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1、Four short words sum up what has lifted most successful individuals above the crowd: a little bit more.-author-date原核生物与真核生物复制的区别(二)DNA的复制的必要条件(二)DNA的复制的必要条件1、摸板:母链DNA解链成单链后的两条链均可作为摸板。2、原料:4种脱氧核苷三磷酸。3、需要一小段RNA作为引物,提供3-OH末段。4、需要ATP和无机离子。5、需要多种酶和蛋白因子:如引物酶、DNA聚合酶、拓扑酶、SSB蛋白等。以上必要条件中,原核生物和真核生物在DNA的复制所需要引
2、物、酶和蛋白因子等存在差别。其中DNA聚合酶种类存在较大的差别。DNA聚合酶是指以DNA为摸板,在RNA引物3-OH末段沿53方向按照碱基互补的原理催化合成DNA链的酶,也称为依赖DNA的DNA聚合酶 。原核生物和真核生物DNA聚合酶的区别主要见下表1原核生物DNA聚合酶真核生物DNA聚合酶DNA-pol 复制过程中的校读,填补缺口,修复。DNA-pol DNA损伤的应急修复。DNA-pol 延长新链核苷酸的聚合。DNA-pol 起始引发,引物酶活性。DNA-pol 低保真复制。DNA-pol 催化线粒体DNA的复制。DNA-pol 延长子链的主要酶,解螺旋酶活性。DNA-pol 填补引物空隙
3、,切除修复,重组。表1 原核生物和真核生物DNA聚合酶的区别原核生物三种DNA聚合酶都有53聚合活性和35外切酶活性,不同的是DNA-pol还有53外切酶活性,即外切酶活性有双方向。真核生物五种DNA聚合酶都有53外切酶活性,DNA-pol,DNA-pol无35外切酶活性,DNA-pol无53聚合活性。(三)DNA复制的过程原核生物和真核生物DNA的过程大致可分为:起始+延长+终止三个阶段。1、 起始阶段 表2(1)解链/旋,解链/旋酶催化。(2)起始点识别。(3)原核生物形成复制叉。(真核生物形成多个复制单位)(4)引物酶催化引物合成。引发体与引物酶结合到DNA链上,在引物酶的作用下合成一小
4、段引物。表2 原核生物和真核生物DNA复制的起始阶段的特点比较原核生物真核生物复制起始点起始点识别引物起始点长度复制单位参与的酶和蛋白因子一个 OriCDnaA长、多长一个 双向复制DnaA 识别复制起始点DnaB 解螺旋酶活性DnaC 运载和协助DnaBDnaG引物酶活性SSB 稳定解开的单链DNA拓扑酶 理顺DNA双链多个可能有“蛋白质-DNA复合物参与”短、少短多个 双向复制DNA-pol 起始引发,引物 酶活性DNA-pol 解螺旋酶活性增殖细胞核抗原复制因子拓扑酶 理顺DNA双链2、复制的延长单个核苷酸以3,5-磷酸二酯键相连与新链上,复制方向从53,合成领头链和随从链。原核生物复制
5、的延长参与的酶主要是DNA-pol催化,NAD+供能;真核生物DNA-pol在增殖细胞核抗原的协同下取代DNA-pol的作用合成DNA子链,ATP供能。真核生物以复制子各自进行复制,引物和冈崎片断较原核生物短,且引物除RNA外还有DNA,所以真核生物切除引物需要核内RNA酶,还需要核酸外切酶。3、复制的终止原核生物基因为环状的DNA,复制的终止点ter,催化填补空隙为DNA-pol,DNA连接酶连接冈崎片段成DNA链。真核生物基因为线状的DNA,其复制与核小体的装配同步进行,复制后形成染色体,DNA-pol填补空隙,存在端粒及端粒酶防止DNA的缩短(RNA引物留下的空白无法填补时出现DNA的缩短),其中端粒酶为RNA-蛋白质的复合体,具逆转录酶活性。-