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1、第 4 卷 第 1 期 太 原 师 范 学 院 学 报 ( 自然科学版 ) Vol. 4 Mar . No. 1 2005 2005 年 3 月 JOURNAL OF TAIYUAN TEACHERS COLLEGE ( Natural Science Edition) 维生素 1 C 的测定方法 2 1 李秋菊王亚红 刘秀萍 摘要 ( 1. 晋中学院 生物系 , 山西 晋中 030600; 2. 永济现代 学校 , 山西 永济 030400) 目前研究维生素 C 测定方法的报道较多 , 文章对近年来有关维生 素 C 的测定方法如 光度分析法 、 荧光法 、 化学发光法 、 电化学分析法及色谱
2、法等进行了综述 , 各种方法对实际样品的测 定均有满意的效果 . 关键词 维生素 C; 抗坏血酸 ; 测定方法 ; 检出限 文章编号 1672 2027( 2005) 01 0089 03 中图分类号 Q564 文献标识码 A 维生素 C( Vitamin C, 简称 Vc) 是维生素类药物中的 ! 明星 , 具有抗坏血病的作用 , 又称作抗坏血酸 . Vc 可促进胶原蛋白抗体 , 具有抗癌的作用 ; 它能参与神经介质、激素的生物合成 ; 能将胆固醇转化为胆汁酸 , 使 高胆固醇血症患者的胆固醇下降 ; 能将 Fe 还原为 Fe , 使其易于吸收 , 有利于血红蛋白的形成 ; 还具有解 毒的作
3、用 . Vc 广泛存在于植物组织中 , 新鲜的水果、蔬菜 , 特别是枣、辣椒、苦瓜、柿子叶、猕猴桃、柑橘等食品 中含量尤为丰富 . 准确测定维生素 C 的含量 , 对饮食健康、医疗保健都具有十分重要的意义 . 近年来文献报 道有关维生素 C 的测定方法主要有光度分析法、荧光法、化学发光法、电化学分析法及色谱法等 . 1 光度分析法测定维生素 C 高峰等 在 pH= 2 的 HCl 缓冲溶液和增敏剂对氨基苯磺酸存在下 , Vc 还 原灿烂甲酚蓝并使之褪色 , 建 立了测定抗坏血酸的新方法 . 检出限为 0. 28 mg/ L, 相对标准偏差 ( RSD) 为 1. 2% ( 0. 40 mg/
4、L , n= 11) , 线性 范围为 0. 24 mg/ L 32 mg/ L. 该法具有良好的选择性 , 仪器设备简单 , 操作简便 , 准确可靠 , 已用于药品和合 成样品中维生素 C 的测定 . 秦永惠等 采用 2, 6 二氯靛酚钠动力学分光光度法测定了西红柿及草莓中的抗坏血酸 , 提出用 2, 6 二 氯靛酚钠作氧化剂 , 与抗坏血酸混合 , 在固定 时间间隔于 611 nm 处测得吸光度 A 值的变化 ( A / t ) 与维生 素 C 含量成线性关系 . 线性范围为 0 mg/ L12 mg/ L, 在样品处理时采用偏磷酸作为提取剂 , 以减缓 V c 被氧化 的速度 . 该法灵
5、敏度高 , 操作简便 , 试剂易得 , 容易推广 . 刘海玲等 根据 Vc 对重铬酸钾氧化丁基罗丹明 B 褪色反应的阻抑作用 , 建立了阻抑动力学光度法 , 是 为测定药片中的 Vc 的一种新方法 . 在 0. 1 mol/ LH2SO4 介质中 , 于 70 # 时 , Vc 能有效阻抑该褪色 反应 . 阻抑催 化反应溶液的吸光度 A 与催化反应溶液吸光度 A 0 的 ln( A / A 0) 值与维生素 C 浓度呈良好的线性关系 , 该方 法的灵敏度为 1. 47 10 L%mol %cm . 谢全彪 首次用分光光度法同时测定了食品中的 L 山梨糖 ( Vc) 和山梨酸 ( SOA) .
