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1、动物实验基础精减现在学习的是第1页,共68页一、概念一、概念1、动物实验、动物实验以实验动物为材料,采用各种方法在实验动以实验动物为材料,采用各种方法在实验动物身上进行实验,研究实验过程中实验动物发物身上进行实验,研究实验过程中实验动物发生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理生的生理、病理变化以及产生这些变化的机理,从而为生命科学服务。,从而为生命科学服务。现在学习的是第2页,共68页2、实验动物、实验动物实验动物实验动物指以实验研究为目的而进行培育指以实验研究为目的而进行培育的,具有明确微生物和遗传背景的动物。的,具有明确微生物和遗传背景的动物。(1)通过人工培育。通过人工培育。(2)对其
2、携带的微生物实行控制、遗传学背景对其携带的微生物实行控制、遗传学背景明确。明确。(3)用于科学实验。用于科学实验。现在学习的是第3页,共68页 1、按动物机体水平不同,可分为整体实验和、按动物机体水平不同,可分为整体实验和离体实验离体实验。(1)整体实验整体实验:整体动物和无损伤动物:整体动物和无损伤动物 (2)离体实验:离体实验:可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、可进一步具体分为分子、亚细胞、细胞、组织、器官等不同水平的实验。器官等不同水平的实验。2、按动物实验所需时间的长短,、按动物实验所需时间的长短, ()急性实验()急性实验(2天以内)天以内)()亚急性实验()亚急性实验(14
3、周)周)()慢性实验()慢性实验(26个月或更长时间甚至整个生命期)个月或更长时间甚至整个生命期)现在学习的是第4页,共68页 1 1、按遗传学控制方法分类按遗传学控制方法分类 (1)(1)近交系动物近交系动物: : 近交系动物又称纯系动物,是指动物通近交系动物又称纯系动物,是指动物通过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配过连续全同胞兄妹、亲子、堂兄妹近亲交配2020代以上,群体基因达到高度纯合和稳定的代以上,群体基因达到高度纯合和稳定的动物群。动物群。 优点优点:提高实验的精确度,减少实提高实验的精确度,减少实验的样本数,使实验结果更加可靠。验的样本数,使实验结果更加可靠。 现在学习的是第5
4、页,共68页(2)(2)突变系动物突变系动物突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。突变系动物是指保持有特殊的突变基因的品系动物。如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠如贫血鼠、肿瘤鼠、白血病鼠、肥胖病大鼠(fa)(fa)、白、白内障大鼠(内障大鼠(rcrc)、糖尿病大鼠)、糖尿病大鼠(di)(di)、新西兰高血压大鼠、新西兰高血压大鼠(GHR)(GHR)、米兰高血压大鼠、米兰高血压大鼠(MHS)(MHS)、尿崩症大鼠(、尿崩症大鼠(didi)、裸)、裸大鼠(大鼠(runrun)、糖尿病小鼠()、糖尿病小鼠(dbdb)、肌萎缩症小鼠)、肌萎缩症小鼠(dy)(dy)、无胸腺裸鼠(无胸腺裸鼠
5、(nunu)、肥胖症小鼠()、肥胖症小鼠(odod)、侏儒症小鼠)、侏儒症小鼠(dwdw)、等。)、等。 现在学习的是第6页,共68页 (3)(3)系统杂交动物系统杂交动物现在学习的是第7页,共68页 (4)(4)封闭群动物封闭群动物以非近亲交配方式繁殖生产的一个实以非近亲交配方式繁殖生产的一个实验动物种群,在不从外部引入新的血缘验动物种群,在不从外部引入新的血缘条件下,至少连续繁殖条件下,至少连续繁殖4 4代以上,称为一代以上,称为一个封闭群,又称为远交群。个封闭群,又称为远交群。 现在学习的是第8页,共68页特点:特点:繁殖量较大,适应性和抗病力较强,繁殖量较大,适应性和抗病力较强,群内的
6、基因频率能保持稳定。饲养成本也较群内的基因频率能保持稳定。饲养成本也较低。但个体的重复性和一致性没有近交系和低。但个体的重复性和一致性没有近交系和系统杂交动物好。系统杂交动物好。在目前的实验中,这类动物占了很大的比在目前的实验中,这类动物占了很大的比例,如例,如WistarWistar大鼠、大鼠、SDSD(Sprague-DaweySprague-Dawey)大鼠、瑞士种大鼠、瑞士种(Swiss)(Swiss)小鼠、昆明种(小鼠、昆明种(KMKM)小鼠、小鼠、NIHNIH小鼠、小鼠、LACALACA小鼠、小鼠、Dunkin Dunkin HarlegHarleg豚鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大
