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1、 第一节 DNA是主要的遗传物质 第三章第三章 基因的本质基因的本质格里菲斯-肺炎链球菌转化实验(体内转化实验)艾弗里-肺炎链球菌转化实验(体外转化实验)已经加热致死的已经加热致死的S S型细菌,含有某种促使型细菌,含有某种促使R R型活细菌转化为型活细菌转化为S S型细菌的活性物质型细菌的活性物质转化因子转化因子DNADNA才是使才是使R R型菌产生稳定遗传变化的物质型菌产生稳定遗传变化的物质知识回顾实际上,艾弗里实验中无法真正去除蛋白质,纯度最高时仍存在0.02%蛋白质和DNA混在一起,因此有人对实验结论表示怀疑。有没有更好的材料、更好的方法能够将有没有更好的材料、更好的方法能够将DNAD
2、NA和蛋白质和蛋白质分开,分开,单独去观察单独去观察它们的作用呢?它们的作用呢?艾弗里艾弗里4.实验材料:实验材料:T2噬菌体和大肠杆菌。噬菌体和大肠杆菌。3.设计思路:设计思路:放射性同位素标记法放射性同位素标记法(分别标记蛋白质和(分别标记蛋白质和DNA)C、H、O、N、SC、H、O、N、P 用用32P标记标记用用35S标记标记蛋白质组成元素:蛋白质组成元素:DNA组成元素:组成元素:2.实验方法:实验方法:设法把设法把DNA与蛋白质与蛋白质分开分开,单独地直接去观察它们的,单独地直接去观察它们的作用作用。DNA和蛋白质和蛋白质,应分别标记哪一种元素应分别标记哪一种元素?三、噬菌体侵染细菌
3、的实验三、噬菌体侵染细菌的实验赫尔希和蔡斯赫尔希和蔡斯1.实验者:实验者:(T T2 2噬菌体专一寄生噬菌体专一寄生在大肠杆菌体内在大肠杆菌体内)噬菌体的侵染细菌过程噬菌体的侵染细菌过程 噬菌体的繁殖过程:噬菌体的繁殖过程:吸附吸附注入注入注入注入DNADNA合成合成DNADNA复制复制指导蛋白质合成指导蛋白质合成组装组装释放释放增殖需要的条件增殖需要的条件内容内容模板模板_的的DNADNA合成噬菌体合成噬菌体DNADNA的原料的原料_提供的四种脱氧核苷酸提供的四种脱氧核苷酸合成噬菌合成噬菌体蛋白质体蛋白质原料原料_提供提供的氨基酸的氨基酸场所场所_的核糖体的核糖体噬菌体噬菌体 大肠杆菌大肠杆
4、菌 大肠杆菌大肠杆菌 噬菌体的复制式增殖噬菌体的复制式增殖大肠杆菌大肠杆菌 如何单独获得只有35S或32P标记的T2噬菌体?3535S S标记的噬菌体标记的噬菌体3232P P标记的噬菌体标记的噬菌体能否直接用含有放射性同位素的培养基来培养噬菌体?T2噬菌体营寄生生活,无法独立生存。故应先培养细菌,再用细菌培养噬菌体。先标记大肠杆菌,再标记噬菌体先标记大肠杆菌,再标记噬菌体5.5.噬菌体侵染细菌的实验步骤噬菌体侵染细菌的实验步骤3535S S标记的标记的噬菌体噬菌体3232P P标记的标记的噬菌体噬菌体离心后离心后离心后离心后上清液的上清液的放射性很高放射性很高沉淀物的沉淀物的放射性很低放射性
5、很低细菌裂解细菌裂解细菌裂解细菌裂解沉淀物的沉淀物的放射性很高放射性很高上清液的上清液的放射性很低放射性很低在新形成的噬菌在新形成的噬菌体中没有检测到体中没有检测到3535S S在新形成的部分在新形成的部分噬菌体中检测到噬菌体中检测到3232P P用标记的噬菌体侵用标记的噬菌体侵染未标记的细菌染未标记的细菌在搅拌器中搅拌、离心,检测上在搅拌器中搅拌、离心,检测上清液和沉淀物中的放射性物质清液和沉淀物中的放射性物质3535S S标记的噬菌标记的噬菌体与细菌混合体与细菌混合3232P P标记的噬菌标记的噬菌体与细菌混合体与细菌混合噬菌体分别被噬菌体分别被3535S S或或3232P P标记标记搅拌
6、后离心搅拌后离心搅拌后离心搅拌后离心、用标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌、用标记的噬菌体侵染未标记的大肠杆菌细菌裂解后检测子代细菌裂解后检测子代噬菌体的放射性噬菌体的放射性分组分组结果结果结果分析结果分析对比对比实验实验(相互相互对照对照)被被3232P P标记的标记的T T2 2噬噬菌体细菌菌体细菌上清液中几乎无上清液中几乎无3232P P,3232P P主要分布在宿主细胞内主要分布在宿主细胞内被被3535S S标记的标记的T T2 2噬噬菌体细菌菌体细菌宿主细胞内无宿主细胞内无3535S,S,3535S S主要主要分布在上清液中分布在上清液中3232PDNAPDNA进入了宿进入了宿主细胞内