6、贺锋嗄 等采用紫外 分光光度法测定蒙古酒中 V c 的含量 , 利用铜离子氧化消除背景干扰 , 能直接测定奶子酒和澈格中的 V c 而不 需要进行前处理 . 2 荧光法测定维生素 C 鲍所言等 基于在 H2SO4 介质中 , Vc 对钒催化溴酸钾氧化藏红 T 具有活化作用 , 建立了高灵敏度、高选 择性测定抗坏血酸的动力学荧光法 . 采用固定时间法测定体系的荧光猝灭程度 , 检出限为 5. 8 10 g/ mL, 线性范围为 0 g/ mL 0. 56 g/ mL. 该方法已用于药品、蔬菜和尿液中维生素 C 的测定 . 蒋淑艳 等采用同步 收稿日期 : 2003 11 28 作者简介 : 李秋
7、菊 ( 1965 ) , 女 , 山西晋 中人 , 晋中学院生物系讲师 . 3+ 2+ 1 2 3 4 - 1 - 1 4 5 6 - 3 7 90 太 原 师 范 学 院 学 报 ( 自然科学版 ) 第 4 卷 荧光 & 双波长法同时测定 Vc 和丙酮酸 , RSD 分别为 0. 2% 2. 1% 及 1. 5% 3. 4% ; 回收率分别为 96. 5% 107. 2% 及 94. 6% 98. 5% , 用于水果中维生素 C 和丙酮酸的同时测定 , 结果满意 . 3 化学发光法测定维生素 C 化学发光法具有灵敏度高、仪器简单和操作方便等特点 , 是测定 V c 的常用方法之一 . 章竹君
8、 等用化学发光法对 V c 进行了多种测定方法的研究 . 文献 报道 , 用高灵敏反相流动注射化 学发光法测定 V c, 检出限达 2 10 g/ mL, Vc 浓度在 1 10 g/ mL 1 10 g/ mL 范围内与体系化学发 光 强度减小量呈良好线性关系 , 该法已成功应用于药片及蔬菜中 Vc 的测定 . 文献 报道 , 在某些过渡金属离子 ( 如 Cu 、 Fe 等 ) 存在时 Vc 与 Cu Luminol 体系反应可产生化学发光 , 检出限为 6. 2 10 mol/ L, 线性范围 为 2. 0 10 mol/ L 6. 0 10 mol/ L, RSD 为 1. 1% ( 4
9、. 0 10 g/ L , n= 11) . 重复性好 , 对市售饮料、复合维 生素及维生素片进行测定 , 结果满意 . 文 献 用流动注射化学发光传感器测定 Vc, 该传感器线性响应范围 为 1 10 g/ L 4 10 g/ L , RSD 为 2. 3% ( 1. 0 10 g/ L, n= 11) ; 从取样测定到全部分析过程只需 1 min, 可连续使用 100 次以上 . 检测限为 5. 0 10 g/ L. 该法已用于在线检测饮料中 Vc 的测定 . 文献 基于 Cu ( ) 在强碱介质中可氧化鲁米诺产生化学发光 , Vc 对此体系有正协同增强作用 , 采用流动注射化学发光分 析
10、法测定痕 量 V c, 用于 Vc 片中 V c 的测定 , 结果满意 . 曾云鹗等 分别利用 Fe( ) 抗坏血酸 鲁米诺化学发光体系测定痕量 Vc 和钌 ( ) 联吡啶 抗坏血 酸 铈体系化学发光测定 Vc, 两种方法均操作简便快速 , 所用试剂廉价易得 , 且条件温和 , 重现性好 , 用于药 物中 V c 的测定 , 获得满意效果 . 朱果逸等 利用铬 ( ( ) 过氧化氢 鲁米诺化学发光法测定痕量 V c, 用于医 药 Vc 片剂中 Vc 的含量测定 . 4 电化学分析法 邓家祺等 测定 Vc 分别用四氰基醌二甲烷修饰碳糊电极电催化氧化和花椰菜组织膜 苯醌修饰电 极两种方法 . 前者
11、 Vc 浓度为 5. 0 10 mol/ L 5. 0 10 mol/ L 范围内 , 催化峰电流与 Vc 浓度呈线性关系 , 响应时间小于 30 s, 电极的稳定性良好 , 用来测定实际药品中的 Vc, 获得满意效果 . 后者用苯醌作为电子传 递介质 , 石墨电极为基本电极 , 线性响应范围为 5. 66 10 5. 66 10 mol/ L, 电极寿命至少 30 天 . 该方法 比酶电极测定 要好的多 , 不会导致某些无关的电极活性物质被还原 , 测定结果与药典法相符 . 袁倬斌等 用半微分伏安法测定大蒜中的 V c. 该法将工作电极直接插入大蒜瓣中 , 大大减少了 Vc 的 分解 , 克
