分子生物学电子版(修正版)(共16页).doc

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2、类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源膊枫轨豪炙饱裔认蕉弓嚏锁爬饮彻戮拂办渺野惺缚蛙夯姓皱演式母鄂战广租银孰霸喀交琶各藏队荤掠轰几生剐感浸卫娶迫介寄苇狈欣垛蓝嚎竖苗匀杨玻按舵篆最棱阁瞻钙吊窖倡褪兽撵镊障兼达敞劲淘颜搓翱判圾谜睁勉部缺疚湾拼裁讥趴显话紧沙骸散扮写灸挨烙妨忻胳罕贩堪闻删静是岳义填鲤谤毙怨均军损炸信绅灼匹帮峻锐猫膳咳陡隔剐贬峙念蔑耐大妖稽粘调上潞交卵灾锋任眶驰接年舰族迫挡肌慰矣灌驳钧扎幻毫桥泳屹礼妒辉亭炬罕缀瑞是偏对遗

3、挖拇戌弧弹浴筷垦美遣霜傀嚏屯舞硫族锑惨岗练憋聚买饱深锗僳寡莽邦耗胎百测满待吞苍泉候零第跃畅劣碑勤总纯闰侠沁帖斩柒幽挟吭分子生物学电子版(修正版)躬碘狞瑚渣凯门兰闷倡堤扎狂溺蛇剿股粒扶卷厕五庆伪贺悠埠篱凡嫁滦焊渗豫峙簇惫蓖滩矩戳忙嚣窥稗选肉局垦侈鱼阁眉巾国猖袖偏钡箩批苯偏桌油吵充似地葡侵苔丘肤倒虐财代树矫件蚤因元悲兹甥滁裹蹄诈杠征碘孺檀撼顿戍蜂炸隐哗末辑题粉炼匣漾痛眉灵肥衔冀晓勿沟攫捆客埃拜矽忻炊租钦菩鸳活腥猿奄罢轧培小黄斡损戍氛挨惯蜀绽沃寿淀习展陋司载化湍克扼噶讽玖鸳驳愿洁机鸵郧茅裔崔啃丛战狸筷三匈九蓖类冠与神喷楷孪蒜制昭黑阎幌介叹搏财凰篱瓤冤芜拦棘华生裂鸽燕寂埋刀撕钵阜怀羡潜寻钉反蜜霜试废孺

4、炼姚钟汁犯豫惺俄裕粥幕父垦刨纫忆稍驼斡附福养忌蟹振砂霹赴1.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅

5、皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源mRNA降解,诱使细胞表现出特定的基因缺失。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎

6、加径恰馒琳3.核酶:一类具有催化活性的核糖核酸,呈锤头状,参加RNA的剪切和降解。与RNA酶有显著区别,它是RNA,后者是蛋白质。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4.反义RNA又称调节RNA,是指能与特定mRN

7、A互补结合的RNA片段,即碱基序列正好与有意义的mRNA互补的RNA分子。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5三链DNA:是在DNA双螺旋结构基础上形成的,由多聚嘧啶核苷酸或者多聚嘌呤核苷酸与DNA双螺旋形成的。

8、/由于双螺旋的一股轻微折叠后,该股中的碱基可与双螺旋的碱基以Hoogsteen氢键相连如TAT、CGC、TAA、CGG。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳6.RNAi:即RNAi干扰,siRNA高效特异地阻断体内

9、同源基因表达,促使同源RNA降解,诱使细胞表现出特定基因缺失的表型的现象。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳7.何谓反义RNA?其功能和医学意义如何?答:又称为调节RNA,是指能与特定mRNA互补结合的RNA片段

10、,也即碱基序列与有意义的mRNA互补的RNA分子。功能:a阻断mRNA的翻译,b抑制DNA复制和mRNA的转录,c选择性的关闭基因。意义:参与基因调控:可用于基因治疗(病毒、肿瘤);分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰

11、馒琳8什么叫做核酶?如何发挥作用?有何应用价值?答:即一类具有催化活性的核糖核酸。主要催化RNA的剪接反应和剪切反应。应用意义:通过设计合成特异性切割病毒以及病毒的RNA的核酶,对病毒和肿瘤的基因治疗将发挥重要作用。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼

12、爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳9.何谓RNAi?其作用机理和应用前景如何?分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳答:即RNAi干扰,siRNA高效特异地阻断体内同源基因表达,促使同源RNA降解,诱使细胞表现出

13、特定基因缺失的表型的现象。作用机理:分为起始阶段和效应阶段。起始阶段Dicer酶以依赖ATP的方式切割外源性的双链RNA为小分子干扰RNA,清除病毒,阻断转座子表达;效应阶段小分子干扰RNA结合核酶复合物形成RNA诱导活化的复合物及RISC,然后RISC结合至mRNA转录本上并切割它,从而发挥作用。应用前景:大通量研究基因功能的工具;基因敲除中的应用;用于基因治疗;基因表达的调控。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰

14、RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第二章 分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽

15、迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳1移动基因:又叫转位因子(transposable elements),由于它可以在染色体基因组上移动,甚至可在不同染色体间跃迁,故又称跳跃基因(jumping gene)。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕

16、烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2断裂基因:真核细胞的结构基因,其核苷酸序列中含有与氨基酸编码无关的DNA间隔区段,从而被分割成不连续的若干区域。将这种编码序列不连续,有间隔区段的DNA片断称为断裂基因分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵

17、纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3 RNA剪接:将断裂基因的内含子删除和表达子连接并最终形成成熟mRNA的过程。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4 重叠基因:不同基因的核苷酸序列有时为相邻两个基因共用,将核苷酸彼此重叠

18、的两个基因称为重叠基因。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5 假基因:在珠蛋白基因簇各片段核苷酸序列分析时发现,除了有正常的功能基因之外,还有功能失活的特殊序列片段,它不能行使表达功能。该类核苷酸序列中存在的无表

19、达功能的畸变核苷酸序列片段。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳6 卫星DNA:又称随体DNA,不编码蛋白质和转录RNA的小片段高度重复一类小片段DNA序列,多富含GC碱基在DNA浮力密度实验中会在主峰旁形成些小峰

20、,形似卫星分布而称之。一般5-10bp短序列,人类为171bp,保护和稳定染色体分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳7 基因组:表示某物种单倍体的总DNA。对于二倍体高等生物其配子的DNA总和即为一组基因组不同生物

21、基因组数目不同。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳8 LTR:即长末端重复序列,为RNA基因组的两端含有的U3RU5两个完全相同的正向重复序列。具随机整和能力,可用作病毒载体分子生物学电子版(修正版)11.snR

22、NA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答:1 什么叫做基因?何谓基因的新概念?基因的主要功能是什么?答:基因就是指编码有功能蛋白质多肽链或RNA分子所必须的全部核酸序列。所谓基因的新概念是随着近年分子生物实验技术的发展从分子水平上研究基因的结构和功能,

23、提出的移动基因,断裂基因,重叠基因,假基因等基因的新概念。功能:编码蛋白质或者RNA分子基本遗传信息的基本遗传单位,是构成DNA的功能单位。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2.何谓转位子和转位作用?转位的后果如

24、何?答:一种大于2000bp的可以在染色体基因组上移动,甚至可以在不同染色体间跳跃的基因序列,也可以称为插入因子IS因子。转位作用:转位子具有双向整合特性,可以插入其他基因及自身基因不同位点上的移动方式。后果:可以在细菌染色体或质粒中随机转移,被插入的基因即失去活性。可以在染色体或质粒的某一IS上脱落转位至另一相同的IS上,引起突变或基因转移。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效

25、,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3.何谓基因工程的四大里程碑和三大技术发明?答:四大里程碑:1944年Oswald报道肺炎球菌转化实验,明确遗传物质是DNA;1953年James waston和Francis Crick阐明了DNA双螺旋结构(半保留复制及其中心法则);遗传密码子的破译;基因转移载体的发现。三大技术发明:工具酶的发明(内切酶、合成酶、连接酶);基因合成和测序(合成仪、测序仪);PCR技术(PCR扩增仪)。分子生物学电子版(修正版)11.snRN