7、豚鼠、青紫兰家兔、新西兰家兔、大耳白家兔等都属于这类。耳白家兔等都属于这类。 现在学习的是第9页,共68页(1 1)无菌动物()无菌动物()是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。是指机体内外均无任何寄生物(微生物和寄生虫)的动物。此种动物在自然界中并不存此种动物在自然界中并不存在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后在,必须用人为的方法培育出来。其法:一般将临产前的健康动物用麻醉药品或颈椎臼法处死后,立即浸泡在,立即浸泡在37灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行剖腹,切灭菌液中,送进无菌室(或无菌隔离器),按无菌手术进行
8、剖腹,切除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中,切开除带胎子宫(子宫内首先应无菌),将其浸入消毒液里并输送到另一隔离器中,切开子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内人工喂乳或用子宫取胎,经用灭菌纱布揩拭仔体并断脐(电刀切断)后,放隔离器内人工喂乳或用其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代其它品系的无菌母鼠作保姆供养。小鼠和大鼠等用人工喂乳非常麻烦,故采用保姆代养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,禽类、养较为方便。而豚鼠因在一定程度上能自力饮乳,故人工哺乳较容易。另外,禽类、
9、鱼类、昆虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入无菌鱼类、昆虫类,因是在卵中无菌的前提下进行的,故用药物将卵周围灭菌后移入无菌隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。隔离器内使其孵化即可,而且,这些动物一般在在出生后能自力采食,故较易育成。又称为四级动物。又称为四级动物。 现在学习的是第10页,共68页(2)悉生动物)悉生动物是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。是指机体内带着已知微生物(动物或植物)的动物。此种动此种动物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如使物原是无菌动物,系人为的将指定微生物丛投给其体内,例如使
10、大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌定居在无菌小鼠体内,在进行微生物检查时,仅能检出大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般大肠杆菌。亦有人工投给二种以上的已知微生物。悉生动物一般分为单菌(分为单菌(Monoxenie)、双菌()、双菌(Dixenie)、三菌()、三菌(Trixenie),或),或多菌(多菌(Polyxenie)动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育)动物。此种动物同无菌动物一样是放在隔离器内饲育的,但因其带有已知的微生物,故隔离器内有微生物及其代谢产物的污的,但因其带有已知的微生物,故隔离器内有微生物及其代谢产物的污染。例
11、如,人工投给的微生物,除可在饮水中增殖外,还能在隔离器内染。例如,人工投给的微生物,除可在饮水中增殖外,还能在隔离器内放出大量的氨气。放出大量的氨气。 现在学习的是第11页,共68页(3 3)无特殊病原体动物()无特殊病原体动物()是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称是指机体内无特定的微生物和寄生虫存在的动物,简称SPF动物。动物。但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病但非特定的微生物和寄生虫是允许存在的,故其实际上就是指无传染病的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗,或用淘汰带菌动物来的健康动物。由于用疫苗和药物进行预防及治疗,或用淘汰带菌动物来作出作
12、出SPF动物的方法并不实用(既浪费时间,又难保确实除去病原)。故动物的方法并不实用(既浪费时间,又难保确实除去病原)。故一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(一般大多先培育出无菌动物或悉生动物后,再把其转移到有封闭系统(Barrier System)的设施中饲育繁殖。原则上)的设施中饲育繁殖。原则上SPF动物室内是不允许动物室内是不允许存在病原菌的,但在封闭系统环境中,难免有很多非病原性微生物会存在病原菌的,但在封闭系统环境中,难免有很多非病原性微生物会逐渐进入动物机体内,故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化。逐渐进入动物机体内,故亦有人把这个转移过程称之为通常动物化
