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1、1放射性核素标记化合物放射性核素标记化合物 Radionuclide Labelled Compouds2示踪技术 观察野生动物大熊猫的生活习性观察野生动物大熊猫的生活习性无线电发射器无线电发射器 示踪物示踪物 放射性核素放射性核素酶酶荧光素荧光素 31923年年,G.Hevesy首次通过测定放射性铅的射线来首次通过测定放射性铅的射线来观察其在动、植物体内的分布;观察其在动、植物体内的分布;1952年年 Hershey 32P、35S DNA是遗传物质;是遗传物质;1959年年 Berson、Yalow RIA;1958年年 Meselson、Stahl DNA半保留复制;半保留复制;1977
2、 年,年,Frederick Sanger 等采用放射性标记技术等采用放射性标记技术和和ARG,成功地进行了,成功地进行了DNA 序列测定序列测定。示踪实验之父示踪实验之父32P、131I、14C、3H先后被用于医学实验研究先后被用于医学实验研究RNA-DNARNA-DNA逆转录、遗传的三联密码、细胞周期、微量物逆转录、遗传的三联密码、细胞周期、微量物质测量等均离不开示踪技术。质测量等均离不开示踪技术。4如何用噬菌体感染实验如何用噬菌体感染实验证明证明DNA DNA 是遗传信息的载体是遗传信息的载体?Introduction5如何用噬菌体感染实验证明如何用噬菌体感染实验证明DNA DNA 是遗
3、传信息的载体是遗传信息的载体?635S32P35S32P子代子代分离蛋白质外分离蛋白质外壳及壳及DNADNA内核,内核,并测量放射性并测量放射性蛋白质外壳无蛋白质外壳无放射性,放射性,DNADNA上有放射性!上有放射性!DNADNA是遗传物质!是遗传物质!如何用噬菌体感染实验证明如何用噬菌体感染实验证明DNA DNA 是遗传信息的载体是遗传信息的载体?7为什么要用核素作为示踪剂?为什么要用核素作为示踪剂?一般非放射性物质进入机体后无法区别哪些是外来的?哪一般非放射性物质进入机体后无法区别哪些是外来的?哪些是原有的物质?些是原有的物质?有些物质进入机体后发生代谢转化、分解,无法再找到它有些物质进
4、入机体后发生代谢转化、分解,无法再找到它的踪迹。的踪迹。Tracer8核医学应用核医学应用 9PET and SPECT:Advanced Imaging SystemsPositron Emission TomographySingle-Photon Emission Computed TomographyA PET scan can be an effective tool to diagnose Parkinsons disease10Radiopharmaceutical Radiotherapy PrincipleNormal Abnormal 11放射性核素标记化合物:放射性核素标
5、记化合物:它是指在化合物分它是指在化合物分子中引入可起示踪作用的放射性核素,并保持原有化合物的子中引入可起示踪作用的放射性核素,并保持原有化合物的理化和生物学性质不变的一类化合物。理化和生物学性质不变的一类化合物。12第一节第一节 基本概念基本概念13一、几个重要参数一、几个重要参数1.1.放射性浓度放射性浓度:它是指单位体积的溶液中含有的放射它是指单位体积的溶液中含有的放射 性活度。以性活度。以Bq/L或或Bq/ml等表示。等表示。2.2.放射化学纯度:放射化学纯度:指所指定的放射性标记化合物的放指所指定的放射性标记化合物的放 射性活度占该样品的总放射性活度的百分比。射性活度占该样品的总放射
6、性活度的百分比。要求要求 放化纯度要达到放化纯度要达到95%以上以上 放化纯度放化纯度(%)=(标记物的放射性活度标记物的放射性活度)/(样品总的放射性活样品总的放射性活度度)100%3.3.放射性比活度放射性比活度单位质量(摩尔、容积)物质所含放射性的多少,单位质量(摩尔、容积)物质所含放射性的多少,后者常称为放射性浓度。后者常称为放射性浓度。单位:单位:MBq/mg、GBq/mg、TBq/g或或MBq/mmol、GBq/mmol、MBq/ml。14二、同位素标记与非同位素标记二、同位素标记与非同位素标记同位素标记:同位素标记:指化合物中的某一稳定核素被其放射性同指化合物中的某一稳定核素被其
7、放射性同位素置换的方法。如用位素置换的方法。如用3H取代化合物分子中的取代化合物分子中的1H。非同位素标记:非同位素标记:采用并非原化合物所含元素的放射性核采用并非原化合物所含元素的放射性核素进行标记的方法。如蛋白质用素进行标记的方法。如蛋白质用131I或或125I标记,所得标记标记,所得标记物与原来化合物不完全相同。物与原来化合物不完全相同。1516三、定位标记与非定位标记三、定位标记与非定位标记定位标记:定位标记:指标记原子标记在化合物的指定位置上,以符号指标记原子标记在化合物的指定位置上,以符号“S”表示。例如表示。例如1(S)-14C-醋酸、醋酸、2(S)-14C-醋酸,前者表示醋酸,
