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1、第38讲 细胞工程1.在下列需要采用植物组织培养技术的是( ) 利用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,获得多倍体植株 获取大量的脱毒苗 利用基因工程培育抗棉铃虫的植株 单倍体育种 无子西瓜的快速大量繁殖A. B. C. D. 2.为探究矮牵牛原生质体的培养条件和植株再生能力,某研究小组的实验过程如下图。下列叙述正确的是( )A.过程获得的原生质体需悬浮在30%蔗糖溶液中B.过程需提高生长素的比例以促进芽的分化C.过程需用秋水仙素处理诱导细胞壁再生D.原生质体虽无细胞壁但仍保持细胞的全能性3.如图为植物体细胞杂交及组织培养过程示意图。下列说法不正确的是( )A.过程 分别需要用胰蛋白酶和聚乙二醇进行
2、处理B.高尔基体在过程 发挥了重要作用C.过程 需要更换培养基,才能进一步分化为植株D.A、B的基因型分別为Rr、Yy,则杂种植株的基因型为RrYy4.下列关于动物细胞培养的叙述,错误的是( )A.饲养层细胞由射线照射处死的成纤维细胞组成B.可用特定的选择或纯化方法从细胞系中获取细胞株C.利用杂交瘤技术制备单克隆抗体的过程中,需要选择培养基D.“多莉”的克隆过程中,通过调节培养基中牛血清浓度实现营养限制性培养5.如图是克隆羊的培育流程图,下列相关说法错误的是( )A.卵母细胞可以从屠宰场收集,并在体外培养到减中期B.从供体羊中取上皮细胞需要用胰蛋白酶进行处理C.用微型吸管将卵母细胞的细胞核和第
3、一极体吸出D.代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理6.如图所示为动物细胞培养过程中细胞增殖情况的变化曲线,下列有关说法正确的是( )A. OA段的培养称为原代培养,AB段可能发生了接触抑制现象B. BC段的培养称为传代培养,C点细胞遗传物质发生了改变C.为了得到既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞,可选取图中C点的细胞与浆细胞融合形成杂交细胞D.目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为CD段的细胞7.下列有关动物细胞培养和植物组织培养的叙述,错误的是( )A.动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同B.动物细胞培养和植物组织培养过程中都要用到胰蛋白酶C.动物细胞培养可用于检测有毒物质,对
4、茎尖进行组织培养可获得脱毒植株D.烟草叶片离体培养能产生新个体,对小鼠杂交瘤细胞进行培养能得到细胞代谢产物8.某二倍体植物的两个植株 杂交,得到 ,对 的处理如下图所示。下列分析错误的是()A. 到 的过程为诱变育种,依据的遗传学原理是基因突变B.植株 能通过有性杂交得到三倍体植株 ,因而 属于同一物种C.秋水仙素能够抑制纺锤体的形成,从而引起细胞内染色体数目加倍D. 到 的过程为花粉离体培养,涉及的原理是植物细胞具有全能性9.利用杂交瘤技术可以制备单克隆抗体,下列叙述正确的是( )A.可以用灭活的病毒为介导,病毒失去抗原性,也失去感染力B.对筛选出的杂交瘤细胞进行体外培养时需添加抗生素防止细