13、。SPF动物的祖先是无菌动物,按理来说,无菌动物的子宫内和卵中应该是动物的祖先是无菌动物,按理来说,无菌动物的子宫内和卵中应该是无菌的,然而,有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的,因此,在作出无无菌的,然而,有些病毒实际上是通过亲代传给胎儿的,因此,在作出无菌动物和菌动物和SPF动物之前,必须充分考虑这个问题。动物之前,必须充分考虑这个问题。这是目前国际标准级这是目前国际标准级别的实验动物。别的实验动物。现在学习的是第12页,共68页4清洁普通动物,亦称最低限度疾病动物,或称清洁动物清洁普通动物,亦称最低限度疾病动物,或称清洁动物来自屏障系统的来自屏障系统的SPF动物,饲养在设有两条走廊的,温湿
14、度恒定动物,饲养在设有两条走廊的,温湿度恒定的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水的普通设施中的动物。垫料、饲料、用具等均应经过高压消毒。饮水pH为为2.52.8,鼠盒上带过滤帽,空气亦应经过一定的过滤,工作人员穿,鼠盒上带过滤帽,空气亦应经过一定的过滤,工作人员穿干净服装操作,此类动物的微生物控制标准基本与干净服装操作,此类动物的微生物控制标准基本与SPF相同,不同之处为相同,不同之处为血清病毒抗体检查(脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒血清病毒抗体检查(脑脊髓炎病毒、鼠肝炎病毒)经常可检出一)经常可检出一定滴度的抗体,但不允许出现临床症状和脏器的病理变化和自然死定滴度的抗体,但
15、不允许出现临床症状和脏器的病理变化和自然死亡。亡。5.普通动物普通动物是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生是未经积极的微生物学控制,普遍地饲养在开放卫生环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青环境里的动物。垫料和食物不经高压消毒,饮水为自来水,不喂青饲料。鼠应排除肺炎病毒,沙门氏菌和链球菌,地鼠不应有蛲虫。饲料。鼠应排除肺炎病毒,沙门氏菌和链球菌,地鼠不应有蛲虫。普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验。普遍动物只能供教养和一般性实验,不适用于研究实验。现在学习的是第13页,共68页三、常用实验动物介绍三、常用实验动物介绍 1 1、家兔、家兔 家兔属哺乳纲,
16、啮齿目,兔科。家兔的寿命为家兔属哺乳纲,啮齿目,兔科。家兔的寿命为4 49 9年,性成熟期为年,性成熟期为5 58 8个月。母兔孕期个月。母兔孕期3030天,每胎可产仔天,每胎可产仔1 15 5只。只。用家兔作实验动物有以下优点:一是来源较充足,易于饲用家兔作实验动物有以下优点:一是来源较充足,易于饲养,较耐寒冷,繁殖率高,价格较低。二是家兔性较温顺,便养,较耐寒冷,繁殖率高,价格较低。二是家兔性较温顺,便于捕捉、搬运、实验操作,平时也较为安静,一般没有叫声。于捕捉、搬运、实验操作,平时也较为安静,一般没有叫声。三是形体较大,可以直接记录血压、呼吸、心跳、体温等,而三是形体较大,可以直接记录血
17、压、呼吸、心跳、体温等,而且一次可采取较大量的血液且一次可采取较大量的血液( (约约10ml)10ml),也可采取脑脊液。,也可采取脑脊液。现在学习的是第14页,共68页(1 1)适应范围)适应范围1 1)发热:如家兔对各种致热原较为敏感,易发热,适宜于研究发)发热:如家兔对各种致热原较为敏感,易发热,适宜于研究发热机理、检查致热原和研究退热药药理之用。热机理、检查致热原和研究退热药药理之用。2 2)感染:家兔易感受多种细菌、病毒,所以适合于制作各种感染的)感染:家兔易感受多种细菌、病毒,所以适合于制作各种感染的动物模型。动物模型。3 3)心脏功能:家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间,
18、所以离)心脏功能:家兔的心脏在离体条件下能维持较长的搏动时间,所以离体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。体兔心可用于观察多种病因或药物对心脏病的直接作用。家兔的耳部血管清晰,可用于观察药物对血管的直接作用。家兔的耳部血管清晰,可用于观察药物对血管的直接作用。(2 2)不足之处)不足之处1 1)消化:家兔属食草动物,其消化系统与人的差别较大,不适宜用)消化:家兔属食草动物,其消化系统与人的差别较大,不适宜用作研究消化系统药物的药理。作研究消化系统药物的药理。2 2)呕吐、咳嗽:家兔缺乏呕吐和咳嗽反射,因而即使胃或肺部发生)呕吐、咳嗽:家兔缺乏呕吐和咳嗽反射,因而即使胃或肺部发生病变
19、,也无外在呕吐、咳嗽等表现。病变,也无外在呕吐、咳嗽等表现。 现在学习的是第15页,共68页(3 3)常见品种)常见品种1 1)青紫兰兔青紫兰兔,又名金基拉种家兔,原为法国培育的品种。毛色特点是全,又名金基拉种家兔,原为法国培育的品种。毛色特点是全身以银灰色为主,其毛多毛根灰色,中段白色,毛尖黑色,两耳一垂一竖身以银灰色为主,其毛多毛根灰色,中段白色,毛尖黑色,两耳一垂一竖,母兔颌下有肉髯。成年兔体重约,母兔颌下有肉髯。成年兔体重约2.52.55 5公斤,体质健壮,生长快,繁殖公斤,体质健壮,生长快,繁殖率强,抗病力强,多用于生物制品和药品鉴定的研究。率强,抗病力强,多用于生物制品和药品鉴定的
