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1、关于临床检验方法确认与性能验证第一页，讲稿共一百零二页哦临床检验方法确认与性能验证临床检验方法确认与性能验证o概念概念o目的目的o具体操作具体操作o其他其他第二页，讲稿共一百零二页哦一一.概念概念o确认（确认（validation）o验证（验证（verification）第三页，讲稿共一百零二页哦确认（确认（validation）o在实验室当前条件下，证实所得检验结果是否可以满足临床需要，能为患者提供可靠的的临床结果过程。本质上实际就是误差评价（error assessment），如果误差太大将会造成结果不正确的解释！o确认的手段应是是实际的或是模拟的！第四页，讲稿共一百零二页哦验证（验证（v
2、erification）o实验室按厂商说明的方法能否得到预期结果o验证的手段可以是下述活动，如：变换方法进行计算；将新设计规范与已证实的类似设计规范进行比较；进行试验和演示；发布文件前的评审。第五页，讲稿共一百零二页哦确认确认（validation） 通过提供客观证据对特定对特定的预期用途或应用要求的预期用途或应用要求已得到满足的认定。注：“已确认”一词用于表示相应的状态。确 认所使用的条件可以是实际的或是模拟的。验证验证（verification） 通过提供客观证据对规定规定要求要求已得到满足的认定注： “已验证”一词用于表示相应的状态。认定可包括下述活动，如：变换方法进行计算；将新设计规范
3、与已证实的类似设计规范进行比较；进行试验和演示；发布文件前的评审。第六页，讲稿共一百零二页哦ISO15189的概念的概念确认确认（validation） 通过提供客观证据对特定对特定的预期用途或应用要求的预期用途或应用要求已得到满足的认定。注：“已确认”一词用于表示相应的状态。确 认所使用的条件可以是实际的或是模拟的。验证验证（verification） 通过提供客观证据对规定规定要求要求已得到满足的认定注： “已验证”一词用于表示相应的状态。认定可包括下述活动，如：变换方法进行计算；将新设计规范与已证实的类似设计规范进行比较；进行试验和演示；发布文件前的评审。第七页，讲稿共一百零二页哦二二.
4、目的目的o结果互认结果互认o医院实验室管理办法医院实验室管理办法oCLIA88oCNAS-CL02第八页，讲稿共一百零二页哦第九页，讲稿共一百零二页哦第十页，讲稿共一百零二页哦第十一页，讲稿共一百零二页哦第十二页，讲稿共一百零二页哦第十三页，讲稿共一百零二页哦三.具体操作（一）统计学基础知识（二）检验方法分类（三）方法的选择（四）常用物质（五）一些基本术语（六）质量规范（七）具体操作第十四页，讲稿共一百零二页哦（一）统计学基础知识o概述o临床检验结果质量检验数据的分类o统计方法的分类o随机变量及其分布o正态分布o抽样分布o大数定律和中心极限定律o平均数与标准差o均数的抽样误差与t分布o两均数差
5、别的统计学意义检验o方差分析o直线回归与相关o观察值一致性第十五页，讲稿共一百零二页哦（二）检验方法分类（二）检验方法分类o决定性方法决定性方法（ definitive method ）： 经详尽研究尚未发现 不准确度不准确度或不确定性不确定性原因的方法； o参考方法（ reference method ）： 经详尽研究证实其不准确度与不 精密度可以忽略的方法； o常规方法常规方法（ routine method ）： 可满足临床或其他目的需要的日常使用的方法。 第十六页，讲稿共一百零二页哦（三）方法的选择（三）方法的选择o足够特异、灵敏、精密度好o校准可溯源o有实验证据（杂志、自）o与其他检
6、验项目相比有点何在 第十七页，讲稿共一百零二页哦（四）常用物质（四）常用物质o1.标准物质/参考物质（ reference material ） o2.校准品（ calibrator ） o3.质控物质控物/控制品控制品（ control material ）第十八页，讲稿共一百零二页哦1.标准物质o概念：又称参考物质（ reference material ），是一类充分均匀，并具有一个（或多个）确定的特性值的材料或物质，标准物质的定值结果一般表示为：标准值 总不确定度。 “ 标准物质证书“是介绍标准物质的技术文件，是研制单位向用户提出的质量保证书和使用说明。附有证书的标准物质称为有证标准物
