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1、精品_精品资料_一、显微镜的使用光学系统:目镜、物镜、反光镜1. 结构机械系统:镜座、镜柱、镜臂、载物台、压片夹、遮光器、镜筒、粗(细)准焦螺旋.2. 使用方法:先在低倍镜下查找视野:取镜安放对光安放玻片调焦观看后用高倍镜观看:在低倍镜下找到目标移动装片,使目标位于视野中心转动转换器,使用高倍镜调剂细准焦螺旋,使物象清楚.调剂反光镜、通光孔,使视野变亮.3. 留意事项: 换上高倍镜后只能旋转细准焦螺旋,不能转动粗准焦螺旋,否就会压碎装片或损坏物镜.物镜越长,放大倍数越大,距载玻片的距离越近.反之放大倍数越小,距载玻片距离越远.目镜越长,放大倍数越小,反之放大倍数越大.放大倍数是指物像的长度或者
2、宽度.如视野一半亮一半暗,就可能是反光镜的角度不对.如观看切片标本材料一半清楚,一半模糊不清,就可能是切片薄厚不均.二、染色试验 、仍原糖的检测和观看1. 原理:糖类中的仍原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)与斐林试剂发生作用,产生砖红色沉淀.2. 材料:苹果(梨)匀浆、斐林试剂(甲液:质量浓度为0.1g/mol的 NaOH溶液,乙液:质量浓度为 0.05g/mol的 CuSO4 溶液)3. 步骤:取样液 2mL 于试管中加入刚配的斐林试剂1mL(甲、乙两液等量混合匀称后再加入)水浴加热( 50-65 ) 2min 左右观看颜色变化(白色浅蓝色砖红色)4. 留意事项:苹果或梨组织液必需暂时制备.由于苹
3、果多酚氧化酶含量高,组织液很易被氧化成褐色,将产生的颜色掩盖.斐林试剂现用现配.、脂肪的检测和观看1. 原理:脂肪可以被苏丹染成橘黄色(或被苏丹染成红色)2. 材料:花生种子匀浆(或切片)、苏丹(或苏丹)染液3. 步骤:制作切片(切片越薄越好)将最薄的花生切片放在载玻片中心染色:用毛笔蘸取切片放在载玻片上滴苏丹染液2 3 滴切片上染色 3min (苏丹染色 1min )滴体积分数 50%的酒精 1 2 滴洗去浮色用吸水纸吸去余外的酒精制作装片:滴 1 2 滴清水于材料切片上盖上盖玻片镜检鉴定:显微镜对光低倍镜观看高倍镜观看染成橘黄色的脂肪颗粒4. 留意事项:干种子要浸泡 34 小时,新花生的浸
4、泡时间可缩短.由于浸泡时间短,不易切片.浸泡时间过长,组织较软,切片不易成形.切片要尽可能薄些,便于观看.染色时间不宜过长.酒精用于洗去浮色,不洗去浮色,会影响对橘黄色脂肪滴的观看.同时,酒精是脂溶性溶剂, 可将花生细胞中的脂肪颗粒溶解成油滴(装片不宜久放).滴上清水可防止盖盖玻片时产愤怒泡.、蛋白质的检测和观看1. 原理:蛋白质与双缩脲试剂发生作用,产生紫色反应.2. 材料:新奇的肝脏组织研磨液(豆浆)、双缩脲试剂(A 液:质量浓度为 0.1g/mol的 NaOH溶液, B液:质量浓度为0.01g/mol的 CuSO4 溶液3. 步骤:试管中加样液2mL加双缩脲试剂 A 液 1mL,摇匀加双
5、缩尿试剂B 液 4 滴,摇匀观看颜色变化 紫色4. 留意事项: A 液和 B 液也要分开配制,储存.鉴定时先加A 液后加 B 液.用蛋清代替豆浆时,蛋清要先稀释.假如稀释不够,在试验中蛋清粘在试管壁,与双缩脲试剂反应后会粘固在试管内壁上,使反应不简单完全, 并且试管也不易洗洁净.、淀粉的检测和观看可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_1. 原理:淀粉遇碘变蓝.2. 材料:马铃薯匀浆、碘液.3. 步骤:向试管内注入2ml 待测组织样液向试管内滴加2 滴碘液,观看颜色变化(蓝色) .4. 留意事项:碘液不能添加的太多,否就会影响反应的颜色变化.、观看 DNA和 RNA在细胞中的分布1.
