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1、第二章 细胞生物学研究方法一、名词解释：1. 扫描隧道显微镜（scanning tunneling microscpe）2. 胞质杂种（cybrid）3. 原位杂交（hybridization in situ）4. 激光扫描共焦显微镜（Laser scanning confocal microscope）5. 免疫荧光技术6. 细胞培养（cell culture）7. 嵌合体（chimera）8. 流式细胞术（9）（10）（11）SEM（12）PCR9. 原位杂交（in situ hybridization）二、选择题：请在以下每题中选出正确答案，每题正确答案为1-6个，多选和少选均不得分1.
2、 单克隆抗体相关的技术包括A.细胞融合B.细胞培养C.核移植3. 以下哪一种媒介或方法可用来诱导细胞融合A.电击B.乙二醇C.灭活的仙台病毒D.灭活的新城鸡瘟病毒4. 实验室常培养的HeLa细胞属于A.成纤维细胞B.宫颈癌上皮细胞C.成纤维细胞D.卵巢细胞5. 等密度沉降（isopycnic sedimentation）A.用于分离密度不等的颗粒B.介质最高密度应大于被分离组分的最大密度C.介质的梯度要有较高的陡度D.不需要高速度离心6. 速度沉降（velocity sedimentation）A.用于分离大小不等的细胞或细胞器B.采用的介质密度较低，梯度平缓C.介质的最大密度应小于被分离生物
3、颗粒的最小密度7. 在差速离心中最先沉降的细胞器是A.线粒体B.溶酶体C.核D.氧化物酶体8. 以下哪一种技术一般不用于分离活细胞A.流式细胞术B.细胞电泳C.超速离心D.差速离心9. PCR是A.一种DNA体外扩增技术B.细胞分离技术C.一种电泳技术10. 原位杂交（in situ hybridization）技术常用于A.转基因B.基因定位C.基因扩增11. 电镜负染技术是用重金属盐（磷钨酸或醋酸双氧铀）对铺展在载网上的样品进行染色，吸去多余染料后，在电镜下可以看到样品上凸出的部位呈A.浅染B.深染12. 透射电子显微镜的分辨力约为A.0.2 m.B.0.2 mm.C.0.2 nm.D.0
4、.2 A.13. 超薄切片的厚度通常为A.50m左右B.50mm左右C.50nm左右14. 以下关于透射电镜的描述哪一条不正确A.分辨力约0.2nmB.工作原理和光学显微镜相似，但采用电子束照明C.镜筒内为真空环境D.样品要采用有机染料染色15. 以下关于扫描电镜的描述哪一条不正确A.分辨力为6-10nmB.工作原理和光学显微镜相似，但采用电子束照明C.镜筒内为真空环境D.用来观察样品的表面结构16. 倒置显微镜的特点是A.物镜与照明系统位置颠倒B.可用于观察活细胞C.通常采用相差物镜17. 相差显微镜最大的特点是A.具有较高的分辨能力B.具有较高的反差C.可用来观察未经染色的标本和活细胞。1
5、8. 荧光显微镜以紫外线为光源，通常采用落射式照明，是因为A.如采用柯勒式照明，紫外线会伤害人的眼睛B.紫外线穿透能力较弱C.紫外线可通过镜筒中安装的双向反光镜19. 一般显微镜的分辨力数值约为0.2m，人眼在25cm处的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最高放大倍率为A.2000XB.1000XC.100XD.200X20.下面哪一种措施与提高显微镜分辨能力无关A.使用波长较短的光源B.使用折射率高的介质C.扩大物镜直径D.使用放大倍率较高的目镜三、是非题：1.原代培养物经首次传代后即成细胞株。（ ）2. 带有标记的特定核酸分子作探针，测定与之互补的染色体DNA区段的位置，称为原位杂交
6、。（ ）3.嵌合体是指将囊胚细胞的核植入到去核受精卵内后发育的完整个体。（ ）4. 用免疫荧光技术显示与酶解过程有关的酶是结合在微管上的。 （ ）5. 超薄切片的电子染色，可以正染也可以负染。 （ ）6. 在光学显微镜下用目镜10，物镜40下所摄得到的照片，其放大倍数就是400。（ ）7. 亚显微结构就是超微结构。 （ ）8. 光学显微镜和电子显微镜的差别在于后者的放大倍数远远大于前者，所以能看到更小的细胞结构。（ ）四、问答题：1. 电镜三维重建技术的主要步骤是什么？2. 阐明光学显微镜的成象原理。显微镜的分辨力有何意义？3. 电子显微镜与光学显微镜的结构原理有何主要异同点？4. 放射自显影
