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1、环境卫生学监测采样方法环境卫生学监测采样方法院感科主要内容：主要内容：一、手消毒效果监测采样方法二、物体表面消毒效果监测采样方法三、空气消毒效果监测采样方法四、使用中消毒液染菌量监测采样方法五、内镜标本的监测方法六、紫外线灯管强度监测方法监测消毒效果是否达到标准要求，追寻消毒方法是否正确。采集标本准确，无污染，培养结果准确环境卫生学监测的目的：环境卫生学监测的目的：规范采集标本的意义：规范采集标本的意义：采样前准备：采样前准备：物品准备：检验科准备：培养皿，无菌试管等科室准备：灭菌规格板、无菌棉签、酒精灯、打火机、笔等 一、医务人员手消毒效果监测采样一、医务人员手消毒效果监测采样采取手卫生后，
2、在接触病人或从事医疗活动前进行采样。特殊监测随时进行。采样时间采样时间采样方法正确吗？采样方法正确吗？被检人五指并拢，用浸有无菌生理盐水的无菌拭子在 双手指曲面从指根到指端来回涂擦各两次，并随之转动采样棉拭子（一只手涂抹面积30cm30cm2 2），剪去手接触部位，将拭子放入装有10ml物表采样液的试管中送检。采样面积及方法采样面积及方法检测方法检测方法计算公式计算公式 同物体表面同物体表面 报告方式报告方式计计算算公公式式：物体表面细菌菌落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。皮肤表面标本皮肤表面标本结果判定结果判定：皮肤消毒效果的判定标准遵循WS/T313中外科手
3、消毒卫生标准。a)卫生手消毒，监测的细菌菌落总数应10cfu/cm10cfu/cm2 2。b)外科手消毒，监测的细菌菌落总数应5cfu/cm5cfu/cm2 2。皮肤表面标本的结果判断皮肤表面标本的结果判断二、物体表面消毒效果监测采样方法二、物体表面消毒效果监测采样方法常规监测：在消毒处理后4小时内 进行操作活动前暴发流行时：尽可能对未处理的现场进行采样采样时间采样时间常规监测：S1002取全部 S1002取1002暴发流行时：采样不受面积限制希望得到阳性结果采样面积采样面积采样方法正确吗？采样方法正确吗？用5cmx5cm灭菌规格板放在被检物体表面，用浸有无菌生理盐水的棉拭子1支，在规格板内横
4、竖往返各涂抹5次，并随之转动棉拭子，连续采样4个规格板面积，被采表面100cm2，取全部表面；被采表面100cm2，取100cm2。剪去手接触部分，将拭子放入装有10ml物表采样液试管中送检。门把手等小型物体则利用棉拭子直接涂抹物体表面采样。采采样样物物体体表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。表面有消毒剂残留时，采样液应含相应中和剂。采样方法采样方法检检测测方方法法：充分震荡采样管后，取洗脱液1.0ml接种平皿，将冷至40-45的熔化营养琼脂培养基每皿倾注15ml-20ml，37恒温箱培养48h,计数菌落数，怀疑与医院感染暴发有关时，进行目标微生物的检测。计计算算公公式式：物体表面细菌菌
5、落数总数（cfu/cm2）=平板上菌落数采样液稀释倍数/采样面积。报告方式报告方式：菌落数cfu/cm2 小型物体表面的结果用cfu/件表示物体表面标本的检测与报告物体表面标本的检测与报告1.洁净手术部、其他洁净场所，非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区等；物体表面细菌菌落总数5cfu/cm2。2.儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药室、输血科、消毒供应室、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房等，物体表面细菌菌落总数10cfu/cm2物体表面标本的结果判定物
6、体表面标本的结果判定三、空气消毒效果监测采样方法三、空气消毒效果监测采样方法 消毒处理后与进行医疗活动之前 采样前应关好门窗 静止10分钟进行采样采样时间采样时间采样方法采样方法 平皿沉降法、固体撞击法 采样高度：与地面垂直高度 0.81.5m 距墙宽 1m 平皿布点：S30，3点对角线 S30，5点东南西北中 暴露时间：普通环境5min 重点科室15min 层流室30min 采样方法采样方法类：层流洁净手术室、层流洁净病房 类：普通手术室；产房；新生儿室；导管室；血液病病区、烧伤病区等保护性隔离病区；重症监护病房 等。类：母婴同室；消毒供应中心检查包装灭菌区和无菌物品存放区；血透室；各类普通
