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1、切取切取形成层形成层无菌无菌接种接种诱导愈伤组织诱导愈伤组织的形成的形成试管苗的形成试管苗的形成培养室培养室移栽移栽脱分化脱分化再分化再分化离体的植物器官、组织或细胞离体的植物器官、组织或细胞愈伤组织愈伤组织根、芽根、芽植物体植物体外植体外植体脱分化脱分化植物激素：植物激素：细胞分裂素、生长素细胞分裂素、生长素再分化再分化过程过程植物组织培养条件植物组织培养条件： 含有全部营养成分的含有全部营养成分的培养基、一定的温度、空培养基、一定的温度、空气、无菌环境、适合的气、无菌环境、适合的PHPH、适时光照等。适时光照等。遮光遮光光照光照细胞分化细胞分化程度与细程度与细胞分裂能胞分裂能力呈负相力呈负
2、相关。关。因为不同种生物之间存因为不同种生物之间存在着在着生殖隔离生殖隔离，所以用，所以用传统的有性杂交方法是传统的有性杂交方法是不可能做到这一点的。不可能做到这一点的。于是，这些科学家试图用这两种植物的体于是，这些科学家试图用这两种植物的体细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。细胞进行杂交，来实现这一美妙的设想。植物体细胞杂交技术植物体细胞杂交技术这幅番茄这幅番茄马铃薯图利马铃薯图利用传统有性杂交方法能用传统有性杂交方法能实现吗？为什么？实现吗？为什么？ 19721972年卡尔森等通过两个烟草品种之间年卡尔森等通过两个烟草品种之间原生质体的融合，获得了第一个体细胞杂种。原生质体的融合，获得了第
3、一个体细胞杂种。19781978年梅尔彻斯年梅尔彻斯(Melchers)(Melchers)等首次获得等首次获得了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种了番茄和马铃薯的属间体细胞杂种“PotamatoPotamato”。 目前，已得到栽培烟草与野生烟草、目前，已得到栽培烟草与野生烟草、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、栽培大豆与野生大豆、籼稻与野生稻、籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种籼稻与粳稻、小麦与鹅冠草等细胞杂种及其后代，获得了有价值的新品系或育及其后代，获得了有价值的新品系或育种上有用的新材料。种上有用的新材料。 1 1你认为两个来自不同植物的体细胞完你认为两个来自不同植物的体细胞完成融合，遇到
4、的第一个障碍是什么？成融合，遇到的第一个障碍是什么？ 2 2有没有一种温和的去壁方法呢？有没有一种温和的去壁方法呢？ 3 3为什么两个原生质体能发生融合，这为什么两个原生质体能发生融合，这与细胞膜的什么特性有关？与细胞膜的什么特性有关？ 4 4如果两个来源不同的原生质体发生了如果两个来源不同的原生质体发生了融合，下一步该做何处理？融合，下一步该做何处理？ 5 5如何将杂种细胞培育成杂种植株？如何将杂种细胞培育成杂种植株？请思考：请思考：杂杂种种植植株株融合的融合的原生质原生质体体ABAB再再生生出出细细胞胞壁壁脱脱分分化化愈愈伤伤组组织织再再分分化化1 1、过程、过程植物细胞的融合植物细胞的融
5、合植物组织培养植物组织培养植物细胞植物细胞A A原生质体原生质体B B原生质体原生质体A A杂种杂种细胞细胞AB去去 壁壁去去 壁壁人人工工诱诱导导方法？方法？促进融合促进融合的方法？的方法？融合融合完成完成的的标志标志植物细胞植物细胞B B二、植物体细胞杂交技术二、植物体细胞杂交技术细胞融合的基础：细胞融合的基础： 细胞膜的流动性细胞膜的流动性2、概念 将不同种的植物体细胞，在一定条将不同种的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的技术。育成新的植物体的技术。3、优势和未解决的问题 优势优势（与有性杂交方法比较）与有性杂交方法比
