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1、血清肝纤与慢性丁型肝炎的关系（临床肝胆病杂志）2015年第三期1资料与方法11研究对象选取2008年3月至2013年1月在广州市第八人民医院肝病科住院并未曾接受任何抗病毒治疗的CHD患者28例。CHD诊断标准为患者在明确CHB诊断基础上6，同时抗HDVIgM阳性持续至少3个月1213，且排除甲型、丙型、戊型肝炎病毒重叠感染以及其他原因(酒精、药物、肿瘤、本身免疫性肝病等)引起的肝损害。入选患者均进行肝活组织病理学检查。12研究方法121HA、LN、PP及C检测采用放射免疫法进行，试剂购自北京泰格科信生物有限公司，由本院免疫室固定专业人员严格根据试剂盒讲明书操作。122肝功能检测采集患者空腹血3
2、ml，4000r/min离心3min，于4冰箱保存备用。肝功能指标ALT采用全自动生物化学分析仪(购自日本奥林巴斯公司)检查。123HBVDNA定量和肝炎病毒血清标志物定量检测采集患者空腹血2ml，4000r/min离心3min，于20冰箱保存。血清HBV标志物检测试剂盒购自上海罗氏公司，血清抗HDVIgM检测试剂盒购自中山生物有限公司。血清HBVDNA水平采用荧光定量PC法检测(试剂购自中山大学达安基因股份有限公司)，检测下限为500IU/ml。124肝活组织检查及组织病理学检查方法肝活组织检查采用单人操作法，选择16G活组织检查穿刺针，经B超定位后，在右侧腋前线第8肋间常规消毒铺巾，经皮快
3、速穿刺获取肝组织。获取肝组织必须在15cm以上(至少包括6个以上汇管区)，标本用4%甲醛溶液固定。常规制片，HE及网状纤维染色，病理诊断纤维化分期为S0S4，由指定的一位病理医生最后审核诊断13。13统计学方法采用SPSS130软件进行统计学分析，其中计量资料以均数标准差(xs)表示，HBeAg阳性与阴性组间计量资料比拟采用t检验，计数资料比拟采用2检验，不同纤维化分期间比拟采用非参数检验中的KruskalWallis检验;相关性分析采用Spearman等级相关分析。以P005为差异有统计学意义。2结果21患者一般资料28例CHD患者中，HBeAg阳性18例(643%)，HBeAg阴性10例(
4、357%)。HBeAg阳性与阴性患者的平均年龄分别为(27161)岁和(34.265)岁，HBeAg阴性组患者年龄较HBeAg阳性组患者大(t=2548，P=0011)。HBeAg阳性组患者HBVDNA水平较HBeAg阴性组患者水平明显升高(P005)，而两组间ALT、HA、LN、PP及C水平差异均无统计学意义(P值均0.05)(表1)。因肝组织病理结果为S4的病例数较少(n=3)，所以对S4与S3组病例合并为S3组，患者根据肝组织病理纤维化分期结果分为S1、S2与S3共3组进行统计分析。HBeAg阳性组患者中4例S1(22.2%)、8例S2(44.4%)、6例S3(333%)，HBeAg阴性
5、组患者中3例S1(300%)、4例S2(40.0%)、3例S3(30.0%)，两组患者间的肝纤维化分期分布差异无统计学意义(2=0129，P=0720)。22不同纤维化分期实验室数据分析由于HBeAg阳性、HBeAg阴性患者之间纤维化程度差异无统计学意义，故对两组患者进行合并分析。结果提示S1、S2及S33组间HA及LN水平存在明显差异，其中S3组患者水平最高，分别达(16941663)ng/ml以及(1492851)ng/ml，均较S1与S2组明显升高(P值均005)，而3组间其他实验室指标ALT、HBVDNA、PP及C水平差异均无统计学意义(P值均0.05)(表2)。23血清学检测与肝纤维
6、化分期相关性分析对血清中ALT、HBVDNA、HA、LN、PP及C水平与肝组织纤维化分期进行相关性分析。结果显示，肝纤维化分期S与HA、LN、PP及C水平均呈正相关(P值均005)。3讨论至今我国对于CHD的研究如流行病学、临床特征等报道较少。作者前期研究发现，广东省慢性HBV感染者中HDV流行率并不低，到达65%，且CHD患者中显著性肝纤维化发生率到达886%13。因而在临床工作中与CHB患者类似，对于提示存在显著性肝纤维化的CHD患者应进行抗病毒治疗以减缓病情进展，减少肝脏并发症的发生。但由于肝活组织病理学检查存在较大局限性，同时国外关于该类患者肝纤维化程度与肝纤维化血清学指标之间的关系报
7、道不多，而国内尚缺乏类似的研究分析。作者既往对CHB患者发现HBeAg阴性较HBeAg阳性患者年龄较大、HBVDNA复制水平降低14，与本次对CHD患者的研究结果类似，但其他实验室指标两组间差异无统计学意义。同时既往研究提示HBeAg阴性患者纤维化程度较高，考虑HBeAg阴性CHB患者具有感染时间长、年龄较大、中重度肝炎及肝硬化的比例较大，多伴有HBV前C区变异等特点，其肝组织纤维化程度较高可能与此有关。Mumtaz等15研究发现，HBeAg阴性、HBV/HDV合并感染者肝硬化比例更高，进而揣测HBeAg阴性患者病情较重。Heidrich等16则发现HBeAg阴性与HBeAg阳性两组HBV/H
8、DV合并感染者之间的疾病进展差异无统计学意义。而作者进行小样本量研究结果则提示CHD患者中，HBeAg阳性组与HBeAg阴性组患者纤维化程度差异无统计学意义。综上所述，HBeAg阳性与HBeAg阴性组患者之间的疾病进展及预后能否存在差异，仍需大样本量长期跟踪随访求证。至今有关CHD患者肝脏病理学特征的研究报道较少。由于本研究为回首性观察，既往无保留CHD患者血清，且至今国内尚缺乏检测HDVNA商品化试剂盒，因而并未进一步分析HDVNA与肝纤维化的关系。但既往Zachou等17对80例多种族构成的CHD患者进行分析，结果发现临床实验室指标及血清HDVNA水平并不能反映肝脏组织炎症及纤维化程度。本研究结果则提示血清纤维化指标HA、LN、PP及C均与肝纤维化呈正相关，结合不同纤维化分期之间HA与LN水平存在明显差异，进而揣测HA、LN水平可能可作为较准确评估CHD患者肝纤维化程度的血清学指标。综上所述，通过以上对多种实验室指标与CHD患者肝组织纤维化程度的关系研究发现，CHD患者不同肝脏纤维化分期之间血清HA、LN水平差异具有统计学意义，且与肝纤维化程度正相关，因而可能作为评估该类患者肝纤维化程度的血清学指标。