病的一个特异性指标。状腺自身免疫性疾病的一个特异性指标。抗甲状腺微粒体抗体(抗甲状腺微粒体抗体(ATMATM)阳性主要见阳性主要见于桥本甲状腺炎。于桥本甲状腺炎。抗平滑肌抗体(抗平滑肌抗体(ASMAASMA)阳性主要见于自身阳性主要见于自身免疫性肝炎(如狼疮性肝炎)、原发性胆汁性肝硬化、免疫性肝炎(如狼疮性肝炎)、原发性胆汁性肝硬化、急性病毒性肝炎等。急性病毒性肝炎等。第31页,此课件共39页哦第32页,此课件共39页哦第六节第六节 感染免疫检测感染免疫检测一、细菌感染免疫检测一、细菌感染免疫检测(一)血清抗链球菌溶血素(一)血清抗链球菌溶血素“O”O”试验

25、(试验(ASOASO)抗链球菌溶血素抗链球菌溶血素“O”O”是机体感染溶血性链球菌是机体感染溶血性链球菌后产生的相应抗体,升高提示曾有溶血性链球菌感染后产生的相应抗体,升高提示曾有溶血性链球菌感染。正常人正常人 ASO ASO 200 U200 UASOASO升高常见于升高常见于A A群溶血性链球菌感染及感染后免疫群溶血性链球菌感染及感染后免疫反应所致的疾病,如活动性风湿热、风湿性关节炎、反应所致的疾病,如活动性风湿热、风湿性关节炎、风湿性心肌炎及风湿性心肌炎及链球菌感染后急性肾小球肾炎等。链球菌感染后急性肾小球肾炎等。第33页,此课件共39页哦(二)伤寒和副伤寒沙门菌免疫测定(二)伤寒和副伤

26、寒沙门菌免疫测定肥达(肥达(WidalWidal)反应)反应检测伤寒抗体。检测伤寒抗体。参考值:伤寒参考值:伤寒 O O 1 1:80 H 80 H 1 1:160160 副伤寒副伤寒 甲、乙、丙甲、乙、丙 1 1:8080在病程中逐周复查,若抗体效价依此递增或恢复期在病程中逐周复查,若抗体效价依此递增或恢复期较急性期升高较急性期升高4 4倍或以上,则有诊断意义。倍或以上,则有诊断意义。O O升高,升高,H H升高升高 伤寒感染的可能性大;伤寒感染的可能性大;O O升高,升高,H H不升高不升高可能是伤寒类感染的早期;可能是伤寒类感染的早期;H H升高,升高,O O不升高不升高可能是预防接种或

27、是非特异可能是预防接种或是非特异 性的性的“回忆反应回忆反应”。第34页,此课件共39页哦(三)结核分枝杆菌抗体(三)结核分枝杆菌抗体(TB-Ab)和)和DNA测定测定 TB-AbTB-Ab阳性阳性,表示有结核分枝菌感染,其灵敏度,表示有结核分枝菌感染,其灵敏度90%、特异性、特异性85%,比传统的痰涂片和细菌培养方法,比传统的痰涂片和细菌培养方法简便、快捷、灵敏。简便、快捷、灵敏。PCR检测检测DNA特异性更强、灵敏特异性更强、灵敏度更高。度更高。(四)幽门螺杆菌抗体(四)幽门螺杆菌抗体(HP-Ab)测定)测定HP-AbHP-Ab阳性,表示胃、十二指肠幽门螺杆菌感染,阳性,表示胃、十二指肠幽门螺杆菌感染,如胃炎、消化性溃疡等,其灵敏度如胃炎、消化性溃疡等,其灵敏度90%,特异性,特异性85%。HP-Ab阳性也可见于胃癌。阳性也可见于胃癌。第35页,此课件共39页哦第36页,此课件共39页哦第37页,此课件共39页哦第38页,此课件共39页哦第39页,此课件共39页哦

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