20、研究。2 2)大耳白兔大耳白兔,又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成,又名日本大耳兔。是在中国白兔基础上由日本选育而成的。其外观特点是全身毛纯白,红眼睛,两耳长大而竖起,头呈方形的。其外观特点是全身毛纯白,红眼睛,两耳长大而竖起,头呈方形,嘴稍钝,四肢粗壮,体型较长,毛浓密。成年兔体重约,嘴稍钝,四肢粗壮,体型较长,毛浓密。成年兔体重约4 46 6公斤,体公斤,体格健壮,繁殖率强,生长快,耳部皮薄,耳部血管清晰,因而在耳上作静脉格健壮,繁殖率强,生长快,耳部皮薄,耳部血管清晰,因而在耳上作静脉注射比较方便。但是抗病力较差。注射比较方便。但是抗病力较差。现在学习的是第16页,共68页
21、2 2、小鼠、小鼠小鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,是野生鼷鼠的变种,其较常见的是小鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,是野生鼷鼠的变种,其较常见的是小白鼠,全身白毛,但也有其它毛色者。小鼠寿命约小白鼠,全身白毛,但也有其它毛色者。小鼠寿命约2 2年,性成熟期年,性成熟期35355555天,孕期天,孕期20202525天,每胎生仔天,每胎生仔2 21212只,成年小鼠体重约为只,成年小鼠体重约为202030g30g。用小鼠作动物实验有以下的优点:一是来源方便,繁殖周期短,用小鼠作动物实验有以下的优点:一是来源方便,繁殖周期短,产仔多,生长速度快,饲料消耗少,生活条件容易控制,价格低。适产仔多,生长速度快,饲料
22、消耗少,生活条件容易控制,价格低。适合于需要大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物,具有较多合于需要大量动物的实验。二是小鼠较易培育成纯系动物,具有较多的近交系、突变系、的近交系、突变系、F1F1动物和封闭群等,便于科学研究之用。三是小动物和封闭群等,便于科学研究之用。三是小鼠较为温顺,易于捕捉和进行实验操作。鼠较为温顺,易于捕捉和进行实验操作。 现在学习的是第17页,共68页(1 1)适用范围)适用范围1 1)动物实验中用得最多的动物,可以制作多种疾病的动物模)动物实验中用得最多的动物,可以制作多种疾病的动物模型。型。2 2)药理、药效、毒理研究。)药理、药效、毒理研究。(2 2)不足之
23、处:)不足之处:1 1)对外界环境的适应能力差,如气温过高或过低,或过饥过)对外界环境的适应能力差,如气温过高或过低,或过饥过饱等,均会引起死亡,抗病力也较差。饱等,均会引起死亡,抗病力也较差。2 2)个体较小,每次取血量较少,也不适宜进行连续采血。)个体较小,每次取血量较少,也不适宜进行连续采血。3 3)在体实验较为困难。)在体实验较为困难。 现在学习的是第18页,共68页(3 3)品种)品种小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是但小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是但国际上最常用的近交系品种也只有国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。1 1)中国昆明()中国
24、昆明(KMKM)种:属封闭群动物,系在)种:属封闭群动物,系在19461946年从印年从印度引进到昆明,于度引进到昆明,于19521952年从昆明引进到北京生物制品研究所年从昆明引进到北京生物制品研究所,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。和药品的鉴定等方面。2 2)ICRICR小鼠:小鼠:3 3)LACALACA小鼠小鼠 现在学习的是第19页,共68页3.3.品种品种小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数
25、百种,是小鼠的品系较多,目前已培育的近交系有数百种,是但国际上最常用的近交系品种也只有但国际上最常用的近交系品种也只有7 71010种。种。(1 1)中国昆明()中国昆明(KMKM)种:属封闭群动物,系在)种:属封闭群动物,系在19461946年从印年从印度引进到昆明,于度引进到昆明,于19521952年从昆明引进到北京生物制品研究所年从昆明引进到北京生物制品研究所,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普,再推广到全国。抗病能力较强,容易饲养,繁殖率高。现普遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药遍用于药理、毒理、微生物学和病毒学的研究及生物制品和药品的鉴定等方面。