7、质（ certified reference material, CRM ），其特性值由建立了溯源性的程序确定，可溯源至准确复现该特性值的计量单位，且每个标准值都附有给定置信水平的不确定度。 o作用：校准仪器设备、评价测量方法，或给其它物质赋值o分类：一级标准物质一级标准物质（ primary reference material ）：稳定、均一，采用高度准确、可靠的若干方法定值，可用于校准决定性方法及为二级标准物质定值。在我国，一级标准物质是测量准确度达到国内最高水平的有证标准物质，由国家技术监督局批准、颁布并授权生产。如： 人血清无机成分分析标准物质（ GBW09135 ）和血清胆固醇标准
8、物质（ GBW 09138 ）。二级标准物质二级标准物质（ secondary reference material ）：用一级标准物质校准，参考方法定值。如： 红细胞微粒标准物质 GBW （ E ） 090001 、胆红素标准物质 GBW （ E ） 090002 、氰化高铁血红蛋白溶液标准物质 GBW （ E ） 090004 和纯化血红蛋白标准物质 GBW （ E ） 090011 。 第十九页，讲稿共一百零二页哦2.校准品校准品第二十页，讲稿共一百零二页哦第二十一页，讲稿共一百零二页哦3.质控品质控品o概念：o分类：定值质控品 非定值质控品 检测系统配套的控制品检测系统配套的控制品 正
9、确度控制品正确度控制品第二十二页，讲稿共一百零二页哦质控品概念o具有与检测过程相适应的特性，其成份与检测样本的基质相同或相似。应使用充分均 一 和稳定的质控物， 其瓶间变异 必须小于监测系统预期的变异，其常规检测应有助于确认报告范围。第二十三页，讲稿共一百零二页哦定值质控品第二十四页，讲稿共一百零二页哦定值质控品第二十五页，讲稿共一百零二页哦o但是公司的定值是从保护自己利益出发的。它标示的预期范围只是想告诉用户，只要你的测定值在范围，说明它的控制品是好的。因此不要将预期范围认为是控制的允许范围！o不定值控制品质量和定值的一样，只是厂商没有邀请实验室为控制品定值，在说明书上除定值内容外，其余都有
10、，还告诉了用户高值或低值，当然更便宜！o但无论定值或不定值，用户在使用时，须使用自己的检测系统建立自己的均值但无论定值或不定值，用户在使用时，须使用自己的检测系统建立自己的均值和标准差！和标准差！只是定值控制品有一个预期的范围便于用户对照！但仅为对照，若两者相似不能说明用户结果准确，不相似也不说明结果有问题。o国内限于条件国产控制品很少，由经销商推出的国外控制品真正属于定值的也不多，定值控制品因为价格贵，用户不接受，但用户又要求是定值的控制品，因此不少经销商要求生产厂商提供一个公司自己检测的值，附在不定值控制品上，变成用户可接受的“定值”控制品！至于定值所用的检测系统，方法学原理、仪器、试剂盒
11、来源、操作程序都无可奉告！此时如果用户的靶值和“所为定值”相差甚远，我们应该可以理解，并不是控制品质量有问题造成的！ 第二十六页，讲稿共一百零二页哦o检测系统配套的控制品检测系统配套的控制品o为了使用户及时了解检测系统的质量状况，大的诊断产品厂商（国际上六大），除提供仪器、试剂、校准品外，还提供检测系统专用的控制品，必要时还为使用相同检测系统的用户提供相同批号的控制品，同时组织质量服务！此类控制品专用性强。如罗氏的正常与病理控制品Precinorm/Precipath，它的控制品定值完全按照校准品定值程序获得！而且定值一旦发现中间环节出错，还在网上为用户提供更新！o正确度控制品正确度控制品o为
