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实用高效液相色谱法的建立n1 绪论* 9 常规样品分离n2分离的基础* 10 计算机辅助方法n3检测灵敏度与选择性 11生化样品n4样品的制备 12手性分离n5色谱柱* 13制备分离n6中性样品* 14定量n7离子样品 * 15完善方法n8梯度洗脱*主要HPLC方法的特性n正相HPLC流动相：有机溶剂混合液 色谱柱：氰基、氨基、二醇基、硅胶适合的样品 当反相或离子对HPLC无效是的第二个良好选择；不溶于水-有机混合液的亲脂样品的首选；异构体混合物。1-2-2开始方法建立n首次HPLC分离较好的实验条件n色谱柱 C18、C8 5m 150.46cmn流动相 水或缓冲溶液-乙氰(80-100%) 缓冲溶液 25mmol磷酸钾 2.03.0 添加剂 胺改性剂、离子对试剂（开始不用） 流速 1.52.0ml/min 温度 3545 样品量 体积25L 重量 100 gn为了避免漏检样品中可能存在的化合物,建议用洗脱能力非常强的流动相,做第一次预实验,然后按照一定速度(20%)降低强溶剂的比例,如例（图1-4）所示.n当样品中存在对纯乙氰或纯甲醇强保留的组分时可以考虑用非水反相色谱NARP或者是正相色谱nHPLC方法建立的目标（表1-5）