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1、免疫学检验教学大纲课程编码：课程名称：免疫学检验英文名称：Immunological detection technique开课学期：7 学时学分：40/2.5课程类型：专业课开课专业：预防医学专业选用教材：免疫学检验 人民卫生出版社 2006年8月第一版主要参考书：1. 免疫学检验 吕世静主编 人民卫生出版社 2003年2月第2版 2. 临床免疫学和免疫检验 王兰兰主编 2004年1月第3版 3. 简明免疫学技术 朱正美主编 科学出版社 2002年7月第1版 4. 免疫学常用实验技术柳忠辉主编 科学出版社执笔人：黎明兰一、 课程性质、目和任务免疫学检验是研究免疫学技术在医学领域中应用一门学科
2、，是预防医学专业（卫生检验方向）一门重要专业课。免疫学检测技术因其特异性强、敏感性高、稳定、简便和快速优势，现已广泛应用于生物学、临床医学、预防医学及其他有关领域。通过对该课程学习，掌握各类免疫学检验技术原理、类型、技术要点、实际应用及方法学评价，更好为防病治病服务。二、 教学基本要求三、 掌握免疫学检验常用技术原理、技术要点、应用及方法学评价。四、 掌握免疫学检验常用技术测定方法。五、 掌握免疫学技术在免疫预防计划免疫、动植物检疫、健康相关产品免疫功能评价中应用。六、 了解免疫学技术最新进展及和其他学科关系。七、 各章节内容及学时分配a) 抗原抗体纯化（2学时）教学目和要求掌握抗原和抗体纯化
3、方法基本原理、方法评价和应用。了解抗原抗体各种纯化方法程序及分离物选择。教学内容八、 盐析法九、 原理十、 常用中性盐十一、 操作步骤十二、 影响因素十三、 方法评价和应用十四、 凝胶层析法一、 原理二、 常用凝胶种类和性质三、 操作步骤四、 方法评价和应用十五、 离子交换层析一、 原理二、 常用离子交换剂种类和性质三、 离子交换层析程序四、 方法评价和应用十六、 亲和层析法十七、 原理十八、 亲和层析载体和配基选择十九、 层析条件选择二十、 方法评价和应用考核要求：了解 蛋白质提纯方法程序及条件掌握 蛋白质提纯方法原理 第二章 免疫原和特异性抗体制备（2学时）教学目及要求： 掌握人工免疫原制
4、备方法，免疫血清制备方法，杂交瘤技术原理及技术要点。了解可溶性抗原制备方法及单克隆抗体制备流程及应用。教学内容：第一节 免疫原制备一、 颗粒性抗原制备二、 可溶性抗原制备三、 人工免疫原制备及佐剂第二节 免疫血清制备二十一、 免疫动物选择二十二、 确定免疫方案二十三、 动物采血法二十四、 免疫血清分离和保存第三节 单克隆抗体制备二十五、 杂交瘤技术基本原理二十六、 单克隆抗体制备要求二十七、 单克隆抗体应用考核要求：了解：1.颗粒性抗原、可溶性抗原制备方法 2.单克隆抗体制备流程掌握：1.人工免疫原制备 2.免疫血清制备方法 第三章 沉淀反应和凝集反应（2学时）教学目及要求：掌握常用沉淀反应和
5、凝集反应原理及应用。了解其他凝集技术类型、原理和应用。教学内容：a) 沉淀反应二十八、 免疫浓度测定二十九、 双向琼脂扩散试验三十、 免疫电泳技术a) 凝集反应三十一、 直接凝集反应三十二、 间接凝集反应三十三、 其他凝集技术考核要求：了解：免疫浓度测定，其他凝集技术原理及应用。掌握：双向琼脂扩散试验、双 免疫电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳、间接血凝试验原理及应用。 第四章 溶血反应和补体结合试验教学目和要求：掌握溶血反应体系及检测方法。了解补体结合试验原理、类型、方法和评价。教学内容：a) 溶血反应b) 溶血反应检测试验c) 血清总补体溶血（CH50）测定。d) 补体结合试验一、 类型和原理二、
