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1、儿童急性髓系白血病免疫表型特点探究【摘要】目的：分析儿童急性髓系白血病免疫表型特征，讨论其临床意义。方法：采用四色流式细胞术双参数散点图设门方法，对例儿童患者幼稚细胞进行免疫表型检测，对抗原表达情况进行分析。结果：在例儿童急性髓系白血病患者中，髓系特异性抗原、和的表达最常见，分别达、。造血干祖细胞抗原、阳性率分别达、和。有的病例伴有淋系抗原的表达，其中以的表达最常见占，其次为占。有淋系抗原表达患者早期抗原和抗原表达阳性率明显高于无淋系抗原表达患者。结论：免疫分型对儿童的诊断和不同亚型鉴别具有重要意义。【关键词】急性髓系白血病；儿童；免疫表型；流式细胞术急性髓系白血病是由于骨髓来源的自我更新的干
2、细胞或祖细胞恶性转化引起的克隆性疾病，表现为分化障碍、增殖过度和凋亡受抑。有的儿童白血病起源于髓系，是一类独特的血液系统肿瘤。免疫分型可利用细胞抗原表达差异来识别白血病细胞克隆的来源及分化阶段，伴随着流式细胞术，在急性白血病免疫分型研究中的广泛应用，形态学难以分类的分型检测在其诊断中发挥了重要作用。该研究采用四色和设门检测了例儿童患者的免疫表型，并对免疫分型结果以及临床意义进行了分析。资料与方法研究对象年月至年月我院收治的儿童患者例，其中男性例，女性例，年龄从岁到岁，中位年龄岁。按标准分类例，例、例、例、例、例、例。检测方法所有患者在初诊时采集骨髓标本，肝素抗凝，小时内检测。每管中参加标本及四
3、色直接标记荧光抗体。所用单克隆抗体包括多甲藻叶绿素蛋白标记的、异硫氰酸荧光素、别藻青蛋白或藻红蛋白标记的、髓过氧化物酶、及同型对照等。所有单克隆抗体及阴性对照均由美国公司。用流式细胞仪、软件获取并分析个细胞。通过设门识别幼稚细胞，分析并计算该幼稚细胞群中各白血病相关抗原的阳性率。除胞浆抗原为阳性外，幼稚细胞群中其它抗原阳性率为阳性。统计学方法应用软件进行数据统计，采用卡方检验、确切概率法检验、检验及方差分析，以为差异有统计学意义。患者的造血干祖细胞标记抗原和髓系抗原表达情况例儿童患者中，各亚型的免疫表型特征见表。造血干祖细胞标记抗原、在儿童患者中呈高表达，分别为、；但在例患者中和的阳性率分别为
4、和，明显低于其他亚型，且在例中、表达均明显高于和。例儿童患者中主要表达的髓系抗原有、，分别达、及。和主要在和中表达；主要在、中表达，分别为、；和同时阳性表达多见于和。患者淋系抗原表达情况在例儿童患者中，有伴淋系抗原表达；以表达最高，占，其次为、。例、例和例不表达，其他亚型中均可见不同程度表达，最常见于、。最常见于、，其次为、。例患者中，表达于患者。所有淋系抗原中阳性率最低，见于例。另外个淋系相关抗原共表达者也较多见，共表达者例例，例，例，例，例；共表达者例例，例；共同表达者有例例，例。组和患者临床特征的比拟根据淋系抗原表达情况，将患者分为两组：组和组。例儿童患者临床生物学特征见表，其平均年龄、
5、男女比例、平均白细胞数、平均血红蛋白水平、平均血小板数、平均骨髓原始细胞百分比在和两组间均无显著差异均。然而，组及阳性表达率明显高于儿童患者，差异有统计学意义均。随着细胞免疫学的迅速发展，流式细胞仪广泛应用于白血病的临床诊断和科学研究中，免疫分型已成为诊断白血病的重要标准，它有利于对白血病做出更准确的分型。本研究对例儿童病例中免疫分型结果进行分析，其中髓系抗原、在各亚型中均有较高的阳性率，分别达、。髓系相关抗原的表达可反映急性髓系白血病的细胞起源，而不同的髓系白血病往往停滞在细胞分化的不同抗原表达阶段，因而可通过相应的抗体对细胞发育阶段进行鉴别。和抗原表达见于分化较低的类型，如、。患者的免疫表
6、型有一定特性，、高表达，而、很少表达。例病例中有例与均为双阴性，因而强自发荧光、与双阴性并且表达相关髓系抗原，对于与其他亚型的鉴别诊断具有一定参考价值，。同时例病例中有例为阳性，高于文献报道成人中的表达。在患者中呈高表达，阳性率为。作为单核巨噬细胞系统相关的分化抗原，在、中阳性率分别为，与其他类型患者比拟差异有统计学意义。另一单核细胞分化抗原在和的阳性率仅为和，固然与其他类型相比差异有统计学意义，但其阳性率偏低，这主要是由于主要强表达于成熟单核细胞，而在原始、幼稚单核细胞外表低表达。关于患者淋系抗原表达情况，本组资料中伴个淋系分化抗原的占，与文献报道的成人中表达淋系抗原相比明显增高，最常见的是
7、和。是神经细胞黏附分子的异构体和自然杀伤淋巴细胞的标志。抗原在急性髓细胞性白血病和其他恶性肿瘤细胞均有不同程度表达，的神经黏附特性使阳性表达的肿瘤细胞具有高度侵袭性，。本研究中的阳性率为，主要在、和中表达。是淋巴细胞外表抗原，但近年来，研究以为具有多项分化潜能的造血干细胞也表达抗原。本研究中，的阳性率为，主要表达于，其次是、，与文献报道基本一致。白血病免疫分型综合了流式细胞术高度灵敏性和单克隆抗体高度特异性的特点，提高了白血病诊断的准确性。本研究检测结果显示，在不同亚型的中，存在非同期抗原共表达、穿插系列抗原表达、抗原过度表达、抗原表达缺失等，提示白血病细胞外表分化抗原的不均一性，白血病细胞分化经过中在免疫分型方面具有异质性，这些也促进了抗体积分系统诊断标准的制定和在临床的应用。总之，尽管目前有些免疫表型与临床疗效的相关性仍存在争议，但免疫分型已成为急性白血病正确分型诊断的重要根据。