26、品的鉴定等方面。(2 2)ICRICR小鼠:小鼠:(3 3)LACALACA小鼠小鼠 现在学习的是第20页,共68页3 3、大鼠、大鼠大鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,大鼠属,是野生褐鼠的饲养变种。其大鼠属哺乳纲,啮齿目,鼠科,大鼠属,是野生褐鼠的饲养变种。其多数品种全身被白毛,即为大白鼠。其脚掌无毛,尾毛稀少。寿命为多数品种全身被白毛,即为大白鼠。其脚掌无毛,尾毛稀少。寿命为2 23 3年,性成熟期年,性成熟期2 23 3个月,孕期个月,孕期3030天,每胎可产仔天,每胎可产仔5 59 9只,成年大鼠体只,成年大鼠体重约重约150150250g250g。大鼠作动物实验有以下的优点:大鼠作动物实验有
27、以下的优点:1 1,来源较方便,抗病力强,繁殖率高,价格也较低,所以实验经费,来源较方便,抗病力强,繁殖率高,价格也较低,所以实验经费较少。较少。2 2,较适合用于要求动物同种或纯种、同性别,同年龄的一类实验,较适合用于要求动物同种或纯种、同性别,同年龄的一类实验。3 3,适用于需要大量动物,但小鼠又不能满足实验要求的实验,如,适用于需要大量动物,但小鼠又不能满足实验要求的实验,如实验要求较多的采血量,或需要进行在体实验者。实验要求较多的采血量,或需要进行在体实验者。 现在学习的是第21页,共68页(1 1)适用范围:)适用范围:1 1)大鼠的血压反应较好,适用于直接描记血压。)大鼠的血压反应
28、较好,适用于直接描记血压。2 2)大鼠的后肢可以作肢体血管灌流。)大鼠的后肢可以作肢体血管灌流。3 3)心脏可作离体心脏实验。)心脏可作离体心脏实验。4 4)大鼠无胆囊,所以可用大鼠胆管收集胆汁,进行肝胆的有)大鼠无胆囊,所以可用大鼠胆管收集胆汁,进行肝胆的有关实验。关实验。5 5)对营养缺乏较敏感,适合用于营养学的研究。)对营养缺乏较敏感,适合用于营养学的研究。(2 2)不足之处)不足之处1 1)大鼠性情不够温顺,特别是在受惊后会咬人,所以在实)大鼠性情不够温顺,特别是在受惊后会咬人,所以在实验操作时要小心,或要戴手套以防护。验操作时要小心,或要戴手套以防护。2 2)雄鼠之间每发生争斗、撕咬
29、。)雄鼠之间每发生争斗、撕咬。3 3)采血量也较为有限)采血量也较为有限( (约约4 45ml)5ml),有时不能满足检测的需,有时不能满足检测的需要。要。现在学习的是第22页,共68页(3 3)品种)品种大鼠的品种较多,国际上公认的近交系达大鼠的品种较多,国际上公认的近交系达130130余种。主余种。主要有以下几种:要有以下几种:1 1)WistarWistar品种品种: : 属封闭群动物,系从日本、苏联引进。性属封闭群动物,系从日本、苏联引进。性情较温顺,适应性强,应用较广泛,但因已有大量遗传变异情较温顺,适应性强,应用较广泛,但因已有大量遗传变异,现已逐步少用。,现已逐步少用。2 2)S
30、D(Sprague-Dawley)SD(Sprague-Dawley)品种品种: : 属封闭群动物,是由上一品属封闭群动物,是由上一品种培育而来,有纯种和近交系两种。其特点是体形较大,性种培育而来,有纯种和近交系两种。其特点是体形较大,性情温顺,发育优良,多用于营养学和内分泌系统实验和一般情温顺,发育优良,多用于营养学和内分泌系统实验和一般检定。检定。现在学习的是第23页,共68页4 4、豚鼠、豚鼠又名天竺鼠、荷兰猪、海猪,原产于南美洲,后引进又名天竺鼠、荷兰猪、海猪,原产于南美洲,后引进到欧洲,属哺乳纲、啮齿目、豚鼠科、豚鼠属。性情温顺到欧洲,属哺乳纲、啮齿目、豚鼠科、豚鼠属。性情温顺,胆小
31、,不咬人。其中又可分为短毛、长毛、刚毛三种,胆小,不咬人。其中又可分为短毛、长毛、刚毛三种,一般多用非纯种短毛豚鼠,毛色黄、黑、白相间,称为三一般多用非纯种短毛豚鼠,毛色黄、黑、白相间,称为三色豚鼠,也有两色和单色者。色豚鼠,也有两色和单色者。用豚鼠作动物实验有以下优点:繁殖较快,饲养方便,用豚鼠作动物实验有以下优点:繁殖较快,饲养方便,易进行同种、同性别、同年龄的一类实验。易进行同种、同性别、同年龄的一类实验。 现在学习的是第24页,共68页(1 1)适用范围)适用范围1 1)对结核、白喉、百日咳等细菌及螺旋体等病原微生物较为敏)对结核、白喉、百日咳等细菌及螺旋体等病原微生物较为敏感,反应也
32、较为一致,所以常用于这类疾病的研究。感,反应也较为一致,所以常用于这类疾病的研究。2 2)豚鼠对组织胺敏感,常用于平喘药和抗组织胺药的药理研究和)豚鼠对组织胺敏感,常用于平喘药和抗组织胺药的药理研究和免疫学方面的研究。免疫学方面的研究。3 3)豚鼠的血管反应敏感,可用于出血性疾病及血管通透性实验)豚鼠的血管反应敏感,可用于出血性疾病及血管通透性实验。4 4)豚鼠体内不能合成维生素)豚鼠体内不能合成维生素C C,对维生素,对维生素C C的缺乏很敏感,适合进行的缺乏很敏感,适合进行维生素维生素C C的实验研究。的实验研究。(2 2)不足之处)不足之处1 1)豚鼠的皮较厚,注射较困难。)豚鼠的皮较厚
