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1、蜂胶中总黄酮的测定依据中华人民共和国国家标准GB/T 20574-2006蜂胶中总黄酮含量的测定方法 进行测定采用分光 光度法1原理溶于乙醇的黄酮类化合物在弱碱性条件下，与显色剂三价铝离子结合生成有色物质，可在415nm波长 附近产生最大吸收。在一定浓度范围内，其吸光度与黄酮类化合物的含量成正比。与标准曲线比拟，可定 量测定黄酮类化合物的含量。2试剂和试剂配制2.1试剂95%乙醇；无水乙醇；100g/L硝酸铝溶液；9.8g/L醋酸钾溶液；芦丁标准品2. 2试剂配制0. 2g/L芦丁对照品使用溶液:精密称取经120C减压真空干燥至恒重的芦丁对照品20mg,置于100mL容 量瓶中，加无水乙醇溶解
2、并稀释至刻度，摇匀。3仪器和设备可见分光光度计；减压干燥箱4试样的制备一一蜂胶溶液蜂胶溶液指蜂胶的的乙醇提取液。吸取蜂胶溶液样品10位，置于50mL容量瓶中，力口95%乙醇稀释至刻度，摇匀，待测。5分析步骤标准曲线的绘制精密吸取芦丁对照品使用溶液1位，2mL, 3mL, 4mL, 5mL, 6mL,分别置于501nL容量瓶中。力口95%乙醇至 总体积为15mL,依次加入硝酸铝溶液1mL,醋酸钾溶液1mL,摇匀，加水至刻度，摇匀。静置lh。用比色杯 于415nm处，以30%乙醇溶液为空白，测定吸光度。以50mL中芦丁质量(mg)为横坐标，吸光度为纵坐标,绘制标 准曲线或按直线回归方程计算。5.1
3、 空白试验精密吸取待测试料溶液1.0mL,置于50mL容量瓶中，力口95%乙醇至总体积为15mL,加水稀至刻度,摇匀。5. 3测定精密吸取待测试料溶液1.OniL,置于50mL容量瓶中,按标准曲线绘制步骤进行操作以空白试液作参比,，在波长415nm处测定试料溶液的吸光度通过回归方程计算,求出试料溶液中的黄酮类化合物含量(mg)。6结果表述蜂胶中黄酮类化合物的总含量按下式计算X =X100%JTxrfxlOOOX一黄酮类化合物的总含量,m一由标准曲线上查出或由直线回归方程求出的样品比色液中芦丁质量,单位为毫克(mg)W一样品的质量或体积,单位为克(g)或毫升(mL)d一稀释比例根据试验过程及标准曲线，代入数据进行计算。