7、病区。类：普通门（急）诊及其检查、治疗室；传染病科及病房 采样要求采样要求提出选择在自净系统自净后与从事医疗活动前采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。布点：依据医院洁净手术部建筑技术规范采样方法采样方法将普通营养琼脂平皿放在室内手术区和周边区各采样点，距地面0.81.5m高度，在手术区检测时应无手术台。当手术台已固定，测定高度在台面之上0.25m。暴露30min。采样要求采样要求提出选择室内消毒后或规定的通风换气后与医疗活动前进行空气标本的采样，或怀疑与医院感染暴发有关时采样，使用普通营养琼脂平板采样。（注意：采样前，关闭门、窗，（注意：采样前，关闭门、窗，在无人走
8、动的情况下，静止在无人走动的情况下，静止10min后采样。）后采样。）采样高度（沉降法）采样高度（沉降法）平板置距地面垂直高度0.8m1.5m处。布点方法布点方法室内面积30，设一条对角线上取3点采样，即中心一点，两端各距离墙1m处各取一点；室内面积30，设东、南、西、北、中5点采样，其中东、南、西、北点距离墙1m。采样高度距地面0.81.5m。采样方法采样方法将直径9cm普通营养琼脂平板放置各采样点，将平皿盖打开，扣放于平皿旁，暴露规定时间（类环境15min、类环境5min）后盖上平皿盖及时送检。采样方法采样方法检测培养检测培养将送检平皿置361恒温箱培养48h,计数菌落数，若怀疑与医院感染
9、暴发有关时，进行目标微生物的鉴定。结果处理结果处理计算所有平板菌落数，按公式换算结果。如临床科室要求培养致病菌，则挑取可疑菌落进行鉴定。计算公式计算公式：每个房间所有平板菌落总数/采样点/（皿暴露时间）报告报告:沉降法按平均每皿的菌落数报告：cfu/（皿暴露时间）例如：2cfu/(5min直径9cm平皿)。.洁净手术部（室）和其他洁净场所，空气中的细菌菌落总数要求应遵循50333.非洁净手术部（室）、非洁净骨髓移植病房、产房、导管室、新生儿室、器官移植病房、烧伤病房、重症监护病房、血液病病区空气中的细菌菌落总数cfu（直径平皿）。.儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、人流室、治疗室、注射室、换药
10、室、输血科、消毒供应中心、血液透析中心（室）、急诊室、化验室、各类普通病室、感染疾病科门诊及其病房空气中的细菌菌落总数 4cfu/(5min直径9cm平皿)。四、使用中消毒液染菌量监测四、使用中消毒液染菌量监测采样要求采样要求采集使用中的消毒剂。采集方法采集方法用无菌注射器抽取1ml被检样液，加入9ml消毒中和剂，混匀。培养方法培养方法：同物体表面标本计计算算公公式式：消毒液染菌量（CFU/mL）=平均每皿菌落数10稀释倍数报告方式报告方式：菌落数CFU/mL。结果判断：结果判断：使用中灭菌用消毒液：无菌生长无菌生长；使用中皮肤黏膜消毒液染菌量10CFU/mL；其他使用中消毒液染菌量 100C
11、FU/mL。监测频率灭菌剂：每月监测消毒剂：每季监测五、内镜标本的监测五、内镜标本的监测内镜样本的采样内镜样本的采样用10ml中和液反复冲洗镜后取回收液于试管中送检。培培养养方方法法：同物体表面标本，若临床要求培养致病菌，则收到标本后，取0.1ml均匀接种于普通琼脂培养基表面，放入35培养箱培养48h，观察结果。检出细菌时，则挑取可疑菌落进行鉴定。计计算算公公式式：内镜细菌菌落总数（cfu/件）=平板上菌落的菌落数10报告方式报告方式：“菌落数cfu/件”结果判定结果判定消毒后的内镜合格标准为：细菌总数20cfu/件，不能检出致病菌六、紫外线灯照射强度监测六、紫外线灯照射强度监测 监测方法：监测方法：结果判断：结果判断：照射强度：照射强度：普通普通30 W30 W直管型紫外线灯辐照强直管型紫外线灯辐照强90W/cm90W/cm2 2为合格；为合格；使用中紫外线灯辐照强度使用中紫外线灯辐照强度70 W/cm70 W/cm2 2为合格为合格频率：新灯管使用前监测；频率：新灯管使用前监测；使用中灯管半年监测一次。使用中灯管半年监测一次。注意！采样后应在2小时内送达实验室；实验室若不能即刻检测，应将样品置于冰箱（48）内保存，但不得超过24小时。谢谢谢谢 谢！谢！谢！谢！