6、原理:甲基绿使DNA出现绿色,吡罗红使RNA出现红色.利用甲基绿、吡罗红混合染色剂将细胞染色,可以显示DNA和 RNA在细胞中的分布.盐酸能转变细胞膜的通透性,加速染色剂的跨膜运输.盐酸使染色体中的DNA与蛋白质分别,便于 DNA与染色剂的结合2. 材料:人的口腔上皮细胞、洋葱鳞片叶表皮细胞.3. 用具:大小烧杯、温度计、滴管、消毒牙签、载玻片、盖玻片、铁架台、石棉网、火柴、酒精灯、吸水纸、显微镜4. 试剂: 质量分数为 0.9%的 NaCl 溶液, 质量分数为 8%的盐酸, 吡罗红甲基绿染色剂 (取 A 液 20ml 、 B液 80ml 配成染色剂,使用时现配.A 液:取吡罗红甲基绿粉1g,
7、加入 100ml 蒸馏水中溶解,放入棕色瓶中备用. B 液:取乙酸钠(维护细胞原有形状) 16.4g ,用蒸馏水溶解至 1000ml .取乙酸 12ml,用蒸馏水稀释至1000ml.取稀释的乙酸钠溶液30ml 和乙酸 20ml ,加蒸馏水50ml,配成 PH为 4.8 的溶液)、蒸馏水.5. 步骤:取口腔上皮细胞制片:滴:在洁净的载玻片上滴一滴质量分数为0.9%的 NaCl烘:将涂有口腔上皮细胞的载玻片在酒精灯的火焰上烘干.水解: 解:将烘干的载玻片放入装有30ml 质量分数为 8%的盐酸的小烧杯中. 保:将小烧杯放入装有30温水的大烧杯中保温5冲洗涂片:用慢慢的蒸馏水冲洗载玻片10 秒钟.染
8、色: 吸:用吸水纸吸去载玻片上的水分. 染:用 2 滴吡罗红甲基绿混合染色剂滴在载玻片上,染色5 分钟. 吸:吸去余外染色剂.盖上盖玻片. 低:在低倍物镜下,查找染色匀称,色泽浅的区域,移至视野中心,将物像调剂清楚. 高:转到高倍物镜,调剂细准焦螺旋,观看细胞核和细胞质的染色情形.6. 留意事项:取口腔上皮细胞之前,应先漱口,以防止装片中显现太多的杂质.取洋葱表皮细胞时,尽量防止材料上带有叶肉组织细胞.冲洗载玻片时水的流速要尽量慢,切忌直接用水龙头冲洗.用酒精灯烘烤载玻片时,不要只集中于材料处,而应将载玻片在火焰上来回移动,使载玻片匀称受热,以免破裂.烘烤后的载玻片不要立刻放入盛有稀盐酸的烧杯
9、中,最好先自然冷却1 分钟.:用高倍镜观看叶绿体和线粒体1. 原理:叶肉细胞中的叶绿体,呈绿色、扁平的椭球形或球形,散布于细胞质中,可以在高倍显微镜下观看它的形状.健那绿染液是将活细胞中线粒体染色的专一染料可以使活细胞中的线粒体出现蓝绿色.通过染色,可以在高倍显微镜下观看处处于生活状态的线粒体的形状有短棒状、圆球状、线形、哑铃形等.2. 材料:新奇的藓类的叶、人的口腔上皮细胞.3. 试剂:新配制的质量分数为1%的健那绿染液(将0.5g健那绿溶解于50mL 生理盐水中 , 加温到 30-40摄氏度 , 使其充分溶解)4. 用具:显微镜、载玻片、盖玻片、滴管、镊子、消毒牙签.5. 步骤:观看叶绿体
10、:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_制作藓类叶片暂时装片:在洁净的载玻片中心滴一滴清水.用镊子取一片藓类的小叶,或者取菠菜叶稍带些叶肉的下表皮,放入水滴中,盖上盖玻片观看叶绿体:将制作好的叶片暂时装片放在低倍镜下观看,找到叶片细胞后,换用高倍显微镜,认真观看叶片细胞内叶绿体的形状和分布情形.观看线粒体:制作人的口腔上皮细胞暂时装片:在洁净的载玻片中心滴一滴健那绿染液.用消毒牙签在自己漱净的口腔内侧壁上轻轻的刮几下,把牙签上附有碎屑的一端,放在染液中涂抹几下,盖上盖玻片.观看线粒体:在高倍镜下观看经过染色的人的口腔上皮细胞的暂时装片,可以看到蓝绿色的线粒体,细胞质接近无色.6. 留
