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1、生化需氧量检测作业指导书生化需氧量检测作业指导书1.1.试剂及其配制试剂及其配制1.1 氯化钙溶液（27.5g/l）:溶解 27.5g 氯化钙于水中，稀释至 1L，盛于试剂瓶中。1.2 三氯化铁溶液（0.25g/l）:溶解 0.25g 三氯化铁于水中，稀释至 1L，盛于试剂瓶中。1.3 硫酸镁溶液（22.5g/l）:溶解 22.5g 硫酸镁于水中，稀释至 1L。盛于试剂瓶中。1.4 磷酸盐缓冲溶液（pH7.2）：溶解 8.5g 磷酸二氢钾，21.75g 磷酸氢二钾，33.4g 磷酸氢二钠和 1.7g 氯化铵于约 500ml 水中，稀释至 1L。此缓冲溶液 pH 为 7.2，不需再做调节。1.5
2、 测定溶解氧所需试剂及其配制。2.2.分析步骤分析步骤2.1 稀释水的制备在 20L 玻璃瓶中加入一定体积的睡，经过 8h12h 曝气后，使溶解氧接近饱和，盖严静置，备用。使用前于每升水中各加 1ml 磷酸盐华纳冲溶液、1ml 硫酸镁溶液、1ml氯化钙溶液和 1ml 三氯化铁溶液，混匀。2.2 水样采集和培养水样采集和培养按一下步骤进行：a)水样采集后应在 6h 内开始分析，若不能，则在4或 4以下保存，而且不得超过 24h，并将贮存时间和温度与分析结果一起报告；b)对未受污染海区的水样，可以直接取样。分装样品时，虹吸管的一头要插入培养瓶的底部，慢慢放水，以免带入气泡。直接测定当天水样和经过五
3、天培养后水样中溶解氧的差值，即为五日生化需氧量c）对于已受污染海区的水样，必须用稀释水稀释后再进行培养和测定。水样稀释的倍数是测定的重要关键。稀释倍数的选择可根据培养后溶解氧的减少量而定，剩余的溶解氧至少有 1mg/l.一般采用 20%75%的稀释量。在初次作时，可对每个水样同事做 23 个不同的稀释倍数。3.3.记录与计算记录与计算将每种水样测定结果及时记录在表中，按式（68）计算五日生化需氧量：BOD5=(D1-D2)-(D3-D4)f1f2(68)式中：BOD5五日生化需氧量，单位为毫克每升；D1样品在培养前的溶解氧，单位为毫克每升；D2样品在培养后的溶解氧，单位为毫克每升；D3稀释水灾培养前的溶解氧，单位为毫克每升；D4稀释水灾培养后的溶解氧，单位为毫克每升；f1稀释水（V3）在样品(V4)中所占的比例；f2水样(V4)在稀释水(V3)中所占的比例。其中：f1=V3/(V3+V4); f2=V4/( V3+V4)