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1、半薄切片图片半薄切片主要步骤半薄切片主要步骤取材取材固定固定漂洗、脱水漂洗、脱水渗透、包埋渗透、包埋半薄切片半薄切片半薄切片染色半薄切片染色每一步都是关每一步都是关键键,任何任何环节的环节的疏忽疏忽都会导致都会导致制片的制片的失败失败FAA固定液固定液制备:福尔马林5-冰醋酸5-70%酒精90应用:半薄/石蜡切片适用:一般固定根、茎、叶、花药、子房组 织切片。补充说明: 幼嫩材料用50%酒精代替70%酒精,防止材料收缩;加入5%甘油可防固定液蒸发和材料变硬。卡诺固定液卡诺固定液渗透迅速,固定根尖和花药只需渗透迅速,固定根尖和花药只需30-60分钟,分钟,但固定时间不能太久,一般不超过一天但固定
2、时间不能太久,一般不超过一天Leica RM2265旋转薄切片机Leica RM2265旋转薄切片机制作半薄切片(厚度0.25-5m)使用步骤: 1接通电源,打开主开关 2选择切片厚度 3安放包埋块于切片头中央位置,旋转固定螺丝,将样品按要求固定挟紧 4安放粘有水槽的玻璃刀,并将玻璃刀口对准样品 5选择切片模式(自动/手动),切片计数开始 6取切片的材料:捞片,置于载玻片上,加热,脱树脂处理,对材料染色,着色后冲洗、封藏、烘干半薄切片染色半薄切片染色常规染色方法有: 甲苯胺兰染色法、天青美兰染色法、碱性复红法、苏木素-伊红法、HE染色法和Giemsa染色法等。无论哪种方法都需预先做处脱树脂处理,否则染料不宜渗入,影响染色效果。脱树脂处理: 过程将干燥切片插入氢氧化钾无水酒精饱和溶液l015 min后,无水酒精洗三次,经梯度酒精下行,水洗后染色。此过程即繁琐又费时,所以选择理想的染色剂非常重要。染色原则:先用碱性染料染再用酸性染料染染色原则:先用碱性染料染再用酸性染料染 谢谢!