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1、我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物色谱是一种分离工具,而不是传统意义上的分析仪器。 也叫,它是一种高效能的物理分离技术,将它用于分析化学并配合适当的检测手段,就成为色谱分析法。常见的分离方法:蒸馏、离心、电泳、过滤、超滤、等等。色谱法的发明人: 俄国科学家:麦克海尔.塞蒙诺维奇.维茨特 M. S. Tswett 我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把
2、它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物High Performance Liquid Chromatography高效液相色谱法,简称:HPLC是一种区别于经典液相色谱;基于仪器方法的高效能分离手段。具有高性能的色谱柱,高精度、耐高压的输液泵以及高灵敏度的检测器。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物分离原理动画演
3、示动画演示 色谱泵色谱泵进样器进样器 检测器检测器废液废液数据处理系统数据处理系统请单击请单击请单击请单击请单击我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物“三高一广一快三高一广一快” :高压:高压:对载液加高,流动相能迅速通过色谱柱压.高效:高效:分离效能高。高灵敏度:高灵敏度:紫外检测器可达0.01ng,进样量在uL数量级。应用范围广:应用范围广:百分之七十以上的有机化合物可用高效液相色谱分析。分析速度快:分析速度快:较经典液体色谱法速度快得多,通常分析一个样品在1530分钟,有些样品甚至在5分钟内
4、即可完成,一般小于1小时。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1、液-液分配色谱2、液-固吸附色谱3、离子交换色谱4、离子对色谱5、离子色谱6、排阻色谱7、亲和色谱(AC) 我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物固定相与流动相均为液体(互不相溶);组分在固定相和流动相上的分配;对于亲水性固定液,采用疏水性流动相,即流动相的极性小于固定液的极性(正相 normal phase),反之,流动相的极性大于
5、固定液的极性(反相 reverse phase)。正相与反相的出峰顺序相反;早期涂渍固定液,固定液流失,较少采用;将各种不同基团通过化学反应键合到硅胶(担体)表面的游离羟基上。C18柱(反相柱)以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物即指流动相的极性大于固定相极性的色谱方法。在本法中常采用化学键合相作为固定相,流动相采用水甲醇或水乙腈系统,在反相色谱中,极性强的组分在分离时先流出柱子,极性弱的组分后流出。因此适合于共存组分极性差异较大的样品分析。我吓了一跳,蝎子是多么
6、丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物乙腈又名甲基氰,分子式CH3CN,无色透明液体,密度小于水,约为0.79,能与水和乙醇等有机溶剂以任意比混溶,易燃,有毒性。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物基本原理:基本原理:各组分在固定相吸附剂上竞争性吸附与解吸固定相:固定相:固体吸附剂为硅胶、氧化铝等,较常使用的是510m的硅胶吸附剂;流动相:流动相:各种不同极性的一元或多元溶剂。 特点:特点:适用于分离相对分子质量中等的油
7、溶性试样,对具有官能团的化合物和异构体有较高选择性;缺点:缺点:非线形等温吸附,常引起峰的拖尾我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物液相色谱柱的分离作用是在填料与流动相之间进行的,柱子的分类是依据填料类型而定。正相柱:多以硅胶为柱填料。根据外型可分为无定型和球型两种,其颗粒直径在3-10m的范围内.另一类正相填料是硅胶表面键合-CN,-NH2等官能团即所谓的键合相硅胶。反相柱:主要是以硅胶为基质,在其表面键合十八烷基官能团(ODS)的(C18)非极性填料。也有无定型和球型之分。常用的其他的反相填料
8、还有键合C8、C4、C2、苯基等,其颗粒粒径在310 m之间。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物主要特点主要特点:使用过程中柱压稳定,使用过程中柱压稳定,即使长时间使用也不即使长时间使用也不会出现拖尾等异常情会出现拖尾等异常情况况使用寿命长,清洗频使用寿命长,清洗频度低,仅为同类产品度低,仅为同类产品的的15%我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它
9、放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物a、最好使用流动相溶解样品。b、使用予处理柱除去样品中的强极性或与 柱填料产生不可逆吸附的杂质。c、使用0.45m的过滤膜过滤除去微粒杂 质。d、利用超声仪脱气。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物a、流动相对样品具有一定的溶解能力,保证样品组分不会沉淀在柱中 。b、流动相具有一定惰性,与样品不产生化学反应。c、流动相的黏度要尽量小,以便得到好的分离效 果;同时降低柱压,延长液体泵的使用寿命d、流动相的物化性质
10、要与使用的检测器相适应。最好使用对紫外吸收较低的溶剂配制。e、流动相沸点不要太低,否则容易产生气泡。f、在流动相配制好后,使用0.45 m滤膜过滤,并进行脱气。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物因柱效是柱中流动相线性流速的函数,使用不同的流速可得到不同的柱效。对内径为4.6mm的色谱柱,流速一般选择1mlmin,对于内径为4.0mm柱,流速0.8mlmin为佳。当选用最佳流速时,分析时间可能延长。可采用改变流动相的洗涤强度的方法以缩短分析时间(如使用反相柱时,可适当增加甲醇或乙腈的含量)。我吓
11、了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物请单击请单击请单击我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1)首先对流动相进行过滤,常用的孔径为0.22um和0.45um。2)对抽滤后的流动相进行超声脱气10-20分钟。3)正常情况下,先用甲醇冲洗10-20分钟,然后再进入测试用流动相。4)一般情况下,流动相冲洗20-30分钟后,仪器和基线稳定,方可进样测试。5)同时进两针标样,若结果的比值在0.98-1.02之间,
12、可正式进样。6) 测试结束,要进行色谱仪及色谱柱的清洗和维护。如流动相为缓冲试剂,要用重蒸水清洗10-20分钟,方可用有机相进行保护,否则,有损色谱柱。7)关机时,先关计算机,再关液相色谱。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物1) 流动相均需色谱纯度,水用20M的去离子水。2) 脱气后的流动相不要振动,尽量不引起气泡。3) 不使用不过滤的液体,所有过柱子的液体均需严格的过滤。4) 压力不能太大,最好不要超过15MPa。 5) 不能随意更换流动相,因为缓冲试剂遇有机溶剂,会结晶,有损色谱柱,所以,每次由有机相变缓冲剂或缓冲剂变有机相均需用蒸馏水清洗。我吓了一跳,蝎子是多么丑恶和恐怖的东西,为什么把它放在这样一个美丽的世界里呢?但是我也感到愉快,证实我的猜测没有错:表里边有一个活的生物