12、了随时保证检测系统对病人样本的检测结果具有溯源性，此时引入了正确度控制品，ISO17511标准定义正确度控制品为：用于评估检测系统检测偏倚的参考物质。而且有专门的定值过程，该定制过程比校准品定值还要严格，与定值控制品的定值属于相同检测系统测定值的简单与定值控制品的定值属于相同检测系统测定值的简单统计处理一定要分开！统计处理一定要分开！第二十七页，讲稿共一百零二页哦（五）一些基本术语（五）一些基本术语o准确度o正确度o精密度o溯源性第二十八页，讲稿共一百零二页哦oa.准确度与误差准确度与误差o准确度（accuracy）的完整表达应是检测准确度（accuracy of measurement）：检
13、测结果与被测量真值或约定真值（可接受参照值）之间的一致程度（GB/T3358.1、GB/T6379）.o可接受参照值：用来做比较的经协商同意的值，它可以是理论值（真值），赋值，公认值或由程序确定的值。准确度不能直接得出，只能用偏离偏离（deviation）也就是误差从反面衡量o误差：测量值与真值之间的偏离，包括RE和SE。误差是用来度量不准确度的。o这样对于检测结果只做一次时，结果的偏离o即不准确度=分析过程的不正确度+分析过程的不精密度o也即不准确度=总误差=分析过程的随机误差+分析过程的系统误差ob.正确度与偏倚正确度与偏倚o正确度（trunees）即真实度，完整表达检测真实度：大量检测结
14、果得到的均值大量检测结果得到的均值与可接受参考值之间的一致程度（GB/T6379），用偏倚（bias）来表示,即测试结果的期望与真值（可接受参考值）之差。（GB/T6379）o系统误差系统误差：在可重复的条件下，大量检测结果的均值与真值之差o偏倚表示的是一种系统误差。oc.精密度和标准差精密度和标准差o精密度（precision），完整表达检测精密度：在规定条件下独立测试结果之间一致程度（GB/T6379）。用标准差或变异系数来表示。分为两种，“重复性（repeatability）”相同条件下执行连续测量结果之间的一致性程度，又称为序列内精密度和批内精密度。“再现性（reproducibili
15、ty）”在改变测量条件下执行测量结果之间的一致性程度。o随机误差随机误差（random error）：在可重复的条件下，对相同的被测量无数次检测结果的均值，与检测结果的差异。用标准差标准差和变异系数变异系数度量。od.总误差总误差o总误差（total error,TE）:能影响分析准确度的确定误差的组合【CLSI EP15-A2】,即偏倚和不精密度的和。o基于科学原理的理论或确定值o基于一些国家或组织的实验工作的指定值或认证值o基于科学或工程组织赞助下合作实验工作中的同意值或认证值。o以上三点不能获得时，则用可获得的期望，即规定测量总体的均值。第二十九页，讲稿共一百零二页哦溯源性 通过一条连续
16、的比较连，使通过一条连续的比较连，使FPS检测结果检测结果与国际或国家的参考系统（在参考实验室，与国际或国家的参考系统（在参考实验室，使用参考方法，参考品得到的结果）联系起使用参考方法，参考品得到的结果）联系起来的特性来的特性第三十页，讲稿共一百零二页哦（六）质量规范（六）质量规范o质量规范简史质量规范简史 1963年加拿大临床化学家David Tonks建议用参考区间的宽度1/4表示允许误差。 1968年临床化学家Roy Barnett博士提出标准差表示允许误差。 1976年CAP举办的分析目标讨论会议，Westgard提出了以“允许总误差”作为规定质量的最佳形式，一直沿用至今。第三十一页，
17、讲稿共一百零二页哦 1999年斯德哥尔摩协商大会汇集了临床检验领域的许多专家协商一致的“建立全球分析质量规范”，其结果提出了“质量规范（quality specifications）”的层次结构：o1.评价在特定情况下分析性能对临床结果的影响o2.评价在一般情况下分析性能对临床决策的影响o3.基于生物学变异的规范基于生物学变异的规范o4.基于临床医生观点的分析o5.已发表专业推荐n来自国家和国际的专家组n来自地方组织或某个国家o6.基于法规和EQA的质量规范n法规机构法规机构n能力验证（PT）和（或）室间质评计划（EQAS）组织者o7.基于当前分析技术的目标n有时间质量质量评价或能力验证计划数
