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1、牛人工授精技术操作规程人工授精是用器械采用公畜精液，再用器械把精液输入到发情母畜生殖道内，以代替公母畜自然交配一种配种办法。人工授精不但有效地变化家畜交配过程，更重要是提高了公畜配种效能。人工授精只用于健康公母畜，可防止各种疾病，已成为当代畜牧业重要技术之一。一、牛发情鉴定母牛发情周期平均为21天，正常母牛发情周期间隔时间变化很小，牛发情期普通为1.53.5天。母牛发情时兴奋不安，吼叫，爬跨其她母牛，外阴部光滑肿胀、发红，阴道粘膜湿润，分泌出清亮粘液，产奶量下降，食欲减退，嗅其他母牛尾根。母牛发情时其卵泡开始发育成熟最后排卵，是由于卵泡受到脑垂体前叶分泌促卵泡激素和促黄体素刺激而实现。普通依照
2、牛外部体现来判断母牛发情，但为了拟定排卵详细时间，则必要作直肠检查，触摸卵巢、卵泡发育状况。 二、最适输精时间输精时间普通因母牛年龄、品种、胎次、营养水平不同而有所差别，普通母牛发情期中输精最佳时间是发情开始后12小时到发情终结或排卵前12小时内。 三、器械和药物准备：1、药业配制75%酒精及75酒精棉球；1/3000新洁尔灭溶液；生理盐水棉球。2、器械30L液氮贮存罐；牛用输精器；高压灭菌器。3、器械洗涤人工受精用器械在每次使用后来，用洗涤剂洗刷干净，并需保持清洁、干净。四、冷冻精液贮存1、在液氮贮存馆内贮存冷冻精液，必要切实地浸没于液氮中。2、取放贮存冷冻精液提筒只容许上提到液氮管颈段之下
3、，禁止提出罐外，在罐内脱离液氮时间不得超过10s。3、在向另一液氮贮存罐内转移冻精液时，精液提筒不得脱离液氮5s。4、取放冷冻精液之后，应及时盖上罐塞，以减少液氮消耗及防止异物落入罐内。5、严防不同品种、个体公畜冷冻精液混杂，难以辨识。6、对长期用作贮存冷冻精液液氮罐应定期清理和洗刷。五、解冻解冻时把细管精液从液氮中取出，操作时间越短越好，时间过长，可影响其她未解冻精液品质。解冻时把细管浸入40左右温水中15秒左右，待管内精液颜色发生变化后即可取出，在解冻时不要让精液升温过高。细管精液取出后，先用纱布擦净细管表面水，握住手掌稍微揉一揉，最后将细管封闭端剪掉，推动输精器里面，准备输精。六、输精时
4、间选取最适当时间输精，才干保证生活力强精子和卵子在受精部位相遇，提高受胎率。输精时间太早，精子丧失受精能力或死亡，不能使卵子受精;输精时间太迟，虽然精子受精能力强，卵子排出时间太久，卵子衰老了也不能受精。母牛排卵后受精能力为2024小时，精子在母牛生殖道中受精能力为2850小时，普通母牛发情初期输精受胎率低，发情后12小时或排卵前8小时输精最为适当。输精办法母牛需经发情鉴定及健康检查后才干予以输精。接受输精母牛先要保定，牛普通站在输精架内输精，冲洗牛外阴部并消毒，输精员指甲要剪短磨光，洗涤擦干，并用75%酒精消毒。戴长臂手套采用直肠把握法输精时，先由左手掏出粪便，再伸入直肠，寻找并握住子宫颈，
