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1、人员卫生、微生物学知识培训主要内容uu微生物概述uu微生物与制药uu微生物的控制微生物uu什么是微生物：什么是微生物：简单的说，微生物就是微小的生物。是一群个体微小、结构简单、肉眼不能直接看到，必须借助光学显微镜或电子显微镜放大几百倍、几千甚至几万倍才能看到的微小生物。微生物的分布uu微生物在地球的生物圈内无处不在，漂浮在空中，栖息于土壤各层，存在于各类水域（海洋、湖泊、江河、沼泽），附着于人和动植物体表或体内，对人类和环境无时不在产生巨大的影响。微生物的分类uu微生物的分类，目前公认的包括七大类。即病毒立克次体支原体细菌放线菌螺旋体真菌（酵母菌、霉菌）。排在前面的小而低等，排在后面的逐渐大而
2、高等。uu常见的微生物有：细菌、真菌、病毒。常见的微生物uu1.1.细菌细菌 细菌是能够独立地进行生长繁殖的单细胞生物，种类很多，大小不一。uu根据其外形结构、大小、色泽、透明度、粘稠度、边缘形状及其他特征来区别各种不同的菌类。常见的微生物uu2.病毒 uu病毒是体积最小，结构最简单，没有细胞结构，而只能寄生在其它生物的细胞内，利用宿主细胞的酶系统和营养物质进行生长繁殖的原始生物。uu平均大小只有0.1m，比细菌约小10倍，最小的病毒只有0.01m，接近蛋白质分子。病毒大多能通过滤菌器，故俗称滤过性病毒。常见的微生物uu3.真菌uu真菌是体积最大，结构比较复杂的微生物。对热的抵抗力不强，60加
3、热1小时即被杀死。uu分为单细胞真菌：酵母菌 多细胞真菌：霉 菌特征uu1.种类繁多 微生物的数量和种类是十分惊人的。一滴水，一颗土粒往往都是一个微生物“社会”。自然界已知的微生物就有10万种左右。有人估计，这个数仅占自然界微生物种类的1/10。特征uu以土壤内的生存密度最大，1克较肥活的土壤常含有几亿到几十亿个微生物；贫瘠土壤每克也含有几百万到几千万个，一只肮脏的苍蝇，全身能携带5亿多个细菌，三对足能粘附700万至1000万个细菌，可见微生物的密集度之大。特征uu2.分布广泛 微生物是地球上分布最广泛的一类生物。在辽阔的自然界中，无论土壤、水域、空气以及动物、植物、人体内外都有大量微生物存在
4、。从炎热的赤道，到酷寒的极地；从阳光强烈的万米高空，到终年不见阳光的万米海底；从绿色无边的平原，到荒芜人烟的沙漠；从冰雪高山到泥泞沼泽，到处都有微生物的踪迹。特征uu有些微生物能够在异常的条件下生存，例如耐酸菌能在10%的硫酸溶液中生活，暗热菌能在温度高达98以上的温泉中生活，有的甚至在高达200300的深海火山口附近也能活动，嗜盐菌在含盐量高达23%25%的死海里，甚至30%的氯化钠溶液中和盐块上存活，显然这是一般生物所望尘莫及的。特征3.繁殖迅速 微生物的繁殖速度也是同样惊人的，比高等动植物快得多，有些细菌，在适宜条件下每20分钟就可以繁殖一次，例如大肠杆菌，1个细菌经20分钟就分裂成2个
5、，每小时可分裂3次，这样，1个细菌繁殖3代就产生8个细菌。特征uu4.代谢旺盛uu物体分割得越细，其单位体积所占有的表面积值就越大。uu微生物的个体虽然微小，但却有很大的表面积与体积的比值，能迅速地和周围环境进行物质交换。特征uu5.容易变异uu由于微生物的个体小，对外界环境条件直接接触而表面特别敏感，因此，当环境剧烈变化时，多数个体容易死亡而被淘汰，少数个体则发生变异而适应新的环境。uu这种易变性，从利用微生物的角度讲，既有利又不利。特征uu有利的是可以利用其容易变异的特点进行菌种有利的是可以利用其容易变异的特点进行菌种选育，并可在短时间内获得优良菌种。例如青选育，并可在短时间内获得优良菌种
