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1、微生物检验微生物检验 医院检验科 6/11/2024微生物检验标本的留取及质量保证6/11/2024临床微生物室概论临床微生物实验室：当代的临床微生物实验室的功能不仅是检验的场所，更是与临床感染疾病的流行病史结合、建立、分离、鉴定样品中病原微生物的方法学，并进行药敏试验，开展本单位的耐药检测，为临床医生经验用药和目标用药提供参考依据；结合临床需要开展科学研究，不断建立满足临床工作所需的现行有效的检验项目，淘汰陈旧的、无用的或错误的微生物检验项目；追溯传代源，降低医院感染率的机构。临床微生物室的工作病原微生物检测，明确诊断抗菌药物敏感试验，协助治疗，预后评估耐药菌检测，细菌耐药性监测院感侦查6/
2、11/20242024/6/11临床微生物床微生物实验室室5微生物检验标本的留取及质量保证微生物标本的留取微生物检验的质量控制6/11/2024正确的实验室结果1、标本的正确留取2、实验室质量的保证3、实验结果的正确理解血标本和骨髓标本指征：寒战、发热或体温过低、皮疹（粘膜出血）、肝脾肿大、关节疼痛、神志昏迷或休克。当患者高度考虑为血流感染，但外周血培养连续多次阴性时可以考虑做骨髓培养。时间：患者寒战前、寒战时、或寒战后一小时内采血；使用抗菌药物之前，应立即采集血液做培养（心内膜炎除外）。采集：严格执行“三步消毒法”乙醇擦拭静脉穿刺部位待30s以上；碘酊作用30s或碘伏作用90s以上，从穿刺点
3、向外画圈消毒，至消毒区域直径3cm以上；70%乙醇脱碘待干。70%乙醇擦拭血培养瓶橡皮塞，作用60s后用无菌纱布或无菌棉签清除残余乙醇。用注射器穿刺采血后，直接注入血培养瓶，或严格按血培养瓶厂家推荐的方法采血，接种到血瓶后，轻轻颠倒混匀，防止血液凝固，成人采血5-10ml/瓶（成人）为最佳。婴幼儿采血量为全血量的1%（1-2ml);骨髓采集量一般为1-2ml。如果不能立即送到微生物室，自动化仪器配套的血培养瓶可临时室温保存，切勿冷藏。2024/6/11l院内获得性感染：入院48小时后，多由耐药的微生物引起 致病微生物：细菌（90）、真菌、病毒、支原体、衣原体等lICU常见致病微生物：阳性球菌感
4、染增加、真菌感染增多 铜绿假单胞 不动杆菌 金葡菌 真菌l不同感染部位常见致病菌：尿路：大肠杆菌、肠球菌 伤口：葡萄球菌、大肠杆菌 呼吸系统；G-多见，近年球菌增多 腹腔感染：多混有厌氧菌l长期应用抗生素：真菌感染，念珠菌（白念）多见血流感染常见病原体2024/6/11阳性报告l一级报告（初步报告）：报告临床阳性并涂片l二级报告（补充报告）：初步鉴定结果和直接药敏l三级报告（终报告）：菌种名称和标准药敏结果阴性报告“血培养经xx天培养阴性”血培养报告血培养报告2024/6/11Perform venipuncture Place Adapter cap obtain 8-10ml of blo
5、odSkin Preparation ORBottle Preparation2024/6/11全自动血培养检测原理2024/6/112024/6/11一套两套三套采血份数采血份数Cockerill,CID 2004研究表明：一套血培养选择1个需氧瓶和1个厌氧瓶组合检测出的葡萄球菌、肠杆菌科菌中某些菌和厌氧菌比一对需氧瓶多。在发热开始的24h内进行血培养。尽力保证在抗感染治疗前获得首份血培养标本。同时经2个独立部位抽取血标本，此结果比单一部位的血培养更有临床意义。除新生儿外，不建议只进行单套血培养（II级）。48-96h后评估治疗效果，再次血培养不能单取1套，必须同时抽取2套标本（II级）。但
6、对怀疑血管内的感染，应该间隔一段时间区不同部位的静脉穿刺抽血，有助于诊断持续性菌血症（II级）。成人：任何时候，绝对不能只送一瓶！2024/6/11指南中强调：血培养至少送2套Crit Care Med 2008 Vol.36.No.4：CLSI指南：英国指南导 管导管相关性感染：诊断依据：导管培养、导管内血培养、外周血培养为同一种菌。除感染症状外还要满足以下某一条件：5cm导管尖端，半定量培养阳性（15CFU），或者定量培养阳性（100CFU)，同时从导管培养出的细菌与外周血培养结果一致（种属和药敏结果）；同时从CVCs、外周静脉抽血送细菌培养，CVCs所取血样培养出现阳性的时间比外周血早2
7、小时以上。标本送检：1）、导管：用75%乙醇清洁导管周围皮肤，无菌手续移动导管，剪取导管尖端5cm，直接置入无菌容器中，尽快送检。2）、经外周静脉穿刺采血=1套；从导管中心或静脉留置口隔膜采血1套；二者采血的时间接近（建议5/HP，水样便，近期未使用抗生素无经常腹泻史，存在不洁食物食入可能。常见的肠道致病菌为：霍乱弧菌、沙门菌、志贺菌、耶尔森菌、产毒素肠杆菌、金黄色葡萄球菌、难辨梭菌、空肠弯曲菌等。标本留取：用无菌棉拭子挑取粘液脓血部分直接，或放在无菌杯内送检，不能使用有吸水性的容器。6/11/20242024/6/11脓性标本脓是组织炎症过程中形成的浓稠或稀薄的渗出物，其中包含变性、坏死的白
8、细胞、细菌、坏死组织碎片和渗出的组织液。闭锁性脓肿：指有完整脓壁与体腔或外界不相通的脓肿标本，采集的基本方法为穿刺吸引法，采集此类标本前应对穿刺点皮肤或黏膜表面消毒。尽可能在使用抗生素之前采集，注意无菌操作，注意标本性状、色泽及气味；由于有厌氧菌感染的可能，标本应尽快送检或放入厌氧袋中隔绝空气送检。6/11/20242024/6/11尿液尿路感染是由细菌、真菌、支原体、原虫等逆行感染，直接侵入尿路上皮组织中引起。指征：尿路感染症状，单纯性尿路感染，肾结核，泌尿系统结石、无症状性菌尿等。标本采集：清洁中段尿；用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗尿道口，用手指分开尿道口，留取中段尿于一次性无菌尿杯，量=1ml即可。肾盂导尿：为确定菌尿是否来自肾脏可用导尿管采集肾盂尿。穿刺尿：经耻骨上膀胱穿刺取尿，可避免污染，是评估膀胱内细菌感染的金标准直接导尿：常规消毒后插尿管导尿，可减少污染，但有将前尿路正常菌群引入膀胱的可能，且只能经新置尿管取尿。6/11/20242024/6/116/11/2024