18、据证实n由当前发表方法学性能文章第三十二页，讲稿共一百零二页哦3.基于生物学变异的规范。基于生物学变异的规范。第三十三页，讲稿共一百零二页哦用法用法oCVA1/2CVIoBA1/4（CVI2+CVG2）1/2oCV仪器之间仪器之间1/3CVIoTE1.65CVA+BA(0.05) TE2.33CVA+BA(0.01)o不精密度不精密度CV： 用于室内质控精密度分析用于室内质控精密度分析 用于方法学性能验证：用于方法学性能验证：1.与客观比较与客观比较 2.与厂家比较与厂家比较o偏差偏差Bias：用于方法学比较，即考核真实度。：用于方法学比较，即考核真实度。o允许总误差允许总误差Tea：用于：用
19、于EQA第三十四页，讲稿共一百零二页哦第三十五页，讲稿共一百零二页哦5.已发表专业推荐已发表专业推荐第三十六页，讲稿共一百零二页哦6.基于法规和基于法规和EQA的质量规范的质量规范第三十七页，讲稿共一百零二页哦第三十八页，讲稿共一百零二页哦（七）具体操作（七）具体操作o内容o常用的方案o具体方案第三十九页，讲稿共一百零二页哦方法确认方法确认o内容： 总是包括可报告范围、精密度、准确度和参考区间。某些研究还应包括检出限（或灵敏度）、特异度、干扰和回收以及校准品确认。CLIA规则规定对不同复杂程度分类的方法不同复杂程度分类的方法需要确认不同的特征需要确认不同的特征。对不太复杂的方法，要求很少的研究
20、。对于自建检测系统或实验室修改的方法需要更多的实验。第四十页，讲稿共一百零二页哦方法验证方法验证o除应验证仪器的安装和检验程序的操作外o对于定量方法 应验证：测量精密度：包括重复性和再现性、患者结果与以前方法或参考程序之间的一致性、在整个分析测量范围内被测量的回收、高浓度的携带污染、干扰或非特异性（溶血、脂血、黄疸、容器添加剂、药物）、参考区间。o对于定性方法 应验证阳性和阴性及临界值上和下标本的再现性和重复性、患者结果的一致性、携带污染、干扰或非特异性。第四十一页，讲稿共一百零二页哦常用的方案常用的方案1.相关机构：NCCLA/CLSI、CLIA2.具体方案o定量实验室方法的初步评价定量实验
21、室方法的初步评价: CLSI EP10o定性测试性能评估定性测试性能评估：CLSI EP12o基质效应的评价基质效应的评价：CLSI EP14o精密度和正确度性能的用户验证：精密度和正确度性能的用户验证：CLSI EP15-Ao使用使用ROC曲线实验室试验临床准确度评价曲线实验室试验临床准确度评价：CLSI GP10o总误差估计总误差估计 :CLSI EP21-A：临床实验方法总分析误差的估计o精密度评价精密度评价: EP5-A，临床化学设备精密性能的评价，临床化学设备精密性能的评价o准确度评价：准确度评价：方法比较试验EP9-A，使用病人样本进行方法比较和偏倚估计，使用病人样本进行方法比较和
22、偏倚估计 回收实验 干扰试验EP7-P，临床化学干扰试验，临床化学干扰试验o总误差估计总误差估计 :CLSI EP21-A：临床实验方法总分析误差的估计o患者结果可报告范围（即线性范围）的验证：患者结果可报告范围（即线性范围）的验证：EP6-A：定量分析方法线性的评价：定量分析方法线性的评价 o临床可报告范围的确立临床可报告范围的确立o参考范围参考范围 ：NCCLS/CLSI C28-A ：临床实验室如何定义和确定参照区间o交叉污染交叉污染:NCCLS/CLSI EP10-A o分析灵敏度分析灵敏度:CLSI EP17-A：检出限和定量下限确定方案o分析特异性分析特异性:NCCLA/CLSI
23、EP7-A: 临床化学干扰试验临床化学干扰试验 第四十二页，讲稿共一百零二页哦评价检验结果的准确度评价检验结果的准确度o除按ISO/IEC l7025对实验室质量体系评价外，在实际工作中我们常用以下几种方法来核验、评价检验结果的准确度。o用标准物质评价检验结果的准确度（t检验）o用标准方法评价分析结果的准确度o回收率试验第四十三页，讲稿共一百零二页哦Westgard确定不精密度的方法o考虑因素1.实验周期：20天以内2.样本基质3.检测材料数量和浓度水平：MDL4.检测样本个数：20次5.数据计算：CV/S6.可接受性能准则 Sw-run/Sw-day1/4TEa SI-run1/3TEa7.
