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1、艾滋病抗体检测医学科技论文(共1579字)艾滋病抗体检测医学科技论文 1.材料及方法1.1材料高质量的质控物：为保证质控物的良好质量，首先，质控物要求在220的环境下保存；其次避免反复冻融。购于卫生部临检中心。ELISA检测抗HIV试剂盒：北京万泰HIV（1+2型）ELISA抗体诊断试剂盒。96孔洗板机(芬兰丹尼公司)；MK-2型酶标仪(芬兰丹尼公司)；移液器等。1.2方法有关质控血清的制备，应在无菌条件下用含有10%小牛血清PBS缓冲液将阳性对照血清稀释成低值弱阳性,然后将稀释后的血清以每管0.5ml进行分装,并将其置20环境下保存备用。为实现对质控血清的精密性检测，在检测样品的同时，还应对
2、抗-HIV质控血清进行检测，将同时检测到的数据进行比较，以比较其精密性。洗板：洗板所用的洗液先用蒸馏水进行适当的配置以保证其PH值正常。要求浸泡时间多余45s，洗板后残液不得超过2l，也即人工扣板垫纸不湿。稀释方法：由于抗体检测实验所加样品仅需10l，少加或者多加都会造成不同程度的误差，而影响到抗体检测的质量。由此，移取精准的样品的移液器在获取样品量方面十分重要。因此，应确保以下几点：一保证移液器和移液头间连接的严密性；二取样时为避免移液器粘带血清，应保证移液头恰与液面接触；三为避免对灰带区的误判，在稀释样品液时不能使用滴瓶，而采用移液器进行样品的滴加，以保证抗体检测质量的稳定。基于以上要点，
3、在板中加入100l稀释液再加10l标本,同时吹吸3次混匀。显色：ELISA反应中最佳的色原底物是TMB。但在加入终止液15min后浓度过高的就会产生灰褐色絮状沉淀。因此，处理严格按照使用说明书来控制显色的温度、时间等外在因素，以避免人为因素所造成的吸光度等的升降外，还应在加入终止液的15min内及时进行比色。2.结果2.1稳定性试验使用制备的质控品对艾滋病抗体每隔一个月进行检测。当S/CO波动范围未超出质控范围，也即实验的稳定性检测属真。2.2制作质控图在使用ELISA质量控制方法来控制艾滋病抗体检测实验室质量时，为保证在实际中获得良好的效果，首先应做好OCV及RCVK来确定失控的标准，然后利
4、用Westgard规则判定失控，使用生化L2J图进行。由于采用ELISA方法进行实验室质量控制的目的在于检测艾滋病抗体，故而，应确保这一方法的敏感性。可采用许斌提出的临界值血清界定法，试剂所设阴阳对照为内对照,另设临界值、高值阳性和2份正常人阴性对照,作为外对照与标本同时检测,临界值S/CO>1,高值阳性S/CO>10,正常人阴性对照A值在0105001100，当其中所存在的各项中有一项不符合标准即为失控。临界值为敏感度监控、阴性对照为特异性监控、高值为“HOOK”监控，由此可见，临界值血清界定既反映ELISA的灵敏度又兼顾特异性。3.讨论ELISA方法检测HIV的实验室质量控制，
5、可用吸光度值来表示，还可以使用S/CO值来表示。当前，艾滋病抗体检测一般使用ELISA法，这一方法具有灵敏度较高的特点，非常适于当前众多血站系统对HCV、抗2HIVHBsAg等的检测。本人依据多年的指控监测工作经验认为，在使用较强阳性的质控物进行作图时，以上两种方法都会产生较好的实验效果；但是，对于一些中性、弱阳性的质控物进行作图时，S/CO值的表示方法更为科学、准确。但是在实际的实验室检测中，也存在着众多影响这一方法有效运用的不利因素，因此，加强艾滋病抗体检测的实验室质量控制具有现实性的意义。 阅读次数：人次 药学毕业论文医学检验论文心理健康论文临床医学论文护理医学论文医学教育论文医学科技论
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