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1、通过筛选，本实验得到了 1株具有酸性蛋白酶活性的海洋酵母菌，经鉴定为梅奇酵母（3海洋酵母菌种库菊糖是果糖由菊糖酶（Inulinase）是能够水解通过筛选发现本实验室海洋酵母菌种库中存在4株在海水或人工海水配制的培养基中可以 产生大量菊糖酶的海洋酵母菌，它们分别是季也蒙毕赤酵母（另外，利用简并引物PCR技术作者已经克隆到了编码季也蒙毕赤酵母（4海洋酵母菌的筛选纤维素是由葡萄糖通过纤维素酶可以作为洗涤剂的添加剂和转化纤维素生产葡萄糖，纤维素酶和酒精酵母菌共同 作用于纤维素可以生产燃料酒精，可以产生纤维素酶的酵母菌可以用于转化秸秆中得纤维 素生产单细胞蛋白 通过对300多株海洋酵母菌进行筛选，本实验
2、得到了活力最高的1株海洋酵母菌普鲁兰类 酵母（5淀粉酶酵母菌的大量生产淀粉酶在面包和发酵工业、淀粉液化和糖化、纺织工业、纸张制造业、洗涤剂业、医药和 临床化学分析、食品和药物工业中有许多重要用途。由于在世界大部分地区淀粉价格低廉、 原料来源方便，所以淀粉是大规模生产酵母菌细胞的最好原料由于从环境得到的大部分 酵母菌是安全的，所以最近几年人们对淀粉酶的酵母菌产生了很大的兴趣，主要目的是利 用产淀粉酶酵母菌转化淀粉质原料直接生产单细胞蛋白和燃料酒精。目前发现的可以产淀 粉酶的陆地酵母菌包括:油脂酵母（本研究通过筛选得到了1株淀粉酶活力最高的普鲁兰类酵母（6脂酶微生物的产生脂酶是指可以催化三酰基甘油
3、水解产生甘油和游离脂肪酸或催化甘油与长链脂肪酸合成酯 的酶。脂酶广泛存在于自然界中，但是仅仅微生物产生的脂酶具有生产应用价值，因为微 生物产生的脂酶产量高，而且功能多样。脂酶在生产量上是仅次于蛋白酶和糖化酶之后第 三大应用酶。可以产生脂酶的微生物有细菌、真菌、酵母菌和放线菌。能产生大量脂酶的 陆地酵母菌有:褶皱假丝酵母（ 编码普鲁兰类酵母（7嗜杀行为的检测海洋病原细菌和病毒引起的海洋养殖动物病害最近几年给海水养殖业造成了巨大的经济损 失，除了海洋细菌和病毒可以引起海洋动物疾病外，最近发现某些海洋酵母菌也可以引起 海洋动物疾病，并给海水养殖业造成很大的经济损失，由于酵母菌是真菌，而真菌细胞结 构
4、功能与人类和动物的类似，这样给这些疾病的控制带来了很多难以解决的问题。如中国 海洋大学Chi Z M等人在组织培养中发现1种海洋酵母菌克鲁维酵母（很多研究表明有很多具有嗜杀能力的酵母菌以及它们的嗜杀因子可以广泛应用于医药、发 酵、食品和农业生产上，嗜杀因子作用于目标时不需要细胞之间直接的接触，酵母菌产生 的大量小分子量的蛋白或糖蛋白就会对比较敏感的相同或相近种属的酵母菌细胞有杀死作 用。而这种嗜杀菌自身对所产嗜杀因子具有免疫力经过纯化发现该嗜杀因子的分子量为47.0 kDa,最适作用温度和pH分别为40 c和4. 5, 在60 下还相当稳定，该酶为丝氨酸金属酶。大部分金属离子对奇异毕赤酵母（该
5、奇异毕赤酵母（利用PCR技术已经克隆到编码该嗜杀因子的基因，整个0RF由1 281个碱基组成，编码 427个氨基酸。该蛋白的信号肽序列与奇异毕赤酵母（8生物酶系统的研究进展植酸酶（phytase）可以催化植酸（6-磷酸肌醇）释放出磷酸盐，植酸是各种谷物、粮食、 豆类和多油种子中主要的含磷化合物，所以植酸酶可以组入到各种商品化家禽、猪和鱼类 饲料中，以便于分解其中的植酸，释放出无机磷酸，从而减少动物饲料中无机磷的添加量, 使饲料中的植酸得到分解释放出磷酸供给动物磷的需求，减少向环境中排放含磷化合物， 有利于保护环境最近，由于对海产品的需求量增加，全球的海水养殖业得到了飞速发展，但是由于高密度 养
6、殖和环境污染加剧导致环境中含磷化合物严重污染。因为海洋动物肠道中缺少植酸酶微生物易生长且产能高的特点使其成为生产植酸酶最经济的来源，目前生产植酸酶的微生 物主要是利用陆地丝状真菌重组菌株，基因来源主要是曲霉的植酸酶基因作者认为应用到海水养殖业饲料中的植酸酶最好是来自于海洋酵母菌。可是目前对产植酸 酶的海洋酵母菌了解得非常少。最近几年对实验室产植酸酶的酵母菌进行了研究，筛选了 327株海洋酵母菌，其中有10株表现出了较高的植酸酶活力，它们分别属于葡萄有泡汉逊 酵母（经过纯化发现该酶分子量为98. 2 kDa,最适作用温度和pH分别为65 c和5.0,该酶在不 同pH条件下稳定性要比其他酵母菌产生
7、的植酸酶好。金属离子Mn编码奥默柯达酵母（9脂酶作为食品加工技术表1列出了上述几种胞外酶纯化后的酶大小、酶活力、最适pH和温度、基本酶学性质和 酶基因序列登录号。从以上的最新研究成果看来，海洋酵母菌产生的很多胞外嗨具有许多 独特的物理化学性质，酶活性高，酶活稳定，具有非常重要的潜在实际用途。尤其是纤维 素酶、碱性蛋白酶、菊糖酶、脂酶、植酸酶和嗜杀因子。如其中的脂酶在科研方面可以作 为水解、合成、分析、生物转化和亲和层析的研究工具，在工业生产方面可以用于催化酯 类的合成、用于酿造生产、肉制品蔬菜水果产品加工等;如菊糖酶的研究可应用于菊芋取 代淀粉质原料生产燃料酒精，这对于中国这样一个农业国具有非常重要的现实意义。因而, 继续探索这些海洋酵母菌胞外酶的产酶情况，酶合成受NaCl调控的机制，并进一步克隆 胞外酶基因，进行超表达，深入研究这些胞外酶基因启动子和超表达酶的实际用途将具有 十分重要的意义。