7、技术的基本原理及其用途。5. 染色体组型制做技术包括哪几个基本步骤？6. 免疫荧光技术的原理和操作步骤如何？试与放射自显影技术相比较。7. 何为制备离心？何为分析离心？二者各有何用途？8. 设计一套分离细胞核、叶绿体、线粒体的技术路线。9. 细胞融合有哪几种方法？思考引起膜融合的原理。10. DNA分子双螺旋结构模型的基本要点是哪些？11. 什么叫分子杂交技术？有何用途？12. 酶在细胞代谢中的重要作用是什么？它为什么具有化学和遗传双重调节作用？13. 多酶体系分哪几类？各有何作用特点？理解多酶体系同细胞代谢活动高效性的关系。14. 什么叫基因扩增？15. 研究一个基因的功能的方法有哪些？16
8、. 请举出研究基因表达的五种实验方法。选择题参考答案：1. AB, 3. ACD, 4. B, 5. ABC, 6. ABC, 7. C, 8. C, 9. A, 10. B, 11. A, 12. C, 13. C, 14. D, 15. B, 16. ABC, 17. C, 18. B, 19. B, 20. D14. 以下关于透射电镜的描述哪一条不正确A.分辨力约0.2nmB.工作原理和光学显微镜相似，但采用电子束照明C.镜筒内为真空环境D.样品要采用有机染料染色15. 以下关于扫描电镜的描述哪一条不正确A.分辨力为6-10nmB.工作原理和光学显微镜相似，但采用电子束照明C.镜筒内为真
9、空环境D.用来观察样品的表面结构16. 倒置显微镜的特点是A.物镜与照明系统位置颠倒B.可用于观察活细胞C.通常采用相差物镜17. 相差显微镜最大的特点是A.具有较高的分辨能力B.具有较高的反差C.可用来观察未经染色的标本和活细胞。18. 荧光显微镜以紫外线为光源，通常采用落射式照明，是因为A.如采用柯勒式照明，紫外线会伤害人的眼睛B.紫外线穿透能力较弱C.紫外线可通过镜筒中安装的双向反光镜19. 一般显微镜的分辨力数值约为0.2m，人眼在25cm处的分辨力是0.2mm，所以一般显微镜设计的最高放大倍率为A.2000XB.1000XC.100XD.200X20.下面哪一种措施与提高显微镜分辨能
10、力无关A.使用波长较短的光源B.使用折射率高的介质C.扩大物镜直径D.使用放大倍率较高的目镜三、是非题：1.原代培养物经首次传代后即成细胞株。（ ）2. 带有标记的特定核酸分子作探针，测定与之互补的染色体DNA区段的位置，称为原位杂交。（ ）3.嵌合体是指将囊胚细胞的核植入到去核受精卵内后发育的完整个体。（ ）4. 用免疫荧光技术显示与酶解过程有关的酶是结合在微管上的。 （ ）5. 超薄切片的电子染色，可以正染也可以负染。 （ ）6. 在光学显微镜下用目镜10，物镜40下所摄得到的照片，其放大倍数就是400。（ ）7. 亚显微结构就是超微结构。 （ ）8. 光学显微镜和电子显微镜的差别在于后者
11、的放大倍数远远大于前者，所以能看到更小的细胞结构。（ ）四、问答题：1. 电镜三维重建技术的主要步骤是什么？2. 阐明光学显微镜的成象原理。显微镜的分辨力有何意义？3. 电子显微镜与光学显微镜的结构原理有何主要异同点？4. 放射自显影技术的基本原理及其用途。5. 染色体组型制做技术包括哪几个基本步骤？6. 免疫荧光技术的原理和操作步骤如何？试与放射自显影技术相比较。7. 何为制备离心？何为分析离心？二者各有何用途？8. 设计一套分离细胞核、叶绿体、线粒体的技术路线。9. 细胞融合有哪几种方法？思考引起膜融合的原理。10. DNA分子双螺旋结构模型的基本要点是哪些？11. 什么叫分子杂交技术？有何用途？12. 酶在细胞代谢中的重要作用是什么？它为什么具有化学和遗传双重调节作用？13. 多酶体系分哪几类？各有何作用特点？理解多酶体系同细胞代谢活动高效性的关系。14. 什么叫基因扩增？15. 研究一个基因的功能的方法有哪些？16. 请举出研究基因表达的五种实验方法。选择题参考答案：1. AB, 3. ACD, 4. B, 5. ABC, 6. ABC, 7. C, 8. C, 9. A, 10. B, 11. A, 12. C, 13. C, 14. D, 15. B, 16. ABC, 17. C, 18. B, 19. B, 20. D