33、,注射较困难。2 2)易患病,笼养易发生足底溃疡,胆小,对外界刺激极敏感。)易患病,笼养易发生足底溃疡,胆小,对外界刺激极敏感。现在学习的是第25页,共68页5 5、狗、狗(1 1)狗可通过训练与实验者配合,所以可在清醒及安静状态下)狗可通过训练与实验者配合,所以可在清醒及安静状态下进行胃瘘、肠瘘、膀胱瘘、胆囊瘘等观察。进行胃瘘、肠瘘、膀胱瘘、胆囊瘘等观察。(2 2)狗的血液循环和神经系统较发达,消化过程与人相似,所以)狗的血液循环和神经系统较发达,消化过程与人相似,所以常用于血液、循环、消化等系统和高级神经活动、外科手术、血管常用于血液、循环、消化等系统和高级神经活动、外科手术、血管移植等各
34、种实验。移植等各种实验。(3 3)毒理和药理研究。在新药研制中,进行亚急性和慢性毒性)毒理和药理研究。在新药研制中,进行亚急性和慢性毒性实验的两种动物中,就规定其中一种必须用狗。实验的两种动物中,就规定其中一种必须用狗。(4 4)动物的体形较大,易于进行在体实验和进行多种的测试。)动物的体形较大,易于进行在体实验和进行多种的测试。狗的品种虽多达数百种,其中实验专用犬并不多,国内狗的品种虽多达数百种,其中实验专用犬并不多,国内已引进了已引进了BeagleBeagle犬,培育成二级动物。一般实验多用普通家犬,犬,培育成二级动物。一般实验多用普通家犬,应注意检疫,保证健康无病。应注意检疫,保证健康无
35、病。 现在学习的是第26页,共68页现在学习的是第27页,共68页一、实验动物的抓取固定方法一、实验动物的抓取固定方法 (一)小鼠抓取固定方法(一)小鼠抓取固定方法小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实小鼠温顺,一般不会咬人,抓取时先用右手抓取鼠尾提起,置于鼠笼或实验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤验台向后拉,在其向前爬行时,用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和颈部皮肤,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可,将鼠体置于左手心中,把后肢拉直,以无名指按住鼠尾,小指按住后腿即可。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾,迅
36、速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈。有经验者直接用左手小指钩起鼠尾,迅速以拇指和食指、中指捏住其耳后颈背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和背部皮肤亦可。这种在手中固定方式,能进行实验动物的灌胃、皮下、肌肉和腹腔注射以及其他实验操作。如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,腹腔注射以及其他实验操作。如进行解剖、手术、心脏采血和尾静脉注射时,则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位则需将小鼠作一定形式的固定,解剖手术和心脏采血等均可使动物先取背卧位(必要时先行麻醉),再用大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。尾静脉注射(必要时先行麻醉),再用
37、大头针将鼠前后肢依次固定在腊板上。尾静脉注射时,可用小鼠尾静脉注射架固定,先根据动物大小选择好合适的固定架,并打时,可用小鼠尾静脉注射架固定,先根据动物大小选择好合适的固定架,并打开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适开鼠筒盖,手提鼠尾巴,让动物头对准鼠筒口并送入筒内,调节鼠筒长短合适后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。后,露出尾巴,固定筒盖即可进行尾静脉注射或尾静脉采血等操作。现在学习的是第28页,共68页现在学习的是第29页,共68页(二)大鼠的抓取固定方法(二)大鼠的抓取固定方法大鼠的抓取斯基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用
38、袭大鼠的抓取斯基本同小鼠,只不过大鼠比小鼠牙尖性猛,不易用袭击方式抓取,否则会被咬伤手指,抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套击方式抓取,否则会被咬伤手指,抓取时为避免咬伤,可带上帆布手套。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时,同样可采用左手固定法,。如果进行腹腔、肌肉皮下等注射和灌胃时,同样可采用左手固定法,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,只是用拇指和食指捏住鼠耳,余下三指紧捏鼠背皮肤,置于左掌心中,这样右手即可进行各种实验操作。也可伸开左手之虎口,敏捷地从后,这样右手即可进行各种实验操作。也可伸开左手之虎口,敏捷地从后,一把抓住。若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处