12、服了测定结果偏低的现象 , 简化了测定手续 , 加快了测定速度 . 在 pH = 6. 8 的磷酸氢钠 & 柠檬酸介 质中 , Vc 在 7. 0 10 3. 2 10 mg/ mL 范围内与半微分伏安曲线阳极峰的峰高呈线性关系 , 其最低检出浓 度为 4. 0 10 mg/ L. 王瑜等 用 1. 5 次微分法测定了水果中的 V c, 峰高与 Vc 的浓度在 0. 2 g/ mL 2. 4 g/ mL 范围呈直线 关系 , 检出限达 0. 1 g/ mL( 富集 30 s) . 孙汝东等 首次采用方波极谱法间接测定样品 Vc 片剂中 Vc 的含 量 , RSD 为 2. 9% . 张雷等 采
13、用单分子层 - 氨基丁酸共价修饰玻碳电极同时测定多巴胺、尿酸和抗坏血 酸 , 该修饰电极具有良好的灵敏度、选择性和稳定性 , 并具有抗污染的能力 . 5 其他方法 毛细管电泳是近几年新兴的分析方法 , 具有效率高、分析时间短、样品处理简单等特点 . 文献 采用 毛细管电泳法分别对复方芦丁片及果蔬中的 Vc 进行了测定 , 结果满意 . 万春花等 采用反相液相色谱法测 定功能性食品中的 V c, 该法具有干扰少 , 准确度高 , 重现性好、灵敏、简便、快捷等优点 , 是较先进可靠的方法 之一 . 参考文献 : 1 高 峰 , 朱英贵 , 王 伦 . 灿烂甲酚蓝褪色光度法测定抗坏血酸 J . 分析
14、实验室 , 2003, 22( 2): 36 2 秦永惠 , 逯凯霄 , 魏继华等 . 2, 6 二氯靛酚 钠 动力学 分光光 度法测 定西 红柿及 草莓的 抗坏血 酸 J . 分析 化学 , 1996, 24( 10) : 1156 8 11 8 - 10 - 9 - 6 9 2+ 2+ - 7 - 6 - 5 - 6 10 - 5 - 3 - 4 - 6 11 12 13 14 15 16 - 5 - 2 - 4 - 2 17 - 2 2 - 2 18 19 20 21 23 24 第 1 期 李秋菊等 : 维生素 C 的测定方法 91 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13
15、14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 刘海玲 , 欧水平 . 阻抑动力学光度法测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 2002, 30( 1) : 122 谢全彪 . 分光光度法同时测定食品中的抗坏血酸和山梨酸 J . 分析化学 , 1997, 25( 2) : 247 贺锋嗄 , 哈林其木格 , 刘 金 , 等 . 紫外光度法直按测定蒙古酒中维生素 C 的含量 J . 分析实验室 , 2001, 20( 2) : 91 鲍所言 , 李书 存 , 胡汉芳 , 等 . 动力学荧光法测定抗坏血酸 J . 分析实验室 , 2001, 20( 5) : 4 蒋淑艳 , 曲复宁
16、. 同步荧光 & & & 双波长法同时测定抗坏血酸和丙酮酸 J . 分析化学 , 1997, 25( 9) : 1064 陈浩汉 , 秦 伟 , 章竹君 . 高灵敏反相流动注射化学发光法测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 1997, 25( 9) : 1079 封满良 , 吕九如 , 章竹君 , 等 . 铜 鲁未诺化学发光法测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 1995, 23(1) : 70 王福昌 , 秦 伟 , 章竹君 . 流动注射化学发光传感器测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 1997, 25(11) : 1255 1258 封满良 , 吕九如 , 章竹君 , 等 . 流动注射化学发光