5、用胳膊压开阴门，右手持输精导管插入阴门，先向上倾斜避开尿道口，再转入水平直向子宫颈口，借助进入直肠内一只手固定和协同动作，将精液输入子宫内或子宫颈56厘米处，最后轻轻地拉出输精器。输精母牛须做好记录，各项记录必要准时，精确，并定期进行记录分析七、讨论和小结为了提高受胎率，必要掌握影响受胎率因素。决定受胎率重要因素有：种公牛精液品质，母牛发情排卵机能，人工授精技术操作质量，输精时间等。牛冷冻精液人工授精技术操作规程1范畴 本原则规定了人工授精站具备条件、输精器械清洗消毒、冻精运送保存、母牛发情鉴定、母牛输精操作、母牛妊娠检查。 本原则合用于全省各养牛场、户母牛冷冻精液人工授精技术操作。 2人工授
6、精站具备条件 2.1 人工授精站应建在交通以便、能繁母牛相对集中地方。人工授精站建立应符合本地良种牛推广和改良规划。 2.2从事牛冷冻精液人工授精操作人员须获得县级畜牧行政主管部门颁发上岗证。 2.3人工授精站设立冻精贮存室和输精操作室。 2.3.1冻精贮存室安装空气消毒设备，室内保持清洁干燥，窗明台净。 2.3.2输精操作室设在向阳、干燥地方，室内安装母牛保定架。 2.4 人工授精站应配备液氮生物容器、显微镜、卡苏枪、镊子、细管剪、温度计等器械。 3输精器械清洗消毒 3.1 各种器械用后先用肥皂水或2小苏打水洗刷除污， 再用温开水冲洗干净。 3.2 玻璃、金属器械、胶球(用纱布包好)和布类用
7、蒸汽灭菌三十分钟或干热灭菌。金属和玻璃器械也可用75酒精擦拭和吸注消毒，并在酒精火焰上烘干。 3.3输精器用后及时清洗、消毒。每配种一头母牛，须使用一支消毒过卡苏枪。塑料外套管只能使用一次。 4冻精运送保存 4.1冻精要贮存在装有足够液氮生物贮存容器中，定期添加液氮。容器内冻精不得暴露在液氮面外。 4.2在运送液氮、冻精时，应使用生物运送容器。用车辆运送时，除运用原保护套外，应另加木箱或其他保护装置加以固定。 4.3从容器内取冻精时，只能将提筒置于容器颈下部，用长柄镊夹取冻精。如10秒钟内尚未取放完毕，应将提筒放回液氮中浸泡一下再继续提取。 4.4、贮存冻精需向另一容器转移时，冻精最佳浸泡在液
8、氮中进行。冻精在空气中暴露时间不得超过5秒。 5母牛发情鉴定 5.1外部观测法：母牛体现出兴奋、站立不安、哞叫、食欲减退、频尿、外阴部湿润、肿胀、流透明粘液等征状，可判断为发情。 5.1.1 发情初期：母牛兴奋不安，追爬其她母牛，但回绝爬跨；*肿胀，粘液透明，不呈牵丝状，粘性强。 5.1.2 发情盛情：母牛温顺，接受爬跨，*肿胀。粘液透明，量多，呈牵丝状，粘性强。 5.1.3发情末期：母牛回绝爬跨，*肿胀消退，粘液半透明、粘稠，粘性差，牵丝较短。 5.2直肠检查法：发情母牛子宫颈稍大、较软，子宫角体积增大，子宫收缩反映明显。 5.2.1发情初期：卵泡直径0.5厘米左右，触诊时为一软化点。5.2
9、.2发情盛期：卵泡增大到11.5厘米，呈圆形，明显突出于卵巢表面，波动明显。 5.2.3发情末期：卵泡不再增大，泡壁变薄，紧张度增长，有一触即破之感。 6母牛输精操作 6.1冻精准备 6.1.1冻精应来自于获得农业部颁发种畜禽生产经营允许证冻精生产站。 6.1.2发情母牛每次输精量为细管冻精一支，冻精解冻后精子活力不低于0.3。 6.1.3用38土2温水直接浸泡30秒钟解冻细管冻精。将解冻细管剪去顶部封口后插入卡输枪，套上塑料外套管备用。 6.2母牛输精时间 6.2.1母牛适当输精时间在发情末期。 6.2.2发情母牛一种情期输精两次，其间隔时间为812小时。 6.3输精母牛准备 6.3.1将输