5、菌污染C.对杂交瘤细胞进行两次抗体检验后,才能获得阳性细胞克隆D.对杂交瘤细胞进行体内培养,是为了保持其特性而不发生变异10.下列不属于动物细胞工程应用的是( )A.大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染B.为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞C.大规模生产食品添加剂、香料等D.用于检测有毒物质11.驱蚊草含有香茅醛,能散发出一种特殊的柠檬型香气,从而达到驱蚊且对人体无害的效果。驱蚊草是把天竺葵的原生质体和香茅草的原生质体进行诱导融合培育而成的。下列关于驱蚊草培育的叙述,错误的是( )A. 驱蚊草的培育属于细胞工程育种,优点是克服了远缘杂交不亲和的障碍 B. 驱蚊草培育过程要用到纤维素酶、果
6、胶酶、PEG等试剂或电刺激等方法 C. 驱蚊草培育过程不同于植物组织培养,无细胞脱分化和再分化的过程D. 驱蚊草培育利用了植物体细胞杂交技术,育种原理是染色体数目变异12.如图为杂交瘤细胞制备示意图。骨髓瘤细胞由于缺乏次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT-),在HAT筛选培养液中不能正常合成DNA,无法生长。下列叙述不正确的是( )A.可用灭活的仙台病毒诱导细胞融合B.两两融合的细胞都能在HAT培养液中生长C.杂交瘤细胞需进一步筛选才能用于生产D.细胞膜的流动性是细胞融合的基础13.科研工作者利用禽流感病毒蛋白制备单克隆抗体,下列步骤中叙述正确的是( )A.用动物细胞培养液培养禽流感病毒,通过离
7、心获得抗原蛋白B.多次注射适宜浓度的抗原免疫小鼠,以获得更多的浆细胞C.用灭活的病毒诱导浆细胞与禽流感病毒融合得到杂交瘤细胞 D.将单个杂交瘤细胞接种到小鼠腹腔培养可获得多种单克隆抗体14.“白菜一甘蓝”是科学家利用植物体细胞杂交技术培育出来的,其大致流程如图所示。回答下列问题:(1)在过程中,必须先利用_酶去除白菜细胞和甘蓝细胞的细胞壁,获得具有活力的原生质体;用化学法诱导原生质体融合时,常用_作为诱导剂。(2)若过程中需要进行光照培养,此时芽苗细胞中有机物的来源有_。过程和过程所用的培养基在成分上的主要区别是_。过程和过程的实质是_。(3)白菜、甘蓝均为二倍体植物,通过植物体细胞杂交技术培
8、育“白菜一甘蓝”利用的变异原理是_。与传统的有性杂交方法相比,植物体细胞杂交技术具有的主要优点是_。15.狂犬病病毒的核酸是RNA,G 蛋白和N蛋白是狂犬病病毒的主要抗原,它们刺激人体后可诱导人体产生相应的抗体和细胞免疫反应。下图表示用生物工程制备抗狂犬病病毒单克隆抗体的过程。请回答下列问题。(1)制备该单克隆抗体的技术属于生物技术的细胞工程。图中细胞1是小鼠体内注入 后而获得的 细胞,细胞2为 细胞。细胞1具有产生 的功能,细胞2的突出特点是 。诱导细胞1和2融合的方法很多,常用的诱导因素有聚乙二醇、 、电激等。(2)若细胞1基因型为HH,细胞2基因型为SS,在两两融合后的众多细胞中,基因的
9、组合类型可能有 (填基因型)。(3)动物培养基的配方通常含有糖、氨基酸、无机盐、微量元素等,与植物细胞培养基有所不同的是,还含有 。答案以及解析1.答案:B解析:多倍体育种是用秋水仙素处理萌发的种子或幼苗,使其染色体加倍的过程,此过程不涉及植物组织培养技术。2.答案:D解析:过程获得的原生质体不能悬浮在30%的蔗糖溶液中,30%的蔗糖溶液可导致原生质体失水皱缩甚至死亡,A项错误;过程为再分化过程,需提高细胞分裂素的比例以促进芽的分化,B项错误;过程不需用秋水仙素处理,愈伤组织细胞就已经有了细胞壁,C项错误;原生质体虽无细胞壁,但含有细胞核等结构,即含有全部的遗传信息,原生质体仍保持细胞的全能性