6、。例如青霉素产生菌，最初产量每毫升只有几十单位，霉素产生菌，最初产量每毫升只有几十单位，可是通过大量人工诱变育种，现已培育出每毫可是通过大量人工诱变育种，现已培育出每毫升产量达上万单位的优良菌种。升产量达上万单位的优良菌种。uu不利的是即便是优良菌种也极易发生退化，若不利的是即便是优良菌种也极易发生退化，若保存不当或在人工培养基上经多次传代后，菌保存不当或在人工培养基上经多次传代后，菌种的优良特性会发生改变。例如白僵菌菌种，种的优良特性会发生改变。例如白僵菌菌种，经经3030代移种后，其致病力降低代移种后，其致病力降低50%50%。uu充分认识和运用微生物的特点，对利用和改造充分认识和运用微生
7、物的特点，对利用和改造微生物是极为重要的。微生物是极为重要的。微生物的作用uu绝大多数微生物对人和动物是有益的，有些还是必不可少的。uu微生物已广泛应用于农业、食品、医药、酿造、化工、制革、石油等行业，发挥了越来越重要的作用。uu抗生素、酸奶、疫苗、酒类等等；微生物的危害uu微生物中也有一部分能引起人或动植物病害，这些具有治病性的微生物，称为病原微生物。如人类的许多传染病（如感冒、伤寒、痢疾、结核、脊髄灰质炎、病毒性肝炎等），均是由病原微生物引起的。uu从药品生产的卫生学而言，微生物对药品原料、生产环境和成品的污染是造成生产失败、成品不合格、直接或间接对人类造成危害的重要因素。GMP与微生物u
8、推行GMP目的：u防污染、防交叉污染、防混淆、防差错。污染、交叉污染uu污染：在生产、取样、包装或重新包装、贮存或运输等操作过程中，原辅料、中间产品、待包装产品、成品受到具有化学或微生物特性的杂质或异物的不利影响。（2010版GMP）uu交叉污染：不同原料、辅料及产品之间发生的相互污染。简单理解：当一个产品存在有不需要的物质时，它即受到污染。混淆、差错uu混淆：由于无标识、标识不清或标识不明显引起的物料混乱；uu差错：由于人为操作不当或设备偏差造成的不符合规定。尘粒污染uu尘粒污染：是指产品因混入不属于它的那些尘粒而变得不纯净。uu尘埃、污物、棉绒、纤维以及我们的头发及皮肤脱落物都是尘粒污染的
9、潜在原因。uu临床资料表明：如药品被72m的尘粒污染了，尤其是静脉注射用药，可以导致热原反应、肺动脉炎、微血栓或异物肉芽肿等，严重的会致人死亡。微生物污染uu微生物污染是指因微生物产生、附着而给特定的环境带来的不良影响。uu如果细菌得到了必要的养料、一定量的水份和合适的温度，它们就能迅速繁殖，它们繁殖的速度快得惊人。微生物污染uu1.药品的微生物污染源微生物污染uu养料：uu1.碳和氮化合物、无机盐等这些是细菌营养所必须的物质。uu2.气体 氧、二氧化碳和氮与细菌的生长繁殖有密切的关系。uu3.酸碱度 大多数病原菌生长最适宜的酸碱度为pH7.27.6。微生物污染uu水分：uu细菌的生长繁殖是从
10、外界吸收营养物质，通过本身含有的许多酶系统，进行一系列的生化反应分解转化成简单物质，然后加以吸收利用。这种利用需要一定的水分，先使营养物质溶解，再通过扩散和吸收而达到的。同时代谢产物也靠水的扩散作用而排泄，因此水是细菌生活所不可缺的物质。微生物污染uu温度：uu根据细菌对温度要求的不同，可分为嗜冷菌、嗜温菌及嗜热菌。一般病原菌的适宜温度基本与人类体温相同，因而实验室培养细菌均采用37。（霉菌25）传播污染的四大媒介uu空气uu水uu表面uu人不同环境中微生物量环境环境土壤土壤水水空气空气人体皮肤人体皮肤地板地板微生物量微生物量10104 4-10-10101010-1010-104 410-1
11、010-105 51-101-104 410-1010-103 3单位：个/g传播污染的四大媒介空气uu空气：空气并不是产生污染的介质，但它是污染的危险携带者。充满微生物的尘埃和水滴就是通过空气作为侵袭我们产品的媒介而成为重要的污染源的。uu当我们谈话、咳嗽和打喷嚏时，被污染的水滴正是不断地从我们的呼吸道中进入我们的工作场所。尘埃微粒正是通过空气流不间断地在我们整个药厂范围循环运行着。传播污染的四大媒介空气控制措施：uu合适的空气净化系统（空气过滤器的合理应用）。uu合适的检查空气洁净的方法uu合适的空气净化系统的验证规程。uu合适的空气净化系统的维修规程。uu空气中存在的尘埃微粒是含有微生物