6、较） ：打破了不同种：打破了不同种生物间的生殖隔离障碍，大大扩展了可用生物间的生殖隔离障碍，大大扩展了可用于杂交的亲本组合范围。于杂交的亲本组合范围。未解决的问题：未解决的问题：未能让杂种植物按照人们未能让杂种植物按照人们 的需要表现出亲代的优良。的需要表现出亲代的优良。1.1.为什么为什么“番茄番茄马铃薯马铃薯”超级杂种植株没超级杂种植株没有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地有如科学家所想像的那样，地上长番茄、地下结马铃薯？下结马铃薯？ 马铃薯马铃薯番茄没有像人们预想的那样地番茄没有像人们预想的那样地上长番茄、地下结马铃薯，主要原因是：上长番茄、地下结马铃薯，主要原因是：生生物基因的表达不
7、是孤立的，它们之间是相互物基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控、相互影响的，调控、相互影响的，所以马铃薯所以马铃薯番茄杂交番茄杂交植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，植株的细胞中虽然具备两个物种的遗传物质，但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能但这些遗传物质的表达受到相互干扰，不能再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有再像马铃薯或番茄植株中的遗传物质一样有序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结序表达，杂交植株不能地上长番茄、地下结马铃薯就是很自然的了。马铃薯就是很自然的了。2.2.自然界中有一种含有叶绿体的原生动物自然界中有一种含有叶绿体的原生动物眼虫，眼虫，说明植物的细胞器同样可以在
8、某些动物细胞中存活，说明植物的细胞器同样可以在某些动物细胞中存活，请探讨：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？请探讨：动物细胞与植物细胞之间可以实现杂交吗？如果理论上可行，请设计出具体实验方案。如果理论上可行，请设计出具体实验方案。所采用技术的理论基础 植物细胞工程通常采用的技 术 手 段 植物组织培养植物组织培养 植物体细胞杂交植物体细胞杂交植物细胞的全能性植物细胞的全能性小结小结：1、植物体细胞杂交尚未解决的问题有：、植物体细胞杂交尚未解决的问题有：A A、去掉细胞壁、去掉细胞壁, ,分离出有活力的原生质分离出有活力的原生质体体B B、将杂种细胞培育成植株、将杂种细胞培育成植株C C、让
9、杂种植物按照人们的需要表现出亲、让杂种植物按照人们的需要表现出亲代的优良性代的优良性D D、尚未培育出属间杂种植物、尚未培育出属间杂种植物2、不能人工诱导原生质体融合的方、不能人工诱导原生质体融合的方法是法是A A、振动、振动 B B、电刺激、电刺激 C C、PEGPEG试剂试剂 D D、重压、重压3.植物细胞表现出全能性的必要条植物细胞表现出全能性的必要条件是件是 A. 给予适宜的营养和外界条件给予适宜的营养和外界条件 B. 导入其他植物细胞的基因导入其他植物细胞的基因C. 脱离母体后，给予适宜的营养脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件和外界条件D. 将成熟筛管的细胞核移植到去将成熟筛管的细
10、胞核移植到去核的卵细胞内核的卵细胞内4 4、植物体细胞融合完成的标志是、植物体细胞融合完成的标志是 A A产生新的细胞壁产生新的细胞壁 B B细胞膜发生融合细胞膜发生融合C C细胞质发生融合细胞质发生融合 D D细胞核发生融合细胞核发生融合组卷网5 5、用不同种植物的两个体细胞融合成一、用不同种植物的两个体细胞融合成一个杂种细胞的过程。该过程是指个杂种细胞的过程。该过程是指 A A不同植物的精子和卵细胞的融合不同植物的精子和卵细胞的融合 B B不同植物的原生质体的融合不同植物的原生质体的融合C C完整的两个体细胞的融合完整的两个体细胞的融合 D D植物花粉细胞的两两融合植物花粉细胞的两两融合AB