RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤(2页).doc

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-RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤-第 2 页RNA的琼脂糖凝胶电泳实验原理和步骤一、实验目的掌握植物总RNA非变性胶电泳的原理和方法。二、实验原理RNA电泳可以在变性及非变性两种条件下进行。非变性电泳使用1.0%-1.4%的凝胶,不同的RNA条带也能分开,但无法判断其分子量。只有在完全变 性的条件下,RNA的泳动率才与分子量的对数呈线性关系。因此要测定RNA分子量时,一定要用变性凝胶。在需快速检测所提总RNA样品完整性时,配制普通 的1%琼脂糖凝胶即可。三、实验材料、器具及药品蘑菇的总RNA溶液。 电泳仪,电泳槽,电子天平,移液器,枪头,微波炉,紫外透射检测仪等。 琼脂糖,1XTAE电泳缓冲液,0.5g/ml溴化乙锭(EB)10X载样缓冲液。四、实验步骤(1)用1TAE电泳缓冲液制作琼脂糖凝胶,加1TAE电泳缓冲液至液面覆盖凝胶。(2)在超净工作台上,用移液器吸取总RNA样品4l于封口膜上。在实验台上再加入5l 1TAE电泳缓冲液及1l 的10X载样缓冲液,混匀后,小心加入点样孔。(3)打开电源开关,调节电压至100V,使RNA由负极向正极电泳,约30min后将凝胶放入EB染液中染色5min,用清水稍微漂洗。在紫外透射检测仪上观察RNA电泳结果。

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