39、死,然后用细棉线绳一把抓住。若做手术或解剖等,则需事先麻醉或处死,然后用细棉线绳活缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上;尾静脉注射时的固定同小鼠(只需活缚腿,背卧位绑在大鼠固定板上;尾静脉注射时的固定同小鼠(只需将固定架改为大鼠固定盒即可)。将固定架改为大鼠固定盒即可)。现在学习的是第30页,共68页(三)兔的抓取固定方法(三)兔的抓取固定方法1抓取:抓取:实验家兔多数饲养在笼内,所以抓取较为方便,一般以实验家兔多数饲养在笼内,所以抓取较为方便,一般以右手抓住兔颈部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,让其体重重量右手抓住兔颈部的毛皮提起,然后左手托其臀部或腹部,让其体重重量的大部分集中在左手上,这样就
40、避免了抓取过程中的动物损伤。不能采的大部分集中在左手上,这样就避免了抓取过程中的动物损伤。不能采用抓双耳或抓提腹部。用抓双耳或抓提腹部。2固定:固定:一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒一般将家兔的固定分为盒式、台式和马蹄形三种。盒式固定,适用于兔耳采血、耳血管注射等情况;若做血压测量、呼式固定,适用于兔耳采血、耳血管注射等情况;若做血压测量、呼吸等实验和手术时,则需将兔固定在兔台上,四肢用粗棉绳活结绑吸等实验和手术时,则需将兔固定在兔台上,四肢用粗棉绳活结绑住,拉直四肢,将绳绑在兔台四周的固定木块上,头以固定夹固定住,拉直四肢,将绳绑在兔台四周的固定木块上,头以固定夹固定或用一根粗
41、棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上;马蹄形固定,多用于或用一根粗棉绳挑过兔门齿绑在兔台铁柱上;马蹄形固定,多用于腰背部,尤其是颅脑部位的实验,固定时先剪去两侧眼眶下部的毛腰背部,尤其是颅脑部位的实验,固定时先剪去两侧眼眶下部的毛皮,暴露颧骨突起,调节固定器两端钉形金属棒。使其正好嵌在突皮,暴露颧骨突起,调节固定器两端钉形金属棒。使其正好嵌在突起下方的凹处,然后在适当的高度固定金属榛。用马蹄形固定器可起下方的凹处,然后在适当的高度固定金属榛。用马蹄形固定器可使兔取用背卧位和腹卧位,所以是研究中常采用的固定方法。使兔取用背卧位和腹卧位,所以是研究中常采用的固定方法。现在学习的是第31页,共68页1、2、
42、3均为不正确的抓取方法(均为不正确的抓取方法(1可损伤两肾,可损伤两肾,2可造成皮下可造成皮下出血,出血,3可伤两耳),可伤两耳),4、5为正确的抓取方法。颈后部的皮为正确的抓取方法。颈后部的皮厚可以抓,并用手托兔体。厚可以抓,并用手托兔体。 现在学习的是第32页,共68页家兔盒式固定法家兔盒式固定法 家兔台式固定法家兔台式固定法 现在学习的是第33页,共68页动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要动物在实验前常常需要作适当的分组,那么就要将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好将其标记使各组加以区别。标记的方法很多,良好的标记方法应满足标号清晰、耐久、简便、适用的的标记方法应满足标号
43、清晰、耐久、简便、适用的要求。要求。常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号常用的标记法有染色、耳缘剪孔、烙印、号牌等方法。牌等方法。二、实验动物编号标记方法二、实验动物编号标记方法现在学习的是第34页,共68页(一)颜料涂染(一)颜料涂染这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。使用的颜料一般有这种标记方法在实验室最常使用,也很方便。使用的颜料一般有3-5%苦味酸溶(黄),苦味酸溶(黄),2%硝酸银(咖啡色)溶液和硝酸银(咖啡色)溶液和0.5%中性品红(红中性品红(红色)等。标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂色)等。标记时用毛笔或棉签蘸取上述溶液,在动物体的不同部位涂上斑点,以
44、示不同号码。编号的原则是:先左后右,从上到下。一般上斑点,以示不同号码。编号的原则是:先左后右,从上到下。一般把涂在左前腿上的计为把涂在左前腿上的计为1号,左侧腹部计为号,左侧腹部计为2号,左后腿为号,左后腿为3号,头顶部号,头顶部计为计为4号,腰背部为号,腰背部为5号,尾基部为号,尾基部为6号,右前腿为号,右前腿为7号,右侧腰部为号,右侧腰部为8号,右后腿计为号,右后腿计为9号。若动物编号超过号。若动物编号超过10或更大数字时,可使用上述或更大数字时,可使用上述两种不同颜色的溶液,即把一种颜色作为个倍数,另一种颜色作为两种不同颜色的溶液,即把一种颜色作为个倍数,另一种颜色作为十位数,这种交互