17、分析法测定痕量抗坏血酸 J . 分析化学 , 1996, 24( 11) : 1364 唐宏武 , 罗庆尧 , 曾云鄂 , 等 . 铁 ( ) 抗坏血酸 鲁示诺化学发光体系测定痕量抗坏血酸的研究 J . 分析化学 , 1995, 23(2) : 240 高 华 , 何治村 , 罗庆尧 , 等 . 钌 ( ) 联吡啶 抗坏血酸 铈 ( ) 体系化学发光测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 1996, 24( 11) : 1363 李 峰 , 朱果逸 . 铬 ( ( ) 过氧化氢 鲁未诺化学发光法测定痕量抗坏血酸 J . 分析化学 , 2002, 30(5) : 580 刘宝红 , 陈蕾 , 刘海鹰
18、 , 等 . 四氰基醌二甲烷修饰碳糊电极电催化氧化测定抗坏血酸 J . 分析化学 , 1995, 23( 2) : 206 马全红 , 邓家祺 . 花椰莱组织膜 苯醌修饰电极测定 L 抗坏电酸的研究 J . 分析化学 , 1994, 22( 2) : 121 韩树波 , 苗凤智 , 袁倬斌 , 等 . 大蒜中抗坏血酸的半微分伏安法测定 J . 分析化学 , 1997, 25(3) : 338 王 瑜 , 姚磊明 , 陆光汉 . 1. 5 次微分伏安法测定水果中的抗坏血酸 J . 分析化学 , 1993, 21(9) : 1115 孙汝东 , 严金龙 , 孔岐忠 . 方波极谱法间接测定抗坏血酸
19、J . 分析化学 , 2001, 29(6) : 707 张 雷 , 林祥钦 . 单分子层 氨基丁酸共价修饰破碳电极同时测定多巴胺、尿酸和抗坏血酸 J . 高等学校化学 学报 , 2003, 24 (4) : 59 何风云 , 柳仁民 , 刘 雪 , 等 . 毛细管区带电泳法测定复方芦丁片中的 芦丁和维生素 C 的含 量 J . 分 析试验室 , 2002, 21( 4) : 90 李向军 , 熊 辉 , 袁倬斌 . 毛细管电泳法测定复方芦丁片中的芦丁和维生素 C J . 分析试验室 , 2001, 20( 5) : 41 杨建洲 , 张荣莉 . 毛细管区等电泳分析果蔬中的维生素 C 的含量
20、J . 分析化学 , 2002, 30( 1) : 120 万春花 . 反相液相色谱法测定功 能食品中的维生素 C J . 分析实验室 , 2002, 21( 增刊 ) : 89 The Methods Determination on Vitamin C Li Qiuju Wang Yahong Liu Xiuping ( 1. Department of Biology and Scientific Technology, Jinzhong College , Jinzhong 030600, China 2. Yongji Modern School , Yongji 030400, C
21、hina) Abstract There are a great many of reports on Vitamin C . Several main methods of determination Vi tamin C in recent years such as spectrophotometric method. fluorimetric method. Chemilurminescence mehhod . electrochemical analysis and chromatography method were summarized. Determination results of samples by these methods were satisfied. Key words vitamin C ascorbid acid; detect ion limit; determinat ion method 1 2 1