10、精母牛固定在保定架内，用细绳拴好尾巴拉向一侧固定。输精人员将手指甲剪短、磨光，戴上长臂手套。对输精母牛肛门及外阴进行消毒后擦干。 6.3.26.4输精办法：输精人员将一只手伸入母牛直肠内，寻找并握住子宫颈外口端，手臂往下按压使阴门裂开，另一只手把准备好卡输枪自阴门向斜上方插入510厘米(避开尿道口)，再改为平插，把卡输枪送到子宫颈外口，然后两手互相配合，使卡输枪缓缓越过子宫颈管中皱壁轮，将精液注入子宫颈内。 7母牛妊娠检查 7.1外部观测法 7.1.1母牛配种后二、三个情期仍未浮现发情者，可初步以为妊娠。 7.1.2母牛妊娠三个月后，性情变得温顺，食欲增长，被毛浮现光泽。妊娠五、半年后，腹围增
11、大，右侧腹壁突出，可在腹壁触到或看到胎动。7.2直肠检查法7.2.1母牛妊娠一种月，两侧子宫角不对称，角间沟清晰。孕角较空角稍大变粗、柔软，有液体波动感，弯曲度变小。孕侧卵巢较大，有黄体突出于表面。子宫中动脉如麦秆粗。 7.2.2母牛妊娠二个月，孕角比空角粗约两倍。角间沟平坦。孕角薄软，波动明显。孕侧卵巢较大，有黄体。孕侧子宫中动脉增粗一倍。 7.2.3母牛妊娠三个月，孕角大如耍儿头，波动感明显，空角比平时增粗一倍，子宫开始沉入腹腔，角间沟已摸不清晰。孕侧子宫中动脉增粗2至3倍，有时可摸到特异博动。牛塑料细管冷冻精液人工授精技术操作规程 家畜冷冻精液人工授精是近代畜牧科学一项新技术，新疆维吾尔
12、自治区近几年黄牛改良工作实践证明它可以不受时间、地点限制，可扩大最先进种公牛配种运用效率，有力地加快家畜配种改良进程，它比常规人工授精具备更高操作规定和科学性，为加强广大基层操作人员责任心，进一步提高细管冻精配种技术水平，使细管冻精人工授精技术操作规范化，保证冷冻精液授精受胎效果，特制定本操作规程。 1、人工授精人员 （1）人工授精人员必要具备家畜繁殖基本理论知识，纯熟掌握细管冻精人工授精各个重要技术环节。例如：细管冷冻精液保存、运送、解冻，精液品质鉴定、贮氮、贮精容器使用，母畜生殖器管解剖生理，发情鉴定、直肠把握子宫颈输精及妊娠诊断等技术，必要理解、掌握，并纯熟应用于实际中，掌握基本消毒灭菌
13、办法，控制防止和治疗母畜生殖器官传染病及母畜产科疾病知识。 （2）人工授精人员要刻苦钻研业务技术，经县以上主管部门考核合格，发给合格证书方能从事细管冻精人工授精业务，主管部门应按其技术高低分别授予不同技术职称，对工作成绩低劣，责任心不强，长期不能完毕冷配受胎任务者，应停止输精业务，进一步进行技术培训。人工授精员要相对稳定于一定区域或岗位，以利熟悉状况和巩固成果。 （3）人工授精站点及人工授精员设立应有规划，各地州县可依照自己详细状况安排实行，原则上单罐年配种量应达250头以上，单罐输精配种头数愈多，愈有助于减少配种成本。 2、细管冷冻精液剂型及质量原则当前，新疆维吾尔自治区可供采用牛冻精剂型重
