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1、核酸实验室避免出现假阳性经验总结对于身处实验室的检验人来说,如何才能最大限度地避免新冠核酸 “假阳性”报告的产生?这些方面需要注意:01合理布局实验室布局合理的实验室是保证实验能正常进行的前提。PCR实验室原则上至少设有试剂准备区、样品制备区、扩增区三个 单独的工作区域,并设有专用走廊,各工作区域应设缓冲间。各区在空 间上完全独立,不能相通。各区有独立的通风系统,扩增前和扩增后区 域应具有独立通风系统,扩增后区域保持负压状态,其它区域保持正压 或常压状态,防止扩增产物进入扩增前的区域,压差25Pa。进风口和 出风口不能设在建筑的同一平面,要避免排出的空气被重新吸进实验室。各区域只用于特定操作,
2、工作衣和清洁清毒物品不得跨区混用,实 验室人员和物品应从试剂准备区到扩增区单向工作流动,不得逆向流动。02做好质量控制在近卫健委医政医管局负责人介绍:“我们的质控包括室内的质控 和质间的质评,特别是针对一些容易发生问题的环节,要强化工作要求 和措施落实,特别是要严格落实实验室环境的清洁消毒,降低实验室污 染的可能。实验室应建立合理、科学的室内质控标准操作规程(S0P),质控应 该从样本处理到报告发放全程参与,新型冠状病毒核酸检测严格执行 “三个阴性样本随机放在临床标本中间同时参与检测全过程”的质控 策略,以及复检规则的设置等,可有效避免假阳性结果的发生。03核酸扩增规范操作扩增产物是最容易出现
3、的污染,通常一次典型的PCR扩增可以产生109拷贝的靶序列,若气溶胶化,最小的气溶胶都会产生含106拷贝 的扩增序列,这些气溶胶的累积会污染实验室内的试剂、仪器设备和通 风设备,使检测结果出现异常。因此,应对核酸扩增的每一个环节进行 严格的规范操作。1 .扩增反应液和样本核酸模板分装完毕检查管内液面高度一致后, 加盖八联管盖,逐孔按紧,混匀离心后再次检查八联管有无渗漏。2 .八联管转移至96孔扩增盘时再次确认管盖已封严,以防扩增过 程中爆管导致实验室污染。3 .扩增结束后要及时将扩增产物从扩增仪里取出(禁止打开八联 管),检查管内液面无变化后放入“自封袋”内封严,然后带出扩增区, 不能随便丢弃,需按医疗废物处理。当实验室出现阳性结果异常增高的情况时,必须要认真梳理工作流 程、分析可能原因,特别是要排除因为操作或者是实验室污染所造成的 假阳性的可能。04实验结束后的清洁消毒清洁消毒方法不当也是实验室污染的一个主要原因,实验结束后应 遵从先清洁区域后污染区域消毒的原则,及时对实验室空气、设备表面、 工作台面和地面等实施有效的消毒。加强实验室通风,加强环境仪器设备和工作台面消毒、清洁的频次,最大限度的减少实验室污染。