12、(细菌等)的。空气是侵袭我们产品的污染物的主要媒介。因此，尽量保持空气的洁净是极为重要的。传播污染的四大媒介水uu水：水：从理论上来讲，微生物在纯水中是不能生长从理论上来讲，微生物在纯水中是不能生长的。但是，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜的。但是，所有的各类水，不管怎样仔细地蒸溜或过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和盐类。或过滤，总会含有一定量的可溶性有机物和盐类。正是这些可溶性的物质可被微生物利用作为它们正是这些可溶性的物质可被微生物利用作为它们生长的养料源泉。生长的养料源泉。uu在生产过程中，水是应用最广泛的原料之一。这在生产过程中，水是应用最广泛的原料之一。这就是为什么我们药厂的卫生规
13、程不仅必须仔细地就是为什么我们药厂的卫生规程不仅必须仔细地控制用于生产过程的水，而且要控制好如何正确控制用于生产过程的水，而且要控制好如何正确地用水来清洗我们的设备。地用水来清洗我们的设备。传播污染的四大媒介表面uu表面包括：表面包括：天花板天花板、墙墙壁、地壁、地面、面、设备设备、容器、容器、工具或桌子工具或桌子；uu由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的由于空气中的湿度，所有表面都包上一层含水的薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，薄膜。这层薄膜由于静电吸引而饱含尘埃微粒，有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油有很多时候，表面还覆盖一层油状物质，此层油膜易受到尘粒污染。膜易受到
14、尘粒污染。uu表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受表面因尘埃微粒和微生物由空气传播的回降而受到污染。到污染。传播污染的四大媒介表面控制措施：uu控制与选用合适的材质。uu选择合适的消毒灭菌规程。uu合适的验证方法。uu合适的维护保养规程。uu合适的清场管理规程和清洁卫生制度。传播污染的四大媒介人uu人是最常见的传染源。事实上，人们常说，人是药厂中最不清洁的成份，最大的污染源。为什么呢?一个原因，人体是一个永不休止的污染媒介。当您每天来药厂上班时，您也许随身将几百万细菌带入工厂。人员污染的途径和方式uu人的头发和皮肤uu水滴uu衣着uu化妆品和珠宝手饰uu生产过程中人们所引起的混杂和误差人
15、体中的微生物uu部位部位 常见菌种常见菌种uu皮肤皮肤 表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等表皮葡萄球菌、类白喉杆菌、绿脓杆菌、耻垢杆菌等uu口腔口腔 链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆链球菌（甲型或乙型）、乳酸杆菌、螺旋体、梭形杆菌、菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、白色念球菌、（真菌）表皮葡萄球菌、肺炎球菌、奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等奈瑟氏球菌、类白喉杆菌等uu胃胃 正常一般无菌正常一般无菌uu肠道肠道 类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌类杆菌、双歧杆菌、大肠杆菌、厌氧性链球菌、粪链球菌 葡萄球菌、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、葡萄球菌、
