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1、-名词解释1.操纵子（operon）：是真核生物基因的一个基本转录单位，由编码序列及上游的调控序列组成。编码序列通常包括几个功能相关的结构基因，调控序列由启动序列（启动子），操纵序列（操纵基因）及其他调节序列构成。2.顺式作用元件（cis-acting element）：是真核基因表达是调控转录过程的特殊DNA序列，以转录因子结合而起作用，通常包括启动子，增强子，沉默子等。3.反式作用因子（trans-acting factor）：与其他基因的顺式作用元件结合，调节基因转录活性的蛋白质因子，根据其功能不同可分为基本转录因子和特异性转录因子。4.启动子（promoter）：位于结构基因上游，与R
2、NA聚合酶识别，结合的特异DNA序列，与基因转录起始有关。5.增强子（enhancer）：指决定基因的时间，空间特异性表达，增强启动子的转录活性的特殊DNA序列，作用特点是无方向性，位置或距离不固定。6.沉默子（silencer）：某些基因含有负性调节原件，当其结合特异蛋白因子时，对基因转录起阻遏作用。7.基因表达调控（regulation of gene expression）：指细胞或生物体在接受环境信号刺激时或适应环境变化的过程中在基因表达水平上做出应答的分子机制。8.基因重组（gene recombination）：DNA片段在细胞内、细胞间、甚至是在不同物种之间进行交换，重组后具有复
3、制和表达功能。9.基因工程：按照人为预愿获得目的基因，与载体拼接形成重组体，重组体转入宿主细胞，筛选和鉴定出含阳性重组体宿主细胞，经大量增殖，最总获得该目的基因决定的大量表达产物的过程。10.同源重组（homologous recombination）：发生在同源序列间的重组，它通过链的断裂和再连接，在两个DNA分子同源序列间进行单链或双链片段的交换，又称基因重组。11.DNA克隆：在体内对DNA分子按照既定目的和方案进行人工重组，将重组分子导入适当细胞内，使其在细胞内扩增和繁殖，从而获得该DNA分子大量拷贝的过程，又叫基因克隆或重组DNA技术。12.限制性核酸内切酶（restriction
4、endonuclease）：识别DNA的特异序列，并在识别位点或其周围切割双链DNA的一类内切酶。作用是与相伴存在的甲基化酶共同构成细菌的限制-修饰体系，限制外源DNA，保护自身DNA。13.载体（vector）：“携带”外源DNA、实现外源DNA的无性繁殖或表达有意义的蛋白所采用的一些DNA分子，又称基因载体或称克隆载体。常用的载体有：质粒DNA、噬菌体DNA和病毒DNA。14.质粒（plasmid）：独立存在于细菌染色体外，能自我复制的闭合环状DNA分子。15基因组DNA文库：将某一基因组DNA用适当的限制酶切断后，与载体DNA重组，再全部转化宿主细胞，存在于转化细胞内由克隆载体所携带的所
5、有基因组DNA的集合，又称G-文库。16.cDNA文库：以某种细胞全部mRNA为模板，利用逆转录酶合成与mRNA互补的cDNA，再复制成双链cDNA，与适当的载体连接后转化入受体，得到含全部表达基因的种群，称为c文库。17.信号转导（signal transduction）：细胞针对外源信息所发生的细胞内生物化学变化及效应的全过程。18.受体（receptor）：细胞膜上或细胞内能识别外源化学信号并与之结合的成分，其化学本质是蛋白质，个别糖脂也具有受体作用。19.鸟苷酸结合蛋白（G protein）：简称G蛋白，指具有结合GDP失活，结合GTP激活两种互变形式和固有GTP酶活性，在细胞信号通路
6、中起信号转换器或分子开关作用的一组蛋白质。主要指与细胞表面7跨膜受体结合的异源三聚体GTP-结合蛋白和一类低分子量单体G蛋白。20.七跨膜受体（GPCR）：又称G蛋白偶联型受体，是一类重要的细胞表面受体，具有7个跨膜-螺旋，并直接与异源三聚体G蛋白偶联结合，依靠活化G蛋白转导细胞外信号。21.原癌基因（proto-oncogenes）：又称细胞癌基因（cellular oncogene，c-onc），是指存在于细胞基因组中，正常情况下处于静止或低水平表达状态，对维持细胞正常功能具有重要作用，当收到致癌因素作用被活化而导致细胞癌变的基因。22.病毒癌基因（virus oncogene，v-onc
7、）：是一类存在于肿瘤病毒（大多数是逆转录病毒）中的，能使靶细胞发生恶性转化的基因。23.抑癌基因：抑制细胞生长和增殖，促进细胞分化、成熟和凋亡的一类基因，由于具有抑制细胞癌变的特性，故称抑癌基因。24.p53基因：是一个重要的抑癌基因，因其表达产物p53蛋白的分子量为53KD而得名，p53蛋白能抑制细胞增殖，参与DNA损伤的修复，促进癌变倾向的细胞凋亡。25.生长因子（growth factor）：指存在于血清中，通过质膜上特异的受体，将信息传递至细胞内部，调节细胞生长与增殖的多肽类物质。26.核酸分子杂交：在DNA复制过程中，如果把不同DNA单链分子放在同一溶液中，或把DNA与RNA放在一起
