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1、关于实验血清甘油三酯含量测定现在学习的是第1页,共8页了解血清甘油三酯含量测定的了解血清甘油三酯含量测定的 正常值与临床意义正常值与临床意义掌握血清甘油三酯化学法测定的掌握血清甘油三酯化学法测定的 基本原理及主要技术方法基本原理及主要技术方法现在学习的是第2页,共8页甘油三酯甘油三酯KOH60-7020min钾皂钾皂甘油甘油+HIO4+NH4+甲醛甲醛乙酰丙酮乙酰丙酮3,5-二乙酰二乙酰-1,4二氢二氢-2,6 二甲基吡啶二甲基吡啶(黄色带荧光)(黄色带荧光)甘油甘油甲醛甲醛皂化皂化氧化氧化显色显色32现在学习的是第3页,共8页取取3(或或4)只)只小试管小试管,依次依次加入蒸馏水、标准液、样
2、品,加入蒸馏水、标准液、样品,抽提剂及硫酸,边加边摇,用力振摇抽提剂及硫酸,边加边摇,用力振摇10min,静置,静置10min分层分层 注意注意:试管必须干燥:试管必须干燥吸取上层液体吸取上层液体0.5ml,加入对应的,加入对应的3(或或4)只)只大试管大试管中,中,加入异丙醇、皂化试剂,充分混匀,加入异丙醇、皂化试剂,充分混匀,65水浴水浴5min注意注意:吸上层液时,务必当心,绝对不可吸入下层液体:吸上层液时,务必当心,绝对不可吸入下层液体(分光光度计预热)(分光光度计预热)加入氧化试剂,充分混匀后,加入氧化试剂,充分混匀后,加入乙酰丙酮和氨的混合液,摇匀,加入乙酰丙酮和氨的混合液,摇匀,
3、65水浴水浴15min取出试管,流水取出试管,流水/室温冷却,测室温冷却,测420nm的吸光度的吸光度抽提抽提皂化皂化氧化显色氧化显色比色比色现在学习的是第4页,共8页拉杆,拉杆,0-4档档样品池样品池读数读数波长波长毛面毛面1、分清光面、毛面。手应接触毛面,光从光面通过、分清光面、毛面。手应接触毛面,光从光面通过2、用溶液润洗、用溶液润洗2-3次,装至次,装至2/3至至4/5体积体积3、粗纸吸水、柔纸擦亮光面、粗纸吸水、柔纸擦亮光面比色杯的使用比色杯的使用1.打开电源,调节旋钮至需要的波长,预热打开电源,调节旋钮至需要的波长,预热2030min2.1档档(空白管)(空白管),T模式调模式调1
4、00%,显示,显示“Blank”、“100”3.拉杆拉至拉杆拉至1.5档,档,T模式调模式调0%,显示,显示“0.00”4.换到换到A模式,拉至模式,拉至2、3、4档,读取各个样品的吸光度档,读取各个样品的吸光度光面光面现在学习的是第5页,共8页Lambert-Beer 定律定律正常参考值为正常参考值为0.301.7mmol/L mg/mlmmol/L国际单位国际单位 mg/ml 1000 摩尔质量摩尔质量g/mol(885)A1 c1 m1标准管法标准管法 =(终体积相同时)(终体积相同时)A2 c2 m2 A样品样品 m标准品标准品 A标准品标准品样品样品TG浓度浓度=V样品样品 A样品样品 1mg/ml 0.2ml A标准品标准品=0.2ml现在学习的是第6页,共8页抽提时摇匀静置,待完全分层后才能吸取上层液,抽提时摇匀静置,待完全分层后才能吸取上层液,吸取上层液时不能吸入下层液;吸取上层液时不能吸入下层液;实验完成后,试管和比色杯必须用皂粉洗干净,实验完成后,试管和比色杯必须用皂粉洗干净,不能有油污,将水甩干,倒置晾干;不能有油污,将水甩干,倒置晾干;枪头必须清洗干净,甩干枪头必须清洗干净,甩干选用小试管时试管口径不能太细;选用小试管时试管口径不能太细;试管使用时必须要干燥;试管使用时必须要干燥;现在学习的是第7页,共8页感谢大家观看感谢大家观看现在学习的是第8页,共8页