16、白色念球菌、乳酸杆菌、变形杆菌、破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等破伤风杆菌、产气荚膜杆菌等uu鼻咽腔鼻咽腔 甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链甲型链球菌、奈氏球菌、肺炎球菌、流感杆菌、乙型链 球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等球菌、葡萄球菌、绿脓杆菌、大肠杆菌、变形杆菌等uu眼结膜眼结膜 皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等皮表葡萄球菌、结膜干燥杆菌、类白喉杆菌等人的头发和皮肤uu您是否知道：每分钟从人类皮肤中要散发出约10,000个微生物?如果说，一小粒糖的空间中能装载4亿个微生物，那么，您想想看，在一股头发中可以容纳多少微生物呢?uu我们的手，也有大量的微生物。此外
17、，在人们正常的日常活动中都接触大量微生物。水滴uu呼吸和咳嗽将产生出大量微小的水滴，这种水滴既含有尘粒污染也含有微生物污染。口腔是对污染最为敏感的地区。一次咳嗽或喷嚏将把千百万个微生物引入工作环境内。衣着uu从可洗涤的纺织物中，可能散发出棉绒和淀粉粒。而从羊毛和其它松软的针纺织物中也可能散落出纤维和磨损下的微粒。污染也可能通过我们的鞋子进入工作场所。化妆品和珠宝手饰uu发胶、气雾除臭剂、香粉等，为微生物污染提供了极好的源泉。耳环、戒指、项链、手链能传播微生物污染。如果，一小片粉或唇膏碎片落入一批产品中，则可能引起严重的尘粒污染。uu这就是为什么我们不允许化妆和佩戴首饰进入洁净厂房的原因。生产过
18、程中人们所引起的混杂和误差uu由人引起的污染也可能来自于生产过程中出现的混杂和误差。uu例如，当员工没有按照SOP进行工作时，车间的污染程度将增加。让产品容器不加盖地存放，将导致产品污染。清场不彻底将会引发尘粒污染、微生物污染、混药等重大质量安全事故。生产过程中人们所引起的混杂和误差如何控制如何控制生产前应确认无上次生产遗留物；生产前应确认无上次生产遗留物；应防止尘埃的产生；应防止尘埃的产生；不不同同产产品品、品品种种、规规格格的的生生产产操操作作不不得得在在同同一一生产操作间同时进行；生产操作间同时进行；有有数数条条包包装装线线同同时时进进行行包包装装时时，应应采采取取隔隔离离或或其他有效防
19、止污染或混淆的设施；其他有效防止污染或混淆的设施；生生产产过过程程中中应应防防止止物物料料及及产产品品所所产产生生的的气气体体、蒸气、喷雾物或生物体等引起的交叉污染；蒸气、喷雾物或生物体等引起的交叉污染；每每一一生生产产操操作作间间或或生生产产用用设设备备、窗窗口口应应有有所所生生产的产品或物料名称、批号、数量等状态标志。产的产品或物料名称、批号、数量等状态标志。人员的发菌量uu洁净室内当工作人员穿无菌服时，静止时的发菌量为10300个/(min人)，躯体一般活动时的发菌量为1501000个(min人)，快步行走时的发菌量为9002500个(min人)；uu咳嗽一次的发菌量为70700个(mi
20、n人)，喷嚏一次的发菌量为400060000个(min人)；药品生产人员卫生注意事项uu新进人员的健康检查新进人员的健康检查新进人员的健康检查新进人员的健康检查：药品生产企业在招收新职药品生产企业在招收新职工时，一定要对新职工进行全面的健康检查，要工时，一定要对新职工进行全面的健康检查，要确保新进厂的职工不患有急性或慢性传染病。另确保新进厂的职工不患有急性或慢性传染病。另外还要根据新进职工安排的具体岗位性质再确定外还要根据新进职工安排的具体岗位性质再确定其它具体检查的项目。其它具体检查的项目。uu建立生产人员健康档案：建立生产人员健康档案：建立生产人员健康档案：建立生产人员健康档案：药品生产企
