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1、精品学习资源试验五 离体小肠平滑肌的生理特性及药物作用的观看【试验目的】学习一种离体组织器官试验方法; 观看离子成分、 酸碱度、温度、乙酰胆碱、去甲肾上腺素对离体家兔小肠平滑肌的作用; 分析平滑肌活动的某些生理特性及理化环境转变对它的影响;【试验原理】消化道平滑肌具有自动节律性、 较大的舒展性, 对化学物质、 温度及牵张刺激较为敏锐等生理特性;【试验材料】试验药品:台式液、 0.01%去甲肾上腺素溶液、 0.01%乙酰胆碱溶液、 0.01%阿托品溶液、 1.0%氯化钙溶液、 1mol/l盐酸溶液、 1mol/l氢氧化钠溶液;试验器材:恒温平滑肌槽、小烧杯、污物杯、张力换能器、双凹夹、温度计、B
2、L-420生物信号系统、丝线等;【试验步骤】1. 恒温浴槽的预备工作;2. 标本制备;3. 仪器连接与设置;4. 启动电脑,打开 BL-420 生物信号系统,调剂参数,开头记录;观看项目1. 自动节律性收缩,描记一段离体小肠平滑肌的收缩曲线,观看其节律性收缩及张力水平;2. 观看胆碱能受体兴奋剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用;(1) 乙酰胆碱的作用: 向浴槽标本管中加入 0.01%的乙酰胆碱溶液 12滴,观看肠管张力和收缩有何变化;作用产生后,洗涤三次,进行下一项试验;2 阿托品的作用: 向浴槽标本管中加入 0.01%的阿托品溶液 23 滴, 两分钟后,再加入 0.01%的乙酰胆碱溶液 12
3、滴,观看肠管张力和收缩有何变化;与 1比较结果后,洗涤三次,待其活动稳固后,进行下一欢迎下载精品学习资源项试验;3. 观看肾上腺素能受体兴奋剂对肠断收缩的影响及阻断剂的作用;去甲肾上腺素的作用:向浴槽标本管中加入0.01%的去甲肾上腺素 23滴,观看肠管张力和收缩有何变化;然后洗涤三次,待其活动稳固后, 进行下一项试验;4. 观看钙离子对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入1%的氯化钙溶液 23 滴,观看肠管平滑肌的反应;然后洗涤三次,待其活动稳固后,进行下一项试验;5. 观看酸碱度对肠断收缩的影响向浴槽标本管中加入 1mol/l 的盐酸溶液 12 滴,观看平滑肌的反应, 待作用显现明显后, 在此
4、基础上, 加入 1mol/l 的 NaOH溶液 12 滴,观看平滑肌的反应;【试验结果】1. 乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强;2. 阿托品和乙酰胆碱对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动不受影响;欢迎下载精品学习资源3. 去甲肾上腺素对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动减弱;4. 钙离子对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动加强;5. 酸碱度对肠断收缩的影响:小肠平滑肌收缩活动先减弱后复原;欢迎下载精品学习资源【留意事项】1. 肠管勿牵拉过紧或过松,且连线必需垂直, 且不得与浴槽的管壁等接触,以免摩擦;2. 浴槽中的液体的量应以高过肠断为准,并保持液面高度一样;3. 药物应滴在肠
5、管邻近,药物作用假设不明显,可以不加药物,但不行一次过多;4. 每次加药显现反应后,应必需立刻更换浴槽内的台式液至少三次,待肠管恢复稳固活动后,再观看下一个项目;【试验摸索】1. 哺乳动物离体器官或组织在灌流液中保持良好状态应具备的条件?温度:本试验掌握恒定温度 37 度;湿度:要时刻记住用相应的润湿液润湿, 本次试验用哺乳动物的台氏液; PH:要与哺乳动物体液相像; 防止不必要的刺激: 不要用手或者是金属触碰; 离子成分与浓度: 要与相关的动物体液相像, 本试验是台氏液;2. 每一项试验结果的分析及缘由说明:滴加乙酰胆碱后小肠平滑肌收缩明显增强,这是由于乙酰胆碱与小肠平滑肌肌膜上的 M受体结
6、合后,可以在膜去极化未到达肯定的电位时提前激活更多的慢钙通道, 使大量的钙离子内流, 进而使动作电位产生的频率增加,所以小肠的平滑肌收缩增强; 先加阿托品再加乙酰胆碱后对小肠平滑肌的收缩不影响;由于阿托品是乙酰胆碱的抑制剂, 故先加阿托品再加乙酰胆碱, 乙酰胆碱对小肠平滑欢迎下载精品学习资源肌的收缩不影响; 加入去甲肾上腺素后, 可见离体肠管活动减弱, 去甲肾上腺素,主要有和肾上腺素能受体,去甲肾上腺素与2 肾上腺素受体结合占优势,引起平滑肌的舒张,故平滑肌收缩活动减弱;加入CaCl2 后,离体肠管活动增强;这是由于加入氯化钙后,细胞外液Ca2+浓度上升,就 Ca2+内流增加, 使得细胞内液中
7、 Ca2+浓度上升, Ca2+与钙调蛋白结合增加,促进了横桥的激活, 因而收缩力增加; 滴加盐酸后小肠平滑肌收缩明显减弱, 由于加入盐酸后, 小肠所处环境的氢离子浓度上升, 氢离子可以影响慢钙通道的开放, 是钙离子内流削减,进而影响动作电位产生的频率, 另外氢离子能与钙离子竞争钙调蛋白结合的位点,使肌凝蛋白 ATP酶活性下降、 和肌丝滑行的生化过程,以小肠的平滑肌收缩显著减弱; 几秒后加入氢氧化钠后中和了氢离子,使小肠所处的环境复原正常,所以其收缩渐渐趋于正常;3. 维护哺乳动物离体小肠平滑肌活动和维护离体蛙心活动所需的条件的不同: 心脏使用的是任氏液,而小肠使用的是台式液,心脏可以直接暴露在
8、空气中,而小肠需要浸泡再台式液中, 心脏可以在一般室温下进行试验, 而小肠需要在接近 37的水温下且要不断通气才有较为剧烈的收缩活动;4. 钙离子在平滑肌收缩中起的作用:当平滑肌细胞受刺激而兴奋时, 钙离子由膜外进入膜内, 并在胞内基质一种磷酸激酶的作用下,使肌凝蛋白磷酸化,从而诱发肌浆网中的钙离子进一步释放, 肌钙蛋白分子的 C亚单位与钙离子结合, 导致肌凝蛋白和肌动蛋白相结合, 造成平滑肌收缩;5. 去甲肾上腺素、乙酰胆碱对小肠平滑肌和心肌的作用的不同:去甲肾上腺素对心肌的作用是正性的变时、 变力、变传导作用, 对小肠平滑肌的作用是减弱小肠平滑肌的活动; 乙酰胆碱对心肌是负性的变时、 变力、变传导作用,对小肠平滑肌就是加强平滑肌的活动;欢迎下载