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1、假单胞菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程1目的规范假单胞菌属细菌纸片扩散法药物敏感试验标准操作规程，确保药敏结果的准确。2适用范围 本操作规程适用于是假单胞菌属细菌。3选药原则在本规程所列受试抗菌药物主要根据以下因素选择。3.1现行版本的CLSI M02和M100对假单胞属细菌纸片扩散法药物敏感试验的要求。3.2细菌耐药监控网每年发布的监控要求。3.3本单位上一年度假单胞菌属细菌耐药监控数据。4质控纸片药敏试验应使用大肠埃希菌ATCC25922、大肠埃希菌ATCC35218（用于-内酰胺/-内酰胺抑制剂合剂）和铜绿假单胞菌ATCC27853进行质量控制，质控菌株可接受的抑菌圈范围参见现行版本
2、的CLSIM100-A19。质控频率参见药物敏感性试验标准操作规程。5试验材料和仪器M-H培养基，无菌生理盐水，药敏纸片，无菌棉签，35孵育箱，测量尺、标准比浊管或比浊仪。6操作步骤参见药物敏感性试验标准操作规程。7判断标准见表5-46.表5-46 假单胞菌属细菌纸片扩散试验判断标准 判断标准（mm） 药敏纸片 备注敏感 中介 耐药哌拉西林（100g） 18 17 参见结果解释哌拉西林/他唑巴坦（100/10g） 18 17头孢他啶（30g） 18 1517 14头孢哌酮（75g） 21 1620 15头孢吡肟（30g） 18 1517 15亚胺培南（10g） 18 1415 15美罗培南（1
3、0g） 18 1415 15 氨曲南（30g） 18 1621 15阿米卡星（30g） 18 1516 15 参见结果解释庆大霉素（10g） 18 1314 15 参见结果解释环丙沙星（5g） 18 1620 15 参见结果解释多粘菌素（300U） 18 15头孢哌酮/舒巴坦（75/75g） 18 1620 158注意事项8.1抑菌圈直径量取的范围为包括药敏纸片在内的被药物完全抑制的区域（肉眼判断）。药敏平板应置于无反光的黑色背景下，用反射光源肉眼观测。测量区域应为肉眼观察无明显可见菌落生长区域，忽略只有用放大镜才能观察到的位于抑菌圈外缘的细菌菌落。8.2 分离自囊性纤维化病人的铜绿假单胞菌的
4、纸片扩散法药敏试验结果可靠，但药敏平板一定要孵育24小时方可报告。8.3 铜绿假单胞菌在抗感染治疗期间对药物会产生耐药性，因此初分离到的敏感菌在抗感染治疗34日后应重复进行药物敏感试验。9结果解释对青霉素类药物，敏感的试验结果提示在临床治疗铜绿假单胞菌严重感染时应使用高剂量的治疗方案。单剂治疗可能会失败，这时应考虑联合使用其他菌株对其敏感的抗感染药物，如氟喹诺酮类或氨基糖苷类。参考文献 1CLSI.Performance Standards for Antimicrobial Susceptibility Testing;Nineteenth Informational Supplement. CLSI document M100-S19.Wayne,PA:Clinical and Laboratory Standards Institute,20092 叶应妩，王毓三，申子瑜主编.全国临床检验操作规程.第三版.南京：东南大学出版社，2006编写人： AAA、BBB 操作人：本室操作人员 批准人：