6、试验方法及影响因素三、 方法评价和应用考核要求：了解： 补体结合试验类型、原理、方法评价及应用。掌握：血清总补体溶血（CH50）测定。i. 酶免疫技术（2学时）教学目及要求：掌握固相酶免疫测定方法类型及原理，ELISA技术要点，了解其他酶免疫技术及应用。教学内容：三十四、 酶免疫技术分类三十五、 固相酶免疫测定三十六、 基本原理三十七、 方法类型和操作步骤三十八、 ELISA技术要点一、 试剂准备二、 酶标记方法三、 酶标记物纯化和鉴定四、 最适工作浓度选择三十九、 其他酶免疫技术一、 斑点-酶联免疫吸附试验二、 斑点酶免疫渗滤试验三、 免疫印记法考核要求：了解：其他酶免疫技术原理及应用掌握：
7、1.双抗体夹心法和间接法原理 2.ELISA法技术要点i. 荧光免疫技术（1学时）教学目及要求：掌握荧光抗体技术原理、技术方法及应用。了解荧光抗体制备方法及荧光免疫显微技术。教学内容：四十、 荧光现象四十一、 荧光抗体技术一、 基本原理二、 荧光抗体技术方法三、 荧光抗体制备四、 荧光免疫显微技术五、 应用考核要求：了解：荧光抗体制备及荧光免疫显微技术掌握：荧光抗体技术基本原理及技术方法。i. 放射免疫技术（1学时）教学目和要求： 掌握放射免疫测定原理、方法、评价及应用。了解免疫放射测定试验。教学内容：四十二、 放射免疫测定四十三、 原理四十四、 测定方法四十五、 方法评价四十六、 应用四十七
8、、 免疫放射测定四十八、 原理四十九、 技术类型五十、 技术要点考核要点：了解：免疫放射测定原理、技术类型及技术要点。掌握：放射免疫测定原理、测定方法及应用。i. 金免疫技术（2学时）教学目及要求：掌握金免疫测定技术原理、技术类型及应用。了解胶体金和免疫金特性和制备。了解金免疫组化技术方法。教学内容：五十一、 胶体金和免疫金制备五十二、 胶体金特性及其制备五十三、 免疫金特性及其制备五十四、 金免疫测定技术一、 斑点金免疫渗滤试验二、 斑点金免疫层析试验五十五、 金免疫组织化学技术五十六、 免疫金光镜染色技术五十七、 免疫金电镜染色技术考核要求：了解：1.胶体金、免疫金特性及制备方法。 2.免
9、疫金（银）光镜染色技术原理及方法。掌握：斑点金免疫渗滤试验和斑点金免疫层析试验原理、技术类型及方法。i. 免疫细胞检测技术（3学时）教学目和要求：掌握免疫细胞分离纯化技术及评价免疫功能相关试验原理、方法、结果判定。教学内容：第一节 免疫细胞分离和纯化b) 血液标本采集c) 外周血液中白细胞分离d) 外周血液中单个核细胞分离e) 淋巴细胞及其亚群分离纯化f) 吞噬细胞分离g) 淋巴细胞保存及活力测定。第二节 T淋巴细胞检测h) T淋巴细胞表面标志检测i) T淋巴细胞受体检测j) T淋巴细胞功能检测五十八、 B淋巴细胞检测a) B淋巴细胞表面抗原检测b) B淋巴细胞表面受体检测c) B淋巴细胞功能
10、体外检测五十九、 自然杀伤细胞检测a) 概述b) NK细胞活性检测c) 测定NK细胞活性卫生学意义六十、 吞噬细胞功能检测a) 巨噬细胞吞噬功能检测b) 巨噬细胞吞噬功能检测卫生学意义考核要求：了解：1.了解T淋巴细胞表面标志检测方法及卫生学意义评价。2.了解T淋巴细胞E受体和IL-2受体检测方法。3.了解B淋巴细胞Sm2g受体及Fc受体检测方法。掌握：1.外周血液中单个核细胞、淋巴细胞及亚群分离纯化方法，淋巴细胞保存及活力测定方法。 2.T淋巴细胞功能检测方法。 3.B淋巴细胞功能检测体外实验 。4. NK细胞活性检测方法及卫生学意义。六十一、 噬细胞功能检测方法及卫生学意义。i. 免疫球蛋