8、，只要在DNA或RNA的单链分子之间有一定的碱基配对关系，就可以在不同的分子之间形成杂化双链。27.探针（probe）：带有特殊可检测标记的核酸片段，具有特定序列，能够与待测的核酸片段互补结合，用于检测核酸样品中存在的特定基因。28.PCR（聚合酶链反应）:利用耐热DNA聚合酶的反复作用，通过高温变性低温退火适温延伸的循环操作，在体外迅速将DNA模板扩增数百万倍的一种操作技术。29.基因芯片（gene chip）：将许多特定的DNA片段或cDNA片段作为探针，有规律地紧密排列固定于单位面积的支持物上，然后与标记的样品杂交，通过对杂交信号的监测分析，即可得出样品遗传物质。30.转基因技术：采用基
9、因转移技术使目的基因整合入受精卵细胞或胚胎干细胞，然后将细胞导入动物子宫，使之发育成个体。31.基因诊断：利用分子生物学和分子遗传的技术和原理，在DNA水平分析、鉴定遗传疾病所涉及基因的置换、缺失或插入等突变。32.基因治疗:向有功能缺陷的细胞补充相应功能的基因，以纠正或补偿其基因的缺陷，从而达到治疗的目的。33.RT-PCR（逆转录PCR技术）：首先以mRNA为模板，在逆转录酶的作用下合成cDNA，再以cDNA为模板通过PCR反应来扩增目的基因。34.Klenow片段：是原核生物DNA-pol经特异的蛋白酶水解后产生的大片段，具有53核酸外切酶活性和聚合活性。35.小干扰RNA（siRNA）
10、：是一类双链RNA在特定情况下通过一定酶切机制，转变为具有特定长度和特定序列的小片段RNA。双链siRNA与特异的靶mRNA完全互补结合，导致靶mRNA降解，阻断翻译过程。36.单顺反子（monocistron）：真核基因的一个编码基因转录只生成一种mRNA分子、经翻译生成一种多肽链。老师补充的重点1.试述乳糖操纵子的调控机制答：（1）、乳糖操纵子的组成：大肠杆菌乳糖操纵子含Z、Y、A三个结构基因，分别编码半乳糖苷酶、透酶和半乳糖苷乙酰转移酶，此外还有一个操纵序列O，一个启动子P和上游的分解代谢物基因激活蛋白（CAP）结合位点，构成乳糖操纵子的调控区。在操纵子的上游还有一个调节基因i，编码一种
11、阻遏蛋白，后者可与O序列结合而使操纵子处于关闭状态。（2）、乳糖操纵子的负性调节：当细菌以葡萄糖为能源是，I基因编码一种阻遏蛋白，与O序结合，阻碍RNA就与P序列结合和向结构基因移动，而抑制结构基因的转录。（3）、乳糖操纵子的正性调节：当细菌只能以乳糖为碳源时，乳糖转变为半乳糖，后者与阻遏蛋白结合，使其构象变化而不能结合O序列，从而诱导转录过程。同时，细胞内的cAMP的含量升高，cAMP与CAP结合，使CAP结合到CAP位点上，促进转录过程。2.良好的载体应具备的条件：具有复制起始位点，有良好的自我复制能力；有可检测的遗传标记；具有多个限制性核酸内切酶单一酶切位点；分子量要尽可能小；具有生物安
12、全性。3.蓝白斑实验（互补）：LacZ基因编码-半乳糖苷酶N端的片段，突变型细菌可表达-半乳糖苷酶C端的片段，单独存在的片段和片段无-半乳糖苷酶活性，只有宿主细胞和克隆载体同时表达两个片段时，宿主细胞内才有-半乳糖苷酶活性，使含X-gal特异性作用物变为蓝色化合物。若插入在LacZ基因上，就无片段，就使含X-gal特异性作用物培养基上出现白色菌落。4.PCR反应体系的基本成分：模板DNA、特异引物、耐热性DNA聚合酶、4种dNTP、含有Mg2+的缓冲液和buffer。5.PCR的特点：高敏感、高特异、高产率。6.PCR的基本原理:体细胞分裂中,DNA半保留复制的原理;体外DNA分子在不同温度下
13、，双链和单链相互转换;4种dNTP存在时，耐热DNA聚合酶沿引物端延伸生成新的DNA链。7.几种重要的PCR衍生技术：逆转录PCR（RT-PCR）、原位PCR、实时PCR（定量PCR）。8.写出下列代号的中文名称：VNTR：可变串联重复多态性RFLP：DNA限制性片段长度多态性SNP：单核苷酸多态性9.限制性核酸内切酶的特点：识别序列与切割序列一致；识别序列一般由46个碱基构成，最多8个；识别序列为回文结构（反向重复）。10.目的基因与载体的连接方式有粘性末端连接、平端连接、同聚物加尾连接和人工接头连接。11.获取目的基因的途径化学合成、基因组DNA文库、cDNA文库和酶链聚合反应。12.分子克隆技术常用的工具酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、E.Coli DNA pol、末端转移酶、逆转录酶、碱性磷酸酶、核酸外切酶七类。13.癌基因活化的机制包括获得启动子及增强子、基因易位、原癌基因扩增和点突变等。14.限制性核酸内切酶是由细菌产生的一类识别双链DNA中的特定碱基序列，并在识别位点或其周围切割磷酸二酯键的核酸内切酶。15. 目前了解最多的两个抑癌基因是Rb基因和p53基因。-第 5 页-