10、,D项正确。3.答案:A解析: 为用纤维素酶和果胶酶对细胞A、B进行去壁处理, 为用聚乙二醇等方法诱导细胞融合的过程,A错误; 为新细胞壁再生的过程,植物细胞中细胞壁的形成与高尔基体有关,B正确;过程 分别使用诱导脱分化培养基和诱导再分化培养基, 需要更换培养基,才能进一步分化为植株,C正确;A、B的基因型分别为Rr、Yy,则杂种植株的基因型为RrYy,D正确。4.答案:A解析:A、饲养层细胞由获得成纤维细胞组成,成纤维细胞可分泌一直分化的物质,A错误B、通过一定的选择或纯化方法,从原代培养物或细胞系中获得的具有特殊性质的细胞称为细胞株,B正确;C、在单克隆抗体制备过程中用特定的选择性培养基筛
11、选出杂交瘤细胞,C正确D、核移植前可调节乳腺细胞培养基的牛血淸浓度,进行营养限制性培养,以利于重组细胞基因表达的分子开关的启动,D正确5.答案:A解析:从屠宰场收集的卵母细胞需在体外培养到减中期才有受精能力,A错误;从供体羊中取上皮细胞,需要用胰蛋白酶进行处理,使其分散为单个细胞,B正确;核移植过程中,用微型吸管可将卵母细胞的细胞核和第一极体一并吸出,C正确;在克隆羊的培育过程中,重组胚胎发育到一定阶段,需借助胚胎移植技术,将其移植到同种的、生理状态相同的代孕母羊体内,为了保证移入的胚胎能够存活,代孕母羊和供体羊需经过同期发情处理,D正确。6.答案:A解析: OA段的培养称为原代培养,AB段可
12、能发生了接触抑制现象,需要用胰蛋白酶等处理,使组织细胞分散开来形成单个细胞,A正确;BC段的培养称为传代培养,C点增殖缓慢,没有癌细胞无限繁殖的特点,说明遗传物质不变,B错误;CD段细胞增殖缓慢,以至于完全停止,此时可能有少部分细胞的核型会发生改变,变为能无限增殖的细胞,为了得到既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞,可选取图中D点的细胞与浆细胞融合形成杂交细胞,C错误; 目前使用的或冷冻保存的正常细胞通常为OB段的细胞,即10代以内的细胞。D错误。7.答案:B解析:动物细胞培养和植物组织培养所用培养基中的成分不同,而且动物细胞培养采用的是液体培养基,植物组织培养采用的是固体培养基,A正确。
13、动物细胞培养过程中需要用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶,但植物组织培养过程中不需要用到胰蛋白酶,B错误。动物细胞培养可以用于检测有毒物质,对茎尖(几乎不含病毒)进行植物组织培养可获得脱毒植株,C正确。植物细胞具有全能性,烟草叶片离体培养能产生新个体;对小鼠杂交瘤细胞进行培养能得到细胞代谢产物,D正确。8.答案:B解析:射线处理是进行物理诱变,故 到 的过程为诱变育种,依据的遗传学原理是基因突变,A正确;植株 通过有性杂交得到的三倍体植株 不能产生可育后代,说明 之间存在生殖隔离,故 不属于同一物种,B错误;秋水仙素能够抑制前期纺锤体的形成,从而使细胞中姐妹染色单体分离后不能平均分配到两个子细胞中,从而
14、引起细胞内染色体数目加倍,C正确; 到 的过程是将花粉培养成幼苗,为花药离体培养的过程,涉及的原理是植物细胞具有全能性,D正确。故选B。9.答案:B解析:灭活是指用物理或化学手段使病毒或细菌失去感染能力,但不破坏其抗原结构,因此灭活的病毒具有抗原性,A错误;对筛选出的杂交瘤细胞进行体外培养时,需添加抗生素以防止细菌污染,B正确;对杂交瘤细胞进行第一次抗体检验后就能得到阳性细胞克隆,进行第二次抗体检验是为了淘汰不分泌所需抗体的杂交瘤细胞,C错误;对杂交瘤细胞进行体内培养,是为了获得单克隆抗体,D错误。10.答案:C解析:动物细胞工程中可通过培养细胞,大规模生产干扰素,用于抵抗病毒引起的感染,A正
