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1、动物细胞培养动物细胞培养动物细胞融合动物细胞融合生产单克隆抗体生产单克隆抗体动物细胞核移植动物细胞核移植动物动物细胞细胞工程工程常用常用技术技术手段手段技术基础：动物细胞培养技术技术基础：动物细胞培养技术一、动物细胞培养的应用和概念：一、动物细胞培养的应用和概念： 动物细胞培动物细胞培养就是从动物有养就是从动物有机体中取出机体中取出相关相关的组织的组织,将它分散将它分散成成单个细胞单个细胞,然后然后,放在适宜的培养放在适宜的培养基中基中,让这些细胞让这些细胞生长和增殖生长和增殖.动物机体组织动物机体组织单个细胞单个细胞原代培养原代培养胰蛋白胰蛋白酶酶或胶原蛋白酶或胶原蛋白酶稀释稀释加培养液加培
2、养液传代培养传代培养旁栏思考旁栏思考1：转入培养液中转入培养液中进行原代培养进行原代培养细胞悬液细胞悬液3、动物细胞培养过程：、动物细胞培养过程：动物胚胎或幼龄动动物胚胎或幼龄动物的组织、器官物的组织、器官细胞悬浮液细胞悬浮液胰蛋白酶胰蛋白酶原代培养原代培养50代细胞代细胞传代培养传代培养细胞株细胞株无限传代无限传代细胞系细胞系单个细胞单个细胞加培养液加培养液遗传物质遗传物质未改变未改变遗传物质遗传物质已改变已改变动物组织细胞间隙中动物组织细胞间隙中含有一定量的弹性纤含有一定量的弹性纤维等蛋白质，将细胞维等蛋白质，将细胞网络起来形成具有一网络起来形成具有一定弹性和韧性的组织定弹性和韧性的组织和
3、器官。和器官。（分解弹性纤维）（分解弹性纤维） 无菌、无毒的环境无菌、无毒的环境 营养：合成培养基营养：合成培养基 温度和温度和pH 气体环境气体环境2、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞、为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料？培养材料？1、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基、动物细胞培养液的主要成分是什么？较植物组培培养基有何独特之处？有何独特之处？3、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？、为什么培养前要将组织细胞分散成单个细胞？4、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新个、动物细胞培养能否像绿色植物组织培养那样最终培养成新
4、个体？体？主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。主要成分：葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和动物血清等。独特之处有独特之处有：1、液体培养基、液体培养基 2、成分中有动物血清等、成分中有动物血清等因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强因为这些组织或器官上的细胞生命力旺盛，分裂能力强成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。成块组织不利培养，分散了做成细胞悬浮液利于培养。细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出等。细胞所需的营养容易供应，其代谢废物容易排出等。不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的不能，动物细胞培养只能使细胞数目增多，不能发育成新的动
5、物个体动物个体4.动物细胞培养技术的应用有哪些？动物细胞培养技术的应用有哪些？ 生产许多有重要价值生物制品生产许多有重要价值生物制品 如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体如病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体动物细胞是基因工程常用的受体细胞动物细胞是基因工程常用的受体细胞培养的动物细胞可用于检测有毒物质，判断培养的动物细胞可用于检测有毒物质，判断某种物质的毒性某种物质的毒性 培养正常或各种病变细胞，用于生理、药理、培养正常或各种病变细胞，用于生理、药理、病理等研究病理等研究 比较项目比较项目植物组织培养植物组织培养动物细胞培养动物细胞培养原理原理培养基性质培养基性质培养基特有成分培养基特有成分培养结果培养结
6、果培养目的培养目的细胞的全能性细胞的全能性细胞增殖细胞增殖固体培养基固体培养基液体培养基液体培养基蔗糖蔗糖 植物激素植物激素葡萄糖葡萄糖 动物血清动物血清可以获得可以获得植物体植物体获得细胞或细胞获得细胞或细胞产物产物快速繁殖、培育快速繁殖、培育无病毒植株无病毒植株获得细胞或获得细胞或细胞分泌蛋白细胞分泌蛋白相同点：1、都需要人工条件下的无菌操作2、都是合成培养基（性质与成分不同）3、都需要适宜的温度，PH等条件4、都进行了有丝分裂，属无性繁殖，都可称为克隆 动物细胞核移植：动物细胞核移植：是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞是将动物的一个细胞核，移入一个已经去掉细胞核的卵母细胞中，使其
7、重组并发育成为一个新的核的卵母细胞中，使其重组并发育成为一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为胚胎，这个新的胚胎最终发育为动物个体（克隆动物）动物个体（克隆动物）分类：分类：胚胎细胞核移植：体细胞核移植：细胞分化程度低，恢复全能性容易细胞分化程度低，恢复全能性容易 细胞分化程度高，恢复全能性较难细胞分化程度高，恢复全能性较难原理原理：细胞核的全能性：细胞核的全能性 1997年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达年，美国威斯康星州的一个奶牛场有一头名叫卢辛达（Lucinda）的奶牛，年产奶量为）的奶牛，年产奶量为30.8 t，创造了世界奶牛产，创造了世界奶牛产奶量最高新纪录。目前世界各国高
8、产奶牛场奶牛，年平均产奶量最高新纪录。目前世界各国高产奶牛场奶牛，年平均产奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为奶量一般为十几吨，而我国奶牛产奶量年平均水平仅为34 t。 （1）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由）能利用体细胞核移植技术克隆高产奶牛卢辛达吗？请说明理由 （2）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进）如果将克隆高产奶牛卢辛达的任务交给你，你将如何对它进 行克隆？行克隆？ 卵母卵母细胞细胞去核去核取供取供体细体细胞胞电刺激使电刺激使两细胞融两细胞融合合重组细胞重组细胞重组胚胎重组胚胎新个体新个体供体供体细胞细胞细胞培养细胞培养卵细胞卵细胞
9、母绵羊母绵羊母绵羊母绵羊乳腺细胞乳腺细胞细胞质细胞质细胞核细胞核细胞核移植细胞核移植早期胚胎早期胚胎卵裂卵裂C母绵羊子宫母绵羊子宫胚胎移植胚胎移植多莉羊多莉羊分娩分娩妊娠妊娠多莉羊的培育过程多莉羊的培育过程融合后的卵细胞融合后的卵细胞2.体细胞核移植技术的应用前景如何？体细胞核移植技术的应用前景如何？1、畜牧生产方面：加速家畜遗传改良进程，促进优良畜群繁育。2、保护濒危物种方面：增加动物的存活数量。3、医药卫生领域：转基因动物作为生物反应器，生产医用蛋白。4、治疗人类疾病：转基因克隆动物细胞、组织、器官作为异种移植供体等。3.体细胞核移植技术存在的问题有哪些？体细胞核移植技术存在的问题有哪些？