11、白测定（1学时）教学目及要求：掌握免疫球蛋白定量测定方法参考值及应用评价。了解免疫球蛋白定量医学意义。教学内容：b) 免疫球蛋白定量检测方法i. 常用检测方法。ii. 参考值c) 免疫球蛋白定量检测方法学评价及应用d) 免疫球蛋白定量临床意义i. 血清Ig定量临床意义。ii. 尿微量Ig定量临床意义。iii. 脑脊液Ig定量临床意义。考核要求：了解：血清Ig、尿微量Ig、脑脊液Ig定量检测临床意义。掌握：免疫球蛋白定量检测方法及参考值，方法评价及应用。 第十一章 动植物病原体免疫学检验（2学时）教学目和要求：掌握常见动植物疫病免疫学检测方法。了解进出口商品检疫新进展。教学内容：e) 动物病原体
12、免疫学检验f) 炭疽免疫学检验g) 鼻疽免疫学检验h) 口蹄疫免疫学检验i) 布鲁氏病免疫学检验j) 狂犬病免疫学检验k) 疯牛病免疫学检验l) 禽流感免疫学检验六十二、 植物病原体免疫学检验a) 植物细菌免疫学检验b) 植物真菌免疫学检验c) 植物病毒免疫学检验考核要求：了解：植物病原体免疫学检验方法。掌握：动物病原体免疫学检验方法。 第十二章 健康相关产品免疫学检验（2学时）教学目和要求：掌握保健食品免疫学检验方法和评价标准及化妆品免疫学检验方法。了解健康相关产品中有毒有害物质免疫学检验方法及新进展。教学内容：d) 有毒有害物质免疫学检验e) 有毒有害物质免疫学检验技术要点。f) 有毒有害
13、物质免疫学检测方法。g) 有毒有害物质免疫学检测方法应用。h) 化妆品免疫学检验i) 保健食品免疫学检验和评价六十三、 免疫学检验项目六十四、 免疫学检验方法六十五、 增强免疫功能结果判定和评价。考核要求：了解：有毒有害物质免疫学检验技术要点、方法和应用。掌握：保健食品免疫学检验项目、检验方法、结果判定及标价标准。 免疫学检验实验课教学大纲一、 实验目和任务免疫学检验实验课教学目是使学生掌握诸项试验原理、基本要求、操作步骤，正确分析实验结果、了解各种影响因素以及在卫生检验工作中应用。通过实验课教学，培养学生认真、严谨工作态度和实际动手操作能力，以适应检验工作需要。二、 实验教学基本要求1. 掌
14、握免疫学检验诸项试验原理2. 掌握诸试验各种液体配制方法3. 掌握必做实验操作步骤、结果判定及影响因素。4. 了解诸项试验所需仪器设备。三、 实验教材或指导书 免疫学检验实习指导 人民卫生出版社 2006年8月第一版五、 实验项目一览表序号实验项目内容提要实验类型学时分配主要仪器设 备实验地点备注1免疫球蛋白分离纯化盐析法血清中免疫球蛋白粗提综合性10一组（每学期选取3个实验项目）2免疫球蛋白分离纯化凝胶过滤层析法（分离不同分子量大小抗原）层析柱3双向琼脂扩散鉴定抗原和抗体纯度定性分析4聚丙烯酰胺凝胶电泳分离、鉴定血清中各类蛋白质电泳仪、圆盘电泳槽5酶联免疫吸附实验双抗体夹心法检验未知抗原酶标仪、微量加样器、酶标测定板6免疫金（银）染色实验免疫金标记抗体及检测抗原超速离心机、显微镜、温箱、分光光度计7保健食品免疫功能评价，包括：血清补体总活性测定（CH50法）ConA诱导小鼠脾淋巴细胞转化实验（MTT法）抗体生成细胞检测（溶血空斑法）小鼠腹腔巨噬细胞吞噬鸡红细胞实验（滴片法）测定血清总补体活性测定淋巴细胞增殖数量测定B细胞功能测定巨噬细胞功能综合性1096孔培养板（平底）、手术器械、CO2培养箱、酶标仪、721分光光度计、超净工作台、高压灭菌器、无菌滤器、恒温小浴箱、离心机、200目筛网、显微镜、计数器二组（每学期学生 自主选取1个实验项目）