24、厂家声明的验证8.推荐的最低程度研究9.基于未来的考虑第四十四页，讲稿共一百零二页哦厂家声明的验证厂家声明的验证 CLIA并没有严格地要求实验室确定性能的可接受性。更确切地，CLIA主张实验室应验证厂家精密度的声明。这可由F检验检验完成，如下：o1.从厂家声明材料（通常包括在仪器的文件中）中获得用于o重复性实验的预期标准差和测量个数，如基于31次测量的标o准差（s）为3mg/dl。o2.从你的重复实验获得的标准差和测量结果个数，如基于21o个测量的标准差为4mg/dl。o3.计算F值，较大s平方除较小s平方，即= 16/9 =o1.78。o4.查F值表，查分子自由度为20，分母自由度为30的临
25、界Fo值，其值为1.93。o5.在这一实例中，计算的F值小于临界F值，其表示实验室观o测的s与厂家声明的s之间没有真正的差异。o6.结论已验证厂家的声明。第四十五页，讲稿共一百零二页哦推荐的最低程度研究推荐的最低程度研究o选择至少2个不同浓度控制物代表了研究项目的低和高的医 学决定性浓度。每一个浓度在一批内或一天内对每一控制物 检测20个样本获得短期的不精密度估计值。计算每一控制物 的均值、标准差和变异系数。在进行更进一步实验之前确定 短期不精密度是否可接受。o在20个不同天对两个控制物的每一种分析1个样本，确定长 期的不精密度。计算每一材料的均值、标准差和变异系数。 确定长期不精密度是否可接
26、受。第四十六页，讲稿共一百零二页哦基于未来的考虑基于未来的考虑 采用更为详细的实验设计提供关于短期和长期变异量的信息。这些设计通常使用方差分析（analysis ofvariance , ANOVA)，如CLSI精密度方案所阐述精密度方案所阐述EP5方案预期用于厂家的精密度评价，而方案预期用于厂家的精密度评价，而EP15方案预方案预期用于临床实验室用户进行的评价。期用于临床实验室用户进行的评价。EP15明确指出在5天的时间内每天最少是采用3个重复测量，给出总的15个测量值。为了估计总的不精密度，计算提供确定批内和批间分量的方式，然后将其结合来提供总的不精密度。在EP15附录中描述了所需要的计算
27、，以及一组数据实例显示如何验证厂家的声明。给出的EP15允许允许仅只有仅只有5天的数据就可进行精密度验证，很有可能它将天的数据就可进行精密度验证，很有可能它将成为许多实验室采用的方案。成为许多实验室采用的方案。第四十七页，讲稿共一百零二页哦CLSI EP5-A2 定量方法精密度性能评价Evaluation of Precision Performance of Quantitative Methods; Approved GuidelineSecond Edition第四十八页，讲稿共一百零二页哦精密度的内容精密度的内容o批内精密度（重复性：repeatability）o批间精密度o日内精密度
28、o日间精密度o实验室内精密度（within-laboratory precision）第四十九页，讲稿共一百零二页哦实验方法实验方法o试剂和校准物：同一批号o样本：基质与临床样本相似，2个以上浓度 （参考医学决定水平）。o实验天数：20天以上o实验次数：每天2批，每批2个样本，每个 样本重复2次第五十页，讲稿共一百零二页哦Westgard确定偏倚的方法确定偏倚的方法o概述 由新方法（试验方法）和可比较方法同时分析患者样本的实验，基于两方法观测的差值估计系统误差。o考虑因素o1.可比较方法o2.患者标本数量o3.单次或双份测量o4.时间周期o5.标本稳定性o6.数据分析o7.图形显示数据o8.计