45、使用可编到十位数,这种交互使用可编到99号,假使把红的记为十位数,黄色号,假使把红的记为十位数,黄色记为个位数,那么右后腿黄斑,头顶红斑,则表示是记为个位数,那么右后腿黄斑,头顶红斑,则表示是49号鼠,其号鼠,其余类推。余类推。现在学习的是第35页,共68页现在学习的是第36页,共68页(二)烙印法二)烙印法用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑用刺数钳在动物耳上刺上号码,然后用棉签蘸着溶在酒精中的黑墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。墨在刺号上加以涂抹,烙印前最好对烙印部位预先用酒精消毒。(三)号牌法(三)号牌法用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物
46、可系于颈上。用金属制的牌号固定于实验动物的耳上,大动物可系于颈上。对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外对猴、狗、猫等大动物有时可不做特别标记,只记录它们的外表和毛色即可。表和毛色即可。现在学习的是第37页,共68页三、实验动物的给药途径和方法三、实验动物的给药途径和方法1 1、注射给药法、注射给药法(1 1)皮下注射皮下注射大鼠、小鼠和豚鼠可在肩胛间、腹部或腿内侧皮下注射;家兔可取大鼠、小鼠和豚鼠可在肩胛间、腹部或腿内侧皮下注射;家兔可取背部或耳根部皮下注射;狗、猫常在大腿外侧皮下注射;鸽、鹌鹑通常在翼下注背部或耳根部皮下注射;狗、猫常在大腿外侧皮下注射;鸽、鹌鹑通常在翼下注
47、射;射;蛙可在脊背部淋巴腔注射。蛙可在脊背部淋巴腔注射。 注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有注射时以左手拇指和食指提起皮肤,将连有5(1/2)号针头的注射器刺入皮下。)号针头的注射器刺入皮下。(2 2)皮内注射:皮内注射:皮内注射时需将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤皮内注射时需将注射的局部脱去被毛,消毒后,用左手拇指和食指按住皮肤并使之绷紧,在两指之间,用结核菌素注射器连并使之绷紧,在两指之间,用结核菌素注射器连4(1/2)细针头,紧贴皮肤表层刺入皮内,然细针头,紧贴皮肤表层刺入皮内,然后再向上挑起并再稍刺入,即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。后再向上挑
48、起并再稍刺入,即可注射药液,此时可见皮肤表面鼓起一白色小皮丘。 (3 3)肌肉注射肌肉注射大鼠、小鼠、豚鼠常在大腿内侧肌肉注射;家兔可在颈椎或腰椎旁的肌肉注射大鼠、小鼠、豚鼠常在大腿内侧肌肉注射;家兔可在颈椎或腰椎旁的肌肉注射;猫、狗等大动物常在臀部肌肉注射。;猫、狗等大动物常在臀部肌肉注射。 肌肉注射应选肌肉发达,无大血管通过的部位,一般多选臀部。注射时垂直肌肉注射应选肌肉发达,无大血管通过的部位,一般多选臀部。注射时垂直迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可进行注射。迅速刺入肌肉,回抽针栓如无回血,即可进行注射。现在学习的是第38页,共68页(4 4)腹腔注射腹腔注射:用大、小白鼠做实验时,
49、以左手抓住动物,使腹部向用大、小白鼠做实验时,以左手抓住动物,使腹部向上,右手将注射针头于左(或右)下腹部刺入皮下,使针头向前推上,右手将注射针头于左(或右)下腹部刺入皮下,使针头向前推0.51.0cm,再以,再以45度角穿过腹肌,固定针头,缓缓注入药液,为度角穿过腹肌,固定针头,缓缓注入药液,为避免伤及内脏,可使动物处于头低位,使内脏移向上腹。若实验动物避免伤及内脏,可使动物处于头低位,使内脏移向上腹。若实验动物为家兔,进针部位为下腹部的腹白线离开为家兔,进针部位为下腹部的腹白线离开1cm处。处。 现在学习的是第39页,共68页(5)静脉注射静脉注射:兔:兔:兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动
50、物,耳外缘为静脉。内缘静脉深不易兔耳部血管分布清晰。兔耳中央为动物,耳外缘为静脉。内缘静脉深不易固定,故不用。外缘静脉表浅易固定,常用。先拔去注射部位的被毛,用手指弹固定,故不用。外缘静脉表浅易固定,常用。先拔去注射部位的被毛,用手指弹动或轻揉兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的动或轻揉兔耳,使静脉充盈,左手食指和中指夹住静脉的近端,拇指绷紧静脉的远端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器连远端,无名指及小指垫在下面,右手持注射器连6号针头尽量从静脉的远端刺号针头尽量从静脉的远端刺入,移动拇指于针头上以固定针头,放开食指和中指,将药液注入,然后入,移动拇指于针头上以固定