11、意事项:藓类叶为单层细胞,不需处理,选取菠菜作材料时,选取带少许叶肉细胞的下表皮, 由于下表皮的叶肉细胞时海绵组织,细胞排列疏松,分散易撕取.观看线粒体不选取植物细胞的缘由是经健那绿染色的线粒体与叶绿体颜色相近,会掩盖并影响对线粒体的观看.暂时装片应保持有水状态,以免影响细胞活性.取口腔上皮细胞前应漱口,防止杂质对观看物像的干扰.:观看根尖分身组织细胞的有丝分裂1. 原理:高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛.有丝分裂各个时期细胞内染色体的形状和行为变化不同,可用高倍显微镜依据各个时期内染色体的变化情形,识别该细胞处于那个时期.细胞核内的染色体易被碱性染料(如龙胆紫)染成深色.2. 材料:洋葱(可
12、用葱,蒜代替)、洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片3. 用具:显微镜,载玻片,盖玻片,玻璃皿,剪子,镊子,滴管.4. 试剂:质量分数为15%的盐酸,体积分数为95%的酒精,质量浓度为0.01g/ml或 0.02g/ml的龙胆紫溶液(将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成)或醋酸洋红液.5. 步骤:洋葱根尖的培育.装片的制作:解离漂洗染色制片 解离 :药液:质量分数为 15%的盐酸 , 体积分数为95%的酒精 1 : 1混合液 .时间: 35min.目的:使组织中的细胞相互分别开来.漂洗 :用清水漂洗约 10min.目的 :洗去药液 , 防止解离过度 , 并有利于染色.染色 :用质量浓度为 0
13、.01g / mL或 0.02g / mL的龙胆紫溶液 或醋酸洋红液 染色 3 5min目的:龙胆紫溶液或醋酸洋红溶液能使染色体着色.制片 :将根尖放在载玻片上 , 加一滴清水 , 并用镊子把根尖弄碎 , 盖上盖玻片 , 在盖玻片上再加一片载玻片 .然后用拇指轻轻的按压载玻片.目的:使细胞分散开来 , 有利于观看.洋葱根尖细胞有丝分裂的观看先在低倍镜下找到根尖分生区细胞:细胞呈正方形,排列紧密, 有的细胞正在分裂.换高倍镜下观看:分裂中期分裂前、后、末期分裂间期.(留意各时期细胞内染色体形状和分布的特点) .其中,处于分裂间期的细胞数目最多.三、提取和分别试验 :叶绿素的提取和分别1. 原理:绿叶中的色素能够溶解在有机溶剂无水乙醇中,所以用无水乙醇提取绿叶中的色素.绿叶中的色素不只一种,它们都能溶解在层析液中.它们在层析液中的溶解度不同.溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快.反之就慢.2. 材料:新奇的绿叶(菠菜叶)3. 用具:干燥的定性滤纸,试管,棉塞,试管架,研钵,玻璃漏斗,尼龙布,毛细吸管,剪刀,药勺,量筒( 10ml ),天平.4. 试剂: 无水乙醇, 层析液(由 20 份在 6090下分馏出来的石油醚、 2 份乙醇和 1 份苯混合而成.93号汽油也可代用),二氧化硅和碳酸钙.5. 步骤:可编辑资料 - - - 欢迎下载精品_精品资料_可编辑资料 - - - 欢迎下载