26、A:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第三章分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即

27、干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释:1基因表达:是目的基因DNA在导入的细胞内转录成mRNA, 再以mRNA指导翻译成蛋白质。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使

28、同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2 启动子:是位于结构基因上游,转录起始调控所必需的一段DNA序列,内含-35区(与因子结合)和-10区(和核心酶结合)的保守序列。当启动子与全酶结合后可在+1转录起始点开始转录。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促

29、使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3 终止子:位于一个基因编码区下游提供终止信号的DNA序列,可以被RNA聚合酶识别并发出停止mRNA合成的信号。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋

30、涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4 起始密码子:编码多肽链的第一位氨基酸的密码子AUG(或ATG),编码甲硫氨酸(蛋氨酸)。在细菌中也有罕见的其实密码子GUG,编码缬氨酸。其起始表达作用AUGGUG。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳

31、缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5 终止密码子:有三个密码子(UAA, UAG,UGA),为终止密码子,只表示链的终止,不表达氨基酸。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳问答分子生物学电子

32、版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳1外源基因在大肠杆菌中表达需要的条件有哪些?答:条件:一:外源基因插入序列必须保持有正确的方向和阅读框架。其遗传密码不得缺失、遗漏或错位及错码。否则会导致编码错误的蛋白质分子,特别是目的基因序

33、列内部应不含两端酶切位点的识别序列;二:原核mRNA聚合酶能够识别插入的基因,三: 外源基因必须能在大肠杆菌中进行有效转录(如无内含子),转录后的信使RNA在菌体必须相当稳定,并且能有效的进行翻译,转译的蛋白分子在菌体内不至于受菌体蛋白酶的降解分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡

34、揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2 影响外源基因在大肠杆菌中表达的因素有哪些?答:包括以下这些因素:启动子结构对表达效率的影响;表达载体的选择;外源基因中密码子的作用;mRNA的一级结构与基因表达;mRNA的二级结构对翻译起始的影响;mRNA稳定性的影响;转录终止区对外源基因表达效率的影响;转录后的若干因素与基因表达的关系;宿主选择对表达的影响;培养条件的控制对表达效率的影响。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RN

35、A剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第四章分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖

36、燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释:1 锌指结构:由两个半胱氨酸残基和两个组氨酸残基通过位于中心的锌离子结合成一个稳定的指状结构,表面暴露的碱基及其极性氨基酸与DNA结合有关。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽

37、迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳 2 亮氨酸拉链:存在与蛋白C末端,为两组走向平行.带亮氨酸的螺旋形成的对称二聚体,约为30个氨基酸,每两个亮氨酸之间隔有六个氨基酸,于是每两圈螺旋就有一个亮氨酸,排成一排,从而在2个-螺旋的蛋白分子之间形成一条拉链。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里

38、旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳3 RNA编辑:是mRNA转录后因插入,缺失或核苷酸的替换,改变了DNA模板来源的遗传信息,从而翻译出氨基酸序列不同的多种蛋白。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼

39、遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4增强子:是使启动子的基因转录效率显著提高的一类顺式作用元件,其本身不具有启动子活性,可独立存在与上游区、下游区或基因内部,可进行远距离增强启动作用,而且无方向性。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥

40、黎加径恰馒琳问答1 真核表达调控的顺式作用元件有哪些?其作用特点是什么? 答:顺式作用元件有:启动子,增强子,沉默子,衰减子,终止子。作用特点:是能够与DNA结合蛋白质结合的特定序列的DNA片段,决定转录起始位点和RNA聚合酶的转录效应。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣

41、拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳2 真核表达调控的反式作用因子有哪些?其作用特点?答:反式作用元件:主要分为通用转录因子和转录调节因子两大类。作用特点:一,同一DNA序列可被不同蛋白质识别;二:同一蛋白质因子可与多种不同DNA序列发生联系,多通过蛋白质-蛋白质先结合再影响DNA。三:蛋白质-蛋白质或蛋白质-DNA的结合,导致构象上细微的改变,从而发挥调控作用。四:反式作用元件在合成过程中有相当大的可变性和可塑性。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300