29、算适当的统计量o9.可接受性能标准o10.厂家声明的验证o11.推荐的最低程度的研究o12.未来的发展方向第五十一页，讲稿共一百零二页哦1.可比较方法可比较方法 “可比较方法” 并不意味方法已证明其正确性。大多数常规实验方法归为此类。必须仔细解释试验方法和常规方法之间的任何差异。如果差别很小，则两方法具有相同的相对的准确度。如果差别很大差别很大并医学上不可接受，则需要识别哪一方法是不准确的。可采用回收和干扰采用回收和干扰实验提供这一额外的信息。第五十二页，讲稿共一百零二页哦2.患者标本数量患者标本数量 两个方法检测最少40份不同的患者标本。选择的这些标本覆盖整个方法的标本覆盖整个方法的可报告范
30、围可报告范围及代表方法在常规应用预期疾病的浓度范围。检测标本的实际个数没有标本的质量重要。第五十三页，讲稿共一百零二页哦3.单次或双份测量单次或双份测量o双份测定o不同的批、或至少不同的顺序（而不是在同一样本杯中来回重复）不同的样本（或杯）第五十四页，讲稿共一百零二页哦4.时间周期o一般建议最少5天o每天检测2至5个患者标本第五十五页，讲稿共一百零二页哦5.标本稳定性o一般由试验和可比较方法在两个小时内对标本进行检测，除非标本有很短的稳定性第五十六页，讲稿共一百零二页哦6.数据分析o方式存在争论和讨论第五十七页，讲稿共一百零二页哦7.图形显示数据 差值图（difference plot） 比对
31、图” （comparison plot）第五十八页，讲稿共一百零二页哦8.计算适当的统计量计算适当的统计量o1.以比较方法测定值Xc为横坐标，试验方法测定值Yc为纵坐标，采用直线回归或最小二乘法拟合直线，建立回归方Yc=a+bXc，并由此计算在MDL时的时的SE，SE=Yc- Xco2.另一常计算的指标是相关系数r，主要用于评价数据范围是否足够宽评价数据范围是否足够宽以便提供斜率和截距更好的估计。而不是判断方法的可接受性。当r为0.99或更大时，简单的线性回归计算可提供斜率和截距可靠的估计。如果r小于0.99，最好是收集额外的数据扩大浓度范围。考虑到使用t-检验计算估计数据均值的检验计算估计数
32、据均值的系统误差，或使用更复杂的回归计算系统误差，或使用更复杂的回归计算适合于数据更窄的范围。o3.对于比对结果覆盖较窄的分析范围，如：钠或钙等，计算两方法平均值之间的差，也通常称为偏倚。这种计算的偏倚从统计程序可获得提供配对配对t-检验检验计算。例如，如果钠试验方法40个分析的均值是141.0mmol/L，相同样本比较方法的均值为138.5，则平均系统误差或偏倚是2.5mmol/L（141.0 138.5）。第五十九页，讲稿共一百零二页哦9.可接受性能标准o判断可接受性依赖于允许分析误差的大小，任何单个试验的总误差（TE）包括系统误差（SE）加随机误差（RE）。“总误差”计算公式如下：TEc
33、alc =SE+ RE TEcalc = Biasmeas+3Smeas S meas是重复性试验估计的方法标准差，Biasmeas是从回归方程Yc=a+bXc计算的Yc-Xc或从配对配对t-检验计算的平均差，当检验计算的平均差，当TEcalcTEa方法性能是可接受的o方法决定图第六十页，讲稿共一百零二页哦10.厂家声明的验证oCLIA并没有严格地要求实验室参照任何质量标准，甚至是其 能力验证可接受性能准则判断任何观测的偏倚或系统误差的可接受性。代之，CLIA强调验证厂家的准确度（或不准确度、偏倚，系统误差）声明。强调验证厂家的准确度（或不准确度、偏倚，系统误差）声明。如果厂家的声明没有偏倚，