21、业应对职工药品生产企业应对职工建立个人健康档案，以便于检查、了解、追踪个建立个人健康档案，以便于检查、了解、追踪个人健康好坏的状况人健康好坏的状况 。uu培养药品生产人员良好的个人卫生习惯培养药品生产人员良好的个人卫生习惯 uu洁净区生产人员要求洁净区生产人员要求如何培养良好的个人卫生习惯uu勤洗手、勤剪指甲 uu定期洗澡、勤理发 uu勤换衣服、勤洗工作服 uu在生产区内做到三个严禁：禁止吃东西、禁止吸烟、禁止大声喧哗。洁净区生产人员要求uu洁净区工作人员要尽可能少而精，只有工作需要时才能进入；uu操作人员在洁净区动作尽量要缓慢，避免剧烈运动，以减少人的发菌量；uu洁净区的门应关紧，避免不必要
22、的移动，以保持洁净区的风速、风量、风型和风压；人员进入洁净区如何避免带入污染?1.人员进入洁净区严格按照SOP（正确的更衣、洗手、消毒程序）来执行，尽量避免人为带入污染；2.不佩戴首饰、不化妆；3.注重个人卫生和健康，养成良好的卫生习惯；4.保持洁净区的清洁。相关名词解释uu1 1.灭菌灭菌 指杀死或除去所有微生物的繁殖体和指杀死或除去所有微生物的繁殖体和芽胞，使之完全无菌。芽胞，使之完全无菌。2.2.消毒消毒 指仅仅杀灭病原微生物，使之不成为指仅仅杀灭病原微生物，使之不成为传染源。传染源。3.3.杀菌杀菌 指使用化学药品或物理因素，对微生指使用化学药品或物理因素，对微生物在短时间内起杀灭的作
23、用。物在短时间内起杀灭的作用。4.4.抑菌抑菌 抑制微生物繁殖体的生长及其繁殖。抑制微生物繁殖体的生长及其繁殖。5.5.防腐防腐 指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。指防止或抑制微生物生长繁殖的方法。6.6.无菌无菌 指没有任何活的微生物存在。指没有任何活的微生物存在。药品生产防污染控制措施uu划分洁净级别uu严格更衣程序uu消毒和灭菌药品生产洁净室（区）空气洁净度级别洁净度级别洁净度级别悬浮粒子最大允许数悬浮粒子最大允许数/个个 mm-3-3静态静态动态动态0.5m0.5m5m5m0.5m0.5m5m5mA A级级352035202020352035202020B B级级35203520292
24、935200035200029002900C C级级35200035200029002900352000035200002900029000DD级级352000035200002900029000不作规定不作规定不作规定不作规定洁净区微生物监测的动态标准灭菌方法uu灭菌法是指杀死或除去所有微生物及其芽孢的方法。一般可分为物理灭菌法和化学灭菌法。1.1.物理灭菌法：指采用加热、过滤、照射等物理手段达到灭菌目的的方法。灭菌方法1.1加热灭菌法加热可破坏微生物中酶、蛋白质和核酸，导致微生物死亡。加热灭菌又分干热灭菌法和湿热灭菌法。在同一温度下，湿热灭菌的效果比干热灭菌好。主要是因湿热灭菌时，有水分存
25、在，蛋白质容易变性。水分又易使微生物膜壁润湿，湿热的穿透力比干热大。灭菌方法uu1.2滤过除菌法系指使药液通过除菌滤器中的适宜滤材，机械滤除（阻挡）活的或死的细菌，而得到不含细菌药液的方法。主要用于对热不稳定的药物溶液、气体、水的除菌。供灭菌用的滤器，要求能有效地从溶液中除净微生物，溶液顺畅地由滤器通过，滤液中不落入任何不需要的物质，滤器容易清洗，操作简便。灭菌方法uu1.3紫外线灭菌法是指用紫外线照射杀灭微生物的方法。一般用于灭菌的紫外线波长是200300nm，灭菌力最强的波长是253.7nm。紫外线作用于核酸蛋白促使其变性，同时空气受紫外线照射后产生微量臭氧，从而起共同杀菌作用。灭菌方法物