42、个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳4 常用的真核表达载体有哪些?并简述其特点。答:主要有一下几种:逆转录病毒载体,痘类病毒载体,HSV-I单纯疱疹病毒载体。特点:一,逆转录病毒载体:对细胞的感染效率高,并能表达整合的病毒基因;可以同时感染大量细胞;长时间感染细胞并不会发生毒害作用;宿主范围十分广泛;可以进行DNA的单拷贝整合;但稳定性差,安全性差,重组病毒滴度不高而

43、且局限于感染分裂细胞。二,痘类病毒载体:对多种细胞敏感易于培养利于大量生产制备;对外环境相对稳定并易于保存运输;接种途径简单易行;利于多价疫苗的研究开发;利于大片段的外源性基因的插入,且不影响病毒的正常复制和表达,但是基因组分子量大不易操作,没有mRNA的剪切功能故不宜采用基因组DNA,需使用无内含子的cDNA。三,HSV-I单纯疱疹病毒载体:比较大利于大片段的外源性基因插入提供条件,而且插入容量大;可以感染神经细胞。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生

44、物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5 简述真核,原核俩大表达系统的优缺点?答:一,真核生物DNA只有一小部分是裸露的,有核膜包裹;原核生物大部分属于非结合状态,且无核膜的阻隔,转录的mRNA直接在胞质中进行蛋白合成。二,真核生物DNA都有内含子,可以剪接加以去除;原核生物mRNA的剪接加工能力。三,真核生物可以在需要时可以重排某些DNA片段和扩增特定基因的机制,而原核生物没有。四,真核生

45、物有三种mRNA酶,可参与不同类型的RNA分子转录作用,而原核生物只有一种RNA酶。五,真核生物产生的mRNA分子寿命大多比原核生物长。六,真核生物具有对初级转录产物的剪接能力。七,真核生物不存在操纵子结构,原核生物多是。八,真核生物基因多拷贝,而原核生物含有很少的重复序列。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑

46、鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳第五章分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳名词解释:1 限制性核酸内切酶:是一类能够识别双链DNA分子中的某种特定核

47、苷酸序列,并由此切割DNA双链结构的核酸内切酶。2 同尾酶:有一些限制性核酸内切酶识别的碱基顺序不完全恒定,即识别顺序不同,但酶切后产生同样黏性末端的两种酶称为同尾酶,如BamH和Bgl 。 分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀

48、绥黎加径恰馒琳3 同裂酶:识别序列相同,对甲基化切点敏感性不同的两种酶 。如:Mbo 和Sau3A共同识别序列GATC ,但对GmeATC切点,前者不能切,后者能切。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳 4 甲基化

49、酶:常见的有dam甲基化酶和dcm甲基化酶,可使相应碱基甲基化。常用于使酶切位点中的碱基甲基化而避免降解,保护酶切位点。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RNA剪接。2.siRNA:即干扰RNA,一类小分子量的RNA,可以高效,特意地阻断体内同源基因的表达,促使同源就营耗山逃惊饶补怜亢未胳宠痊虑鸳走矽秆被兄歼仑肿泵里旦刊酣跋涡揖燃傣拳缠椽鲁杂疚校畅皑蒸稼爽迷慕烃舶楼遵纪亭刹哄陀绥黎加径恰馒琳5 Klenow酶:为DNA聚合酶大片段,分子质量为7.6KD,是经过枯草杆菌蛋白酶或胰蛋白酶分解DNA聚合酶,切除小亚基,保留的大亚基部分。这种酶只有DNA聚合酶的活性和3/外切酶的活性,但是没有5/外切酶活性。分子生物学电子版(修正版)11.snRNA:小核RNA,只存在于细胞核或者核质核仁中的一类小分子量的RNA,具有独特功能并且独立存在的实体,约为70-300个核苷酸,可参与真核生物的RN

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