34、t-检验统计量将揭示出实验室数据证实其声明是否符合。如果从配对t检验统计计算的t值小于临界t值，则没有显著性差异，或观测到没有真实的偏倚。如果厂家声明有限的偏倚，则有用的是确定你估计偏倚的置信区间确定你估计偏倚的置信区间，并将其与厂家的声明的偏倚进行比较。如果厂家的声明偏倚落在观测偏倚的上下置信限之内，则证实了声明；如果不在此区间内，则没有验证声明。第六十一页，讲稿共一百零二页哦第六十二页，讲稿共一百零二页哦11.推荐的最低程度的研究推荐的最低程度的研究 选择40份患者标本覆盖方法的整个可报告范围。由试验和比较方法在2小时内一天分析小时内一天分析8份标本份标本。很快地将结果绘制差值图并检查差异
35、；重新分析给出差异结果的标本消除离群值，识别潜在的干扰。如果没有观测到差异的结果，继续实验5天。如果在头5天观测到差异，继续另外的5天。绘制所有数据的比对图评价范围，离群值和线性。计算相关系数，如果r为0.99或更大，计算简单直线回归统计量及在医学决定浓度水平上估计系统误差。如果如果r= 0.95 范围适合 r2 0.95 扩大数据范围o线性回归：线性回归： 回归方程计算： 截距 a = - 9.05 斜率b = 1.17 Y = 1.17 X 9.05 均匀离散度的直观检查第七十六页，讲稿共一百零二页哦结果判读结果判读o预期偏倚及可信范围预期偏倚及可信范围 线性回归方程 计算偏倚（高、中、低
36、3组）o解释实验结果并与内部标准比较解释实验结果并与内部标准比较第七十七页，讲稿共一百零二页哦 CLSI EP15-Ao精密度和正确度性能的用户验证：精密度和正确度性能的用户验证：User Verification of Performance forPrecision and Trueness）第七十八页，讲稿共一百零二页哦主要的主要的3种方案：种方案：o1.精密度基于5天，每天分析3份重复控制样本；o2.真实度基于分析20份患者标本；o3.真实度基于分析至少2份具有指定值的参考物质。第七十九页，讲稿共一百零二页哦EP15 精密度方案 规定熟悉时期学习分析系统的适当操作，包括校准、维护程序和
37、监测程序（质量控制）。使用厂家推荐的质量控制程序质量控制程序监测在EP15检测方案期的性能。选择的控制物应具有的浓度水平接近医学决定性点。用于声明验证的控制物应选择接近选择接近于医学决定点的浓度及接近于厂家进行其精密度声明试验所具有的浓度于医学决定点的浓度及接近于厂家进行其精密度声明试验所具有的浓度。如果可能，它们应该与建立厂家声明使用相同的材料，或非常类似的材料（类似的基质类似的基质）。第八十页，讲稿共一百零二页哦实验方案实验方案o1五天，每日一分析批，每日两个浓度水平，每一水平上同一样本三次重复测定。o2如果因为质量控制程序或操作困难判断一批为 失控，剔除数据，并执行额外的批。o3包括正常
38、地使用每日质量控制样本。o4真实度试验样本可在同一批内进行检测。o5操作者按照厂家说明书规定进行校准。如果厂家指出在其声明它的精密度数据是在多个校准周期下产生的，则操作者在实验期间选择重新校准。第八十一页，讲稿共一百零二页哦统计量的计算第八十二页，讲稿共一百零二页哦建立建立EXCEL表格表格第八十三页，讲稿共一百零二页哦用用EXCEL表格计算表格计算T值值第八十四页，讲稿共一百零二页哦精密度声明的验证精密度声明的验证第八十五页，讲稿共一百零二页哦EP15使用患者样本的真实度方案 推荐采用如下的实验方案：推荐采用如下的实验方案：o1检测20份患者样本，其浓度水平覆盖方法的可报告范围。o2在实验室
39、以常规操作方式检测新鲜患者样本。o3在3到4天时间内，每天由试验和可比较方法在4小时内测量5至7份样本。o4评价质量控制确保稳定的操作条件和有效的试验结果。o5检查比较数据识别任何差异的结果。o6计算配对结果之间的差值，并绘制差值与比较值之间的差值图提供数据的图形显示。o7将数据进行配对t-检验计算确定方法之间的平均差值（偏倚），以及差值的标准差；o8计算置信区间和（或）验证限，将观测的偏倚与厂家的声明进行比较。第八十六页，讲稿共一百零二页哦建立建立EXCEL表格表格第八十七页，讲稿共一百零二页哦计算偏倚的置信区间第八十八页，讲稿共一百零二页哦EP15使用参考物质的真实度方案使用参考物质的真实