14、要由两种：即颗粒冻精、细管冻精，当前重要以细管冻精为主。 （1）颗粒冻精必要达到下列原则：剂量每颗粒0.1亳升0.01；解冻活力不低于0.35（即35%迈进运动精子）；解冻后精子畸形率20%，顶体完整率40%以上；卫生指标：无国标GB4143-84规定各种传染性疫病；每毫升细菌菌落数不得高于1000个，解冻后精液中无病源性微生物。 （2）塑料细管冻精：剂量重要以0.25ML为主，每剂有效精子数不低于1000万个，其他与颗粒冻精相似。细管精液每个剂量上原则应清晰，包装完整、精确、细管封口严密、无裂痕。 3、运送 （1）购买冻精运送人员一定要理解冻精基本原理，挑选责任心强，工作细致，具备冻精检查能
15、力者承担，运送前要检查容器质量，看与否安全合用，并定期检查液氮消耗状况，及时添加液氮，运送先后一定要保证细管冻精完全浸泡在液氮中，如发现液氮消耗过多或罐外壳有水珠或挂霜，阐明罐保冷性能有问题，应及时更换。 （2）对液氮罐要细心爱护，搬运时要握住手柄，抬起罐体不得拖行、躺放、倒置、叠放，装好液氮罐子，要及时罩上皮套、棉套或装入纸盒或木箱，严防撞击或翻倒。盛有精液液氮罐禁止在阳光下直晒。 （3）冻精运送先后应办好交接手续，填写卡片、签名、精液要抽样检查，达不到质量原则应回绝接受（签名），亦不得发放用于输精。 4、保存 （1）液氮罐要专人负责保存，使用和保养，放置在室内干燥、通风和安全处，罐下应垫以
16、木板，离地面二十至三十厘米高，室内不准吸烟，不住人。 （2）为便于分发和使用冻精，罐口外面必要拴系有标签，标记品种名称、种公牛号，罐内冻精标记有冻精制作时间，解冻活力制作单位，细管（或颗粒）数量，品种代码及种公牛号等，新疆维吾尔自治区畜禽繁育改良总站生产细管冻精印字标记，顺序为日、月、年站名品种代码牛号，例如05、11、自治区改良站、XM、2415或年、月、日站名品种代码牛号。 （3） 取放细管冻精时，一定做到动作稳、准、快，在室温下，冻精由一种液氮容器转移到另一种液氮容器时，操作时间不得超过5秒钟。单个取用时不适当将整个精液袋提至液氮颈口上，暴露在空气中，精液取用或转移完毕后，及时加上盖塞。
17、如果分取精液数量较多，必要准备另一种盛有液氮广口容器，在盛有液氮容器中进行分装或计数。 （4）贮精罐要每隔57天检查称重一次，保管精液人员要理解每个罐液氮消耗状况。普通咱们要理解液氮罐消耗状况可根据公式得出成果：总重量减去液氮罐重即得液氮重（公斤数），除以系数0.808即可得知罐内液氮公升数。当罐内液氮容量低于全容量三分之一时，需及时补充添加液氮以防精液报废。 （5）冻精贮存器至少每年或每个配种期结束时要彻底清洗一次。清洗时将罐内存留液氮所有倒净，取出残留在罐底细管冻精（颗粒冻精弃之），通过两天左右待容器内温度上升至室温，以4050温水或中性洗涤剂，用细软纱布擦洗干净，并敞口凉干内部。有条件地
18、方可用4050热空气吹干封闭，保存备用。 5、药械准备 （1）各改良点或人工授精配种网点，要备齐各种人工授精必用器械和药物，细管冻精不需要解冻液，但需准备有检查活力盖玻片与载片、保温箱、卡苏输精器、细管剪刀等惯用设施。 （2）器械消毒准备，器械在使用前必要检查有无破损或失灵，输精器及配种所需外套、细管剪刀等无菌保存所用毛巾等用洗衣粉温水洗净，然后用清水洗干净，再用蒸溜水冲洗两遍，沥干水分。 （3）药液配制，配制各种药液和解冻液前，应先调节好天平，使药物称量精确，溶液中所用蒸馏水体积要量度精确，颗粒冻精解冻惯用2.9%柠檬酸钠液普通现用现配，亦可制成安瓿，保存在05冰箱中，随时取用。 6、细管冻