26、理灭菌除上述三种方法外还有：uu1.4微波灭菌法uu1.5辐射灭菌法 灭菌方法2.2.化学灭菌法：指用化学药品杀灭微生物的方法。化学灭菌法：指用化学药品杀灭微生物的方法。同一种化学药品的低浓度时呈现抑菌作同一种化学药品的低浓度时呈现抑菌作用，而在高浓度时则能起杀菌作用。用，而在高浓度时则能起杀菌作用。杀菌机理：能使微生物蛋白质变性死亡，杀菌机理：能使微生物蛋白质变性死亡，或与酶系统结合影响代谢，或改变膜壁通透性或与酶系统结合影响代谢，或改变膜壁通透性使微生物死亡等。使微生物死亡等。常用的方法有常用的方法有消毒剂消毒法消毒剂消毒法和和化学气体化学气体灭菌法灭菌法等。等。灭菌方法uu2.1消毒剂消
27、毒法消毒是指杀死病原微生物的方法。uu化学消毒剂大多仅能杀死微生物的繁殖体而不能杀死芽孢，能控制一定范围的无菌状态。可将消毒剂配成适宜浓度，采用喷淋、涂擦或浸泡等方法对物料、环境、器具等进行消毒。灭菌方法uu常用的化学消毒剂有常用的化学消毒剂有0.1%0.1%0.2%0.2%苯扎溴铵溶液、苯扎溴铵溶液、3%3%5%5%的酚或煤酚皂溶液、的酚或煤酚皂溶液、75%75%乙醇等。乙醇等。uu注意：注意：uua.a.浓度不要过高，以防止化学腐蚀作用。浓度不要过高，以防止化学腐蚀作用。uub.b.洁净室的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪洁净室的墙面、天花板、门窗、机器设备、仪器、操作台、车、桌、椅等表面
28、以及人体双手器、操作台、车、桌、椅等表面以及人体双手（手套）在环境验证及日常生产时，应定期清洁（手套）在环境验证及日常生产时，应定期清洁并用消毒剂喷洒并用消毒剂喷洒 。灭菌方法uu2.2化学气体灭菌法系指利用化学药品的气体或产生的蒸汽进行杀灭微生物的方法。uua.甲醛等蒸汽熏蒸法采用甲醛、丙二醇或过氧醋酸等化学品，通过加热产生蒸汽进行空气环境灭菌。灭菌方法uub.b.臭氧消毒法臭氧消毒法臭氧（臭氧（O3O3）的消毒原理是：臭氧在常温、常）的消毒原理是：臭氧在常温、常压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧压下分子结构不稳定，很快自行分解成氧（O2O2）和单个氧原子（）和单个氧原子（OO），后者具有
29、很强的），后者具有很强的活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分活性，对细菌有极强的氧化作用，臭氧氧化分解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破解了细菌内部氧化葡萄糖所必须的酶，从而破坏其细胞膜，将其杀死。坏其细胞膜，将其杀死。uu多余的氧原子则会自行重新结合成为普遍氧分多余的氧原子则会自行重新结合成为普遍氧分子（子（O2O2），不存在任何有害残留物，故称为），不存在任何有害残留物，故称为无污染消毒剂。无污染消毒剂。uu对种种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓对种种细菌（包括肝炎病毒、大肠杆菌、绿脓杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对霉杆菌及杂菌等）有极强的杀灭能力，而且对霉菌也很有效。菌也很有效。灭菌方法uuc.环氧乙烷灭菌法uu环氧乙烷灭菌法是利用环氧乙烷气体进行杀菌的方法。它是一种传统的灭菌方法，可应用于工衣灭菌、不耐加热灭菌的药品、医用器具、设施、设备等的灭菌。我们的目标uu保证产品质量uu控制污染源uu减少人为误差 本次培训到此结束 谢谢大家