15、确;通过细胞培养,为大面积烧伤的病人提供移植的皮肤细胞,B正确确:大规模生产食品添加剂、香料等为植物细胞工程的应用,C错误;可利用培养的动物细胞检测有毒物质,D正确。11.答案:C解析:驱蚊草的培育属于植物体细胞杂交,它克服了远缘杂交不亲和的障碍,A项正确;获得植物细胞的原生质体时需要使用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁,诱导原生质体的融合可以使用PEG(聚乙二醇)或电激等方法,B项正确;植物体细胞杂交最终需要通过植物组织培养获得新的个体,这一过程中有细胞的脱分化和再分化.C项错误;驱蚊草培育过程利用了植物体细胞杂交技术,育种原理是染色体数目变异,D项正确。12.答案:B解析:动物细胞融合可以用灭活
16、的仙台病毒进行诱导, 或用PEG、电激等进行诱导,A正确;免疫B细胞与骨髓瘤细胞进行融合产生的融合细胞有,免疫B细胞A身融合细胞、骨髓瘤 细胞自身融合细胞、杂交瘤细胞,据题干信息可知,骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长,因此骨髓瘤细胞自身融合细胞在 HAT培养基上无法生长,B错误;融合后产生的杂交瘤细胞并不是都能表达产生所需的单克隆抗体,需要进一步筛选,C正确; 动物细胞融合依据的原理是细胞膜的流动性,D正确。13.答案:B解析:病毒没有细胞结构,不能独立进行新陈代谢,需要寄生在活细胞中,“动物细胞培养液”是指用于培养动物细胞的培养液,不是含有动物细胞的培养液,因此其不能用来培养病毒,A选项错
17、误;多次用特定抗原免疫小鼠,可以获得更多的能产生目的抗体的浆细胞,B选项正确;应诱导浆细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,而非与病毒融合,C选项错误;将单个杂交瘤细胞进行体内培养,只可获得一种单克隆抗体,D选项错误。14.答案:(1)纤维素酶和果胶;聚乙二醇(PEG)(2)从培养基中吸收和通过光合作用制造;生长素和细胞分裂素的比例不同;基因的选择性表达(3)染色体数目变异;能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍(能打破不同生物的生殖隔离)解析:(1)欲得到具有活力的原生质体,常用纤维素酶和果胶酶去除正常植物细胞的细胞壁。诱导原生质体间的融合常用物理和化学方法,其中化学法一般是用聚乙二醇(PEC)作
18、为诱导剂来诱导细胞融合。(2)过程是愈伤组织分化出芽的过程,若形成芽苗过程需要进行光照培养,芽苗可进行光合作用制造有机物,同时也可吸收培养基中的有机物。脱分化和再分化所需的生长素和细胞分裂素的比例不同。细胞分化的实质是基因的选择性表达。(3)通过植物体细胞杂交技术培育“白菜一甘蓝”利用的变异原理是染色体数目变异。传统的有性杂交方法不可能得到两个不同种植物的可育杂种后代,而利用植物体细胞杂交技术可以让两个不同种的植物细胞进行细胞融合,从而培育成杂种植物,显著优点是能克服不同生物远缘杂交不亲和的障碍。15.答案:(1)灭活的狂犬病病毒(G蛋白抗原或N蛋白抗原);浆;骨髓瘤;特异性抗体;能够大量增殖
19、灭活的病毒(2)HHSS、HHHH、SSSS(3)动物血清、血浆解析:(1)首先应给小鼠注射特定抗原(灭活的狂犬病病毒或G蛋白抗原或N蛋白抗原),使小鼠产生相应的免疫反应,然后从小鼠的脾脏中取得已免疫的B淋巴细胞 或浆细胞(细胞1),该细胞能够产生特异性抗体。用聚乙二醇、电激、灭活的病毒(或仙台病毒)等方法诱导B细胞(细胞1)和骨髓瘤细胞(细胞2)融合。(2)若细胞1基因铟为HH,细胞2基因型 为SS,在两两融合后细胞有三种情况:浆细胞(细胞1)自身融合的细胞,基因型 为HHHH;骨髓瘤细胞(细胞2)自身融 合的细胞,苯因型为SSSS;浆细胞(细胞 1)和骨髓瘤细胞(细胞2)融合形成的杂交 瘤细胞,基因型为HHSS。(3)由于动物细胞生活的内环境还有一些 成分尚未研究清楚,因此与植物细胞培养基相比,动物培养基中除了含有糖、氨基酸、无机盐、微量元索等,还应加入动物血清、血浆。- 10 -