19、精解冻 （1）一方面将3840温水倒入敞口铝式饭盒中，调试好温度，并从液氮中迅速取出细管冻精投入水中迅速摆动1015秒钟，取出后用干净纱布擦去水珠，并放入手掌中迅速搓动数下使细管中精液混匀，为使精液在解冻后可以保存较长时间，以及为了防止输精时室温过低对已经升温精液产生不良影响，在解冻时不要让精液升温过高。冷冻精液普通规定输精前几分钟，最多不超过15分钟前解冻，并立虽然用。必要时也可体温化解，也可35水浴30秒解冻，装枪前必要借助手温迅速搓动，使温度回升精液复苏再输精，此解冻办法配种技术纯熟人员可尝试，当前不积极倡导。 （2）解冻后细管冻精用净卫生纸或消毒棉纱擦干，用细管专用剪刀平直横剪封口前端
20、1.21.5CM后棉塞端装入输精枪准备输精。 （3）细管冻精也可采用35水温30秒钟解冻，此办法可延长精子存活时间，冷配技术纯熟人员可尝试。 （4）细管冻精在解冻后应检查精子活力，原则镜检温度3738，活力检查需在解冻后35分钟精子完全复苏时进行，解冻活力局限性0.35不得用以输精，活力评估应取多视野，多液层平均值，解冻精液宜在解冻后立虽然用，最多不超过15分钟。 （5）基层各配种站点一定要规范实验室操作办法，配齐简易检测设备，如：保温箱、载片、盖片、细管剪刀等，并且一定要强调检查活力实验室室温不能低于15，保温箱温度不能低于37，从而抑制精子活力复苏。同步，所有检查精子活力器械设备一定要保持
21、清洁干净，避免人为因素导致检查精子活力偏低种种问题浮现。 7、输精 （1）母牛发情鉴定：“以直肠检查为主，结合观测询问、检查纪录等综合判断”为准绳原则进行人工授精。输精适当时间应在发情末期，即排卵前012小时，最佳在排卵前6小时，排卵后及时追配普通效果稍差。 （2）输精办法应采用直肠把握子宫颈深部输精法。输精动作要柔和、快捷，做到“轻插、适深、缓注、慢出”。输精剂量必要精确，防止夹吸母牛努责（努责时可将母牛稽甲部捏抓几下）残留精液过多或严重努责时应补输一剂。冬季气温低寒时应防止精液受冷打击，输精枪应用消毒毛巾包裹为佳。 （3）输精人员必要有严格无菌操作观念，输精前结合直检卵泡发育，掏尽粪便。输
22、精前应用千分之一高锰酸钾水清洗母牛后躯，重点为肛门、会阴、尾根，擦干后用消毒生理盐水棉球擦净外阴部及阴门裂内部，不得有粪便污染。输精器必要在无污染状况下直接插入阴道，随后再用另一只手插入直肠，把握子宫颈，每输精一次必要更换一支输精器外套。（严格讲外套只需使用一次，但依照我区实际，输精器外套可重复使用多次，但应严格消毒） （4）输精后，应检查残留量及未滴精子活力，如剂量局限性，活力明显下降，应检查因素，并作补输。 8、记录记录及报表 （1）母牛繁殖登记表，每头母牛登记一张，配种时认真逐项填写，并长期保存，并将冷配产犊公、母性别登记精确，准时记录上报。 （2）评估细管冻精配种效果，重要以第一情期受胎率高低为原则，普通咱们也以平均情期受胎率为原则。