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1、实 验 二,放线菌和霉菌的形态结构观察,目的要求,学习并掌握放线菌、霉菌形态结构的观察方法和制片方法。 观察放线菌、霉菌的菌落特征、个体形态及其繁殖方式。 观察霉菌个体形态及各种无性孢子及有性孢子的形态,放线菌的菌丝形态,链霉菌孢子丝形态,实验材料,(一)菌种 灰色链霉菌。 黄曲霉、黑根霉 。 (二)其他物品 0.1美蓝染液、乳酸石炭酸溶液、载片及盖片、显微镜、接种环、接种针、酒精灯、蒸馏水等。,实验内容(放线菌),(一)菌落形态的观察 观察放线菌菌落表面形状、大小、颜色、边缘,以及有无色素分泌到培养基内等; 并用接种环挑取菌落,注意菌丝在培养基上着生的紧密情况。 区别基内菌丝、气生菌丝及孢子
2、丝的着生部位。,实验内容,(二)个体形态特征的观察 观察放线菌菌丝和孢子丝自然生长的性状,其中包括气生菌丝(较粗),基内菌丝(较细)和孢子丝的形状。 注意放线菌菌丝直径的大小,孢子丝的形状。哪种菌的孢子丝呈螺旋状?,实验内容,(三)孢子形状的观察(印片染色法) 用盖片印片 载片上滴加0.1美蓝染液 盖片印片一面朝下盖在载片上 镜检 高倍镜(400)下观察灰色链霉菌和淡紫灰链霉菌的孢子及孢子丝。,实验内容,(四)插片法观察放线菌形态特征 插片染色法:28插片培养46d,轻轻取出盖玻片,载片上滴加0.1美蓝染液,盖片有菌一面朝下盖在载片上,镜检。 观察淡紫灰链霉菌基内菌丝、气生菌丝及孢子丝的卷曲状
3、况,及分生孢子的形状。,实验内容(霉菌),(一)霉菌菌落特征的观察 观察产黄青霉、黄曲霉、黑根霉平板中的菌落,描述其菌落特征。 注意菌落形态的大小,菌丝的高矮,生长密度,孢子颜色和菌落表面等状况。 将霉菌菌落与细菌、放线菌、酵母菌菌落进行比较。,实验内容,(二)制片观察 于洁净的载片中央,滴加一小滴乳酸石炭酸(水)溶液,然后用接种钩从菌落边缘挑取少许菌丝体置于其中,使其摊开,轻轻盖上盖片(注意勿出现气泡),置于低倍镜、中倍镜、高倍镜下观察。,实验内容,1产黄青霉 观察菌丝体的分枝状况,有无横隔。分生孢子梗及其分枝方式、小梗及分生孢子的形状。 利用平板插片法,可观察到较为清晰的分生孢子穗,帚状分
4、枝的层次状况及成串的分生孢子。,实验内容,2黄曲霉 观察菌丝体有无横隔、足细胞,注意分生孢子梗、顶囊、小梗及分生孢子着生状况及形状。,实验内容,3黑根霉 观察无隔菌丝、假根、匍匐枝、孢子囊梗、孢子囊及孢囊孢子。孢子囊破裂后能观察到囊托及囊轴。 观察黑根霉接合孢子。,图2-100为根霉属的接合孢子,实验报告内容(一)描述你所观察到的放线菌菌落特征。,(二)记录并绘制灰色链霉菌个体形态及生殖方式图,标明气生菌丝、孢子丝及孢子的形态。,(三)描述产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的菌落的颜色及特征,(四) 绘制产黄青霉、黄曲霉、黑根霉的个体形态及生殖方式图,思考题,列表总结放线菌与细菌菌落的差异。,实验二 结束,请交报告!,