40、度方案 推荐的物质包括：o1从美国国家标准和技术研究院（NIST）可获得某些分析物的有证参考物质（CRM）。o2能力验证计划中具有指定值的参考物质。o3厂家具有指定值的物质。o4室间质量评价(EQA)计划中的物质。o5由几家实验室分析具有指定值来自第三方销售商的物质。o6制备的已知浓度的标准物质。第八十九页，讲稿共一百零二页哦EP15使用参考物质的真实度方案使用参考物质的真实度方案 EP15推荐至少选择2个物质代表方法可报告范围中高和低的决定性浓度。应根据厂家说明书制备物质，在3到5天时间内每批进行2次重复，然后计算均值和标准差，以及置信区间帮助指定值的验证。第九十页，讲稿共一百零二页哦建立建
41、立EXCEL表格表格o计算的计算的95%置信区间为置信区间为36.738.7mg/dl，其并没有包括指定值，其并没有包括指定值40.0mg/dl，因，因此由这些实验数据不能证实真实度。此由这些实验数据不能证实真实度。第九十一页，讲稿共一百零二页哦评价方法可接受性评价方法可接受性第九十二页，讲稿共一百零二页哦允许不精密度制定允许不精密度制定o根据我国各实验室室内变异系数水平确定。o根据室间质量评价允许总误差（TEa)确定允许的CV%: 1/4TEa, 1/5TEa, 1/6TEao 根据生物学变异确定允许的CV%:第九十三页，讲稿共一百零二页哦四四.其他其他o同一检验项目在不同检测系统上可比性的
42、验同一检验项目在不同检测系统上可比性的验证证o用用ROCROC曲线进行方法的临床评价曲线进行方法的临床评价第九十四页，讲稿共一百零二页哦同一检验项目在不同检测系统上可比性的验证同一检验项目在不同检测系统上可比性的验证 采用极差检验方案采用极差检验方案 以实验室需要评价两台分析仪器AST测量的可比性为例o1.长期长期IQC（至少（至少6个月）得出两个质控物各自的总均和合成个月）得出两个质控物各自的总均和合成CV。o如果两台分析仪器各自的如果两台分析仪器各自的CV的比值小于的比值小于2，就可使用极差检验方案。，就可使用极差检验方案。第九十五页，讲稿共一百零二页哦2.样本选择二个质控物总均样本选择二
43、个质控物总均 20% o本例选择40.95 20% ， 210.32 20% ， 范围内的样本各一个。o假设选择在比对仪器分析仪A上测得的37.8 (样本#1) 和245.1 U/L (样本#2)的两个样本。第九十六页，讲稿共一百零二页哦3.确定允许差值或临界差值：确定允许差值或临界差值：1/3CVIo计算允许差值或临界差值大约为1/3个体内生物学变异，即11.9%/3=3.97%。第九十七页，讲稿共一百零二页哦4.查极差检验的临界差值表确定重复次数查极差检验的临界差值表确定重复次数o依据比对个数确定重复次数大概所在的行o依据合成CV确定临界差值在表中所在的列o具体确定重复次数o例如：对于样本#1（混合CV=1.50%）和样本#2(混合CV = 1.95%)，可以确定临界差值表中的行和列相当于具有1.0%和2.0%混合分析CV两方法比对的位置。 选择的临界差值为3.97%处于重复3次表格临界差值之间（2.266968% 3.97% 4.533936%），表明检测两个样本三次重复比对将提供检出两分析仪器之间差异80%的功效。第九十八页，讲稿共一百零二页哦第九十九页，讲稿共一百零二页哦第一百页，讲稿共一百零二页哦5.具体操作：建立具体操作：建立EXCEL表格表格第一百零一页，讲稿共一百零二页哦感谢大家观看第一百零二页，讲稿共一百零二页哦