7、主细胞内3535SS蛋白质外壳未进入蛋白质外壳未进入宿主细胞,留在外面宿主细胞,留在外面第一次第一次检查发现:检查发现:说明:说明:将蛋白质与将蛋白质与DNADNA分开分开,单独地单独地、直接地直接地观察它们观察它们各自的作用各自的作用。6.6.实验结果分析实验结果分析三、噬菌体侵染细菌的实验三、噬菌体侵染细菌的实验亲代噬菌体亲代噬菌体原宿主细菌内原宿主细菌内子代噬菌体子代噬菌体实验结论实验结论3232P P标记的标记的DNADNA3535S S标记的标记的蛋白质蛋白质无无3232P P标记的标记的DNADNA无无3535S S标记标记的蛋白质的蛋白质DNADNA有有3232P P标记标记蛋白
8、质外壳蛋白质外壳无无3535S S标记标记DNADNA是遗传物质是遗传物质第二次第二次检查发现:检查发现:说明:说明:噬菌体侵染细菌实验证明DNA是遗传物质,蛋白质不是遗传物质6.6.实验结果分析实验结果分析三、噬菌体侵染细菌的实验三、噬菌体侵染细菌的实验归纳提炼归纳提炼 :噬菌体侵染细菌实验中上清液和沉淀物:噬菌体侵染细菌实验中上清液和沉淀物用35S标记 a.上清液放射性很高的原因:b.沉淀物有放射性的原因:含35S的蛋白质外壳 大肠杆菌,离心后浮于上清液中。没有进入没有进入 ,有少量含35S的蛋白质外壳吸附在细菌表面,随细菌离心到沉淀物中。搅拌不充分搅拌不充分用32P标记 a.沉淀物放射性
9、很高的原因:b.上清液有放射性的原因:含32P的DNA 大肠杆菌,离心后存在于沉淀物中。保温时间 ,部分噬菌体还 大肠杆菌;保温时间 ,大肠杆菌已 。进入进入过短过短没有侵染没有侵染过长过长裂解释放出子代噬菌体裂解释放出子代噬菌体归纳提炼归纳提炼 :噬菌体侵染细菌实验中上清液和沉淀物:噬菌体侵染细菌实验中上清液和沉淀物四、烟草花叶病毒感染实验四、烟草花叶病毒感染实验烟草花叶病毒烟草花叶病毒 RNA蛋白质蛋白质左:正常烟叶左:正常烟叶 右:病叶右:病叶蛋白质蛋白质RNA 分别侵染健康烟草植株分别侵染健康烟草植株患病患病不患病不患病得到全新病毒得到全新病毒不能得到病毒不能得到病毒 :结论:结论:结
10、论:结论:烟草花叶病毒的遗传物质是烟草花叶病毒的遗传物质是RNA。不同生物体内遗传物质不同生物体内遗传物质绝大多数绝大多数绝大多数绝大多数生物的遗传物质是生物的遗传物质是生物的遗传物质是生物的遗传物质是 ;只有少部分生物的遗传物质是;只有少部分生物的遗传物质是;只有少部分生物的遗传物质是;只有少部分生物的遗传物质是 。DNARNADNA是主要的遗传物质。是主要的遗传物质。DNARNADNA生物类型遗传物质实例有细胞结构的生物真核生物玉米、小麦、人原核生物原核生物乳酸菌、蓝藻乳酸菌、蓝藻无细胞结构的生物DNA病毒T2噬菌体RNA病毒烟草花叶病毒知识小结知识小结 生物类型RNA病毒DNA病毒原核生
11、物真核生物体内核酸种类DNARNADNA和RNADNA和RNA体内碱基种类_种_种 种 种体内核苷酸种类 种 种 种 种遗传物质DNARNA_实例噬菌体烟草花叶病毒细菌、蓝细菌玉米、小麦、人455488DNADNA特别提醒:不同生物的遗传物质提醒常见的RNA病毒有:烟草花叶病毒、HIV、新冠病毒等。44小结:探究遗传物质的思路和方法【1】思路设法将物质分开,单独看各自作用【2】方法分离提纯法同位素标记法酶解法病毒重组法探究遗传物质是什么?格里菲斯-肺炎链球菌转化实验(体内转化实验)艾弗里-肺炎链球菌转化实验(体外转化实验)赫尔希+蔡斯-噬菌体侵染实验烟草花叶病毒感染烟草实验已经加热致死的已经加热致死的S S型细菌,含有某种促使型细菌,含有某种促使R R型活细菌转化为型活细菌转化为S S型细菌的活性物质型细菌的活性物质转化因子转化因子DNA才是使R型菌产生稳定遗传变化的物质DNA是噬菌体的遗传物质RNA是烟草花叶病毒的遗传物质综上所述:DNA是主要的遗传物质知识小结知识小结