8、前者表示14C标标记在醋酸羧基碳上,即记在醋酸羧基碳上,即CH3-14COOH,后者则标记在甲基碳上,后者则标记在甲基碳上,即即14CH3-COOH,两者所能示踪的基团不同,制备二者的合成路,两者所能示踪的基团不同,制备二者的合成路线也完全不同。线也完全不同。17三、定位标记与非定位标记三、定位标记与非定位标记非定位标记:非定位标记:分为均匀标记和全标记分为均匀标记和全标记。均匀标记:指放射性原子均匀地分布于分子中,以均匀标记:指放射性原子均匀地分布于分子中,以“U”表示。表示。如用如用14CO2通过植物光合作用制得的通过植物光合作用制得的14C-葡萄糖其中分子六个碳原葡萄糖其中分子六个碳原子
9、从统计学上看被均匀标记上子从统计学上看被均匀标记上14C,故可写成,故可写成14C-葡萄糖葡萄糖(U)或或u-14C-葡萄糖。葡萄糖。全标记:是指放射性核素的原子随机地无严格定位地分布于被标全标记:是指放射性核素的原子随机地无严格定位地分布于被标记化合物分子结构上,以记化合物分子结构上,以“G”表示。如表示。如G-3H-胆固醇,标记分子胆固醇,标记分子中的所有氢原子都可被取代,但机率各不相同。中的所有氢原子都可被取代,但机率各不相同。1819四、双标记与多标记四、双标记与多标记20第二节第二节 放射性核素标记化合物的制备放射性核素标记化合物的制备21一、放射性核素的选择一、放射性核素的选择结合
10、牢固、稳定性好;结合牢固、稳定性好;有合适的半衰期;有合适的半衰期;射线容易测量;射线容易测量;其它:操作、价格、防护。其它:操作、价格、防护。22二、制备放射性标记化合物要考虑的因素二、制备放射性标记化合物要考虑的因素放射性核素的获取及其价格;放射性核素的获取及其价格;标记物的稳定性;标记物的稳定性;微量操作技术;微量操作技术;进行冷试验。进行冷试验。23三、放射性标记化合物制备的基本方法三、放射性标记化合物制备的基本方法同位素交换法同位素交换法化学合成法化学合成法生物合成法生物合成法络合物络合物/螯合物生成法螯合物生成法24三、放射性标记化合物制备的基本方法三、放射性标记化合物制备的基本方
11、法1 1、同位素交换法、同位素交换法放射性核素与要标记的化合物中同一元素的稳定同位素相互交放射性核素与要标记的化合物中同一元素的稳定同位素相互交换来制备放射性标记化合物的方法。换来制备放射性标记化合物的方法。优点:方法简便,易于操作。适宜于稀有、结构复杂的有机化优点:方法简便,易于操作。适宜于稀有、结构复杂的有机化合物的标记。合物的标记。缺点:无进行定位标记,且有机化合物主链上的原子无法标记,缺点:无进行定位标记,且有机化合物主链上的原子无法标记,标记物的比放射性低标记物的比放射性低。25三、放射性标记化合物制备的基本方法三、放射性标记化合物制备的基本方法2 2、化学合成法、化学合成法通过各种
12、化学反应,将放射性核素引入到待标记化合物特定位通过各种化学反应,将放射性核素引入到待标记化合物特定位置上的标记方法。置上的标记方法。优点:可以选择标记的核素、标记的位置(优点:可以选择标记的核素、标记的位置(定位标记定位标记)、比放)、比放射性可以严格控制(射性可以严格控制(比活度高比活度高),分离提纯容易(),分离提纯容易(纯度高纯度高)。)。缺点:步骤多、流程长、费时费力。缺点:步骤多、流程长、费时费力。26三、放射性标记化合物制备的基本方法三、放射性标记化合物制备的基本方法3 3、生物合成法、生物合成法利用生物活体(动、植物或细菌)的生理代谢或离体酶的生物利用生物活体(动、植物或细菌)的
13、生理代谢或离体酶的生物活性将简单的放射性物质在活体内或试管中转化成为具有生物活活性将简单的放射性物质在活体内或试管中转化成为具有生物活性的放射性核素标记化合物的方法。性的放射性核素标记化合物的方法。优点:可以保留标记物原有的生物活性。优点:可以保留标记物原有的生物活性。缺点:纯化比较复杂。缺点:纯化比较复杂。27三、放射性标记化合物制备的基本方法三、放射性标记化合物制备的基本方法4 4、络合物、络合物/螯合物生成法螯合物生成法将放射性金属离子与特定的化合物进行络合和螯合反应,标记将放射性金属离子与特定的化合物进行络合和螯合反应,标记到化合物分子上的方法。到化合物分子上的方法。优点:操作简单、快
14、速。优点:操作简单、快速。缺点:对标记化合物的活性影响较大。缺点:对标记化合物的活性影响较大。28第三节第三节 几种常用放射性标记化合物的制备几种常用放射性标记化合物的制备29同位素交换法、化学合成法、生物合成法同位素交换法、化学合成法、生物合成法(2)制备:制备:(1)核素特点:核素特点:一、一、14C 标记化合物的制备标记化合物的制备30T1/2 12.33年年-Emax18.4 keV低低毒性毒性人工放射性核素中能量最低人工放射性核素中能量最低C3H 不如不如 CC 牢固牢固,易脱落,易脱落标记化合物不稳定标记化合物不稳定(1)核素特点:核素特点:同位素交换法、化学合成法、生物合成法同位
15、素交换法、化学合成法、生物合成法(2)制备:制备:二、氚二、氚(3H)标记化合物的制备标记化合物的制备31三、放射性碘标记化合物的制备三、放射性碘标记化合物的制备32125I T1/260d标记物储存应用一段时间、商品化标记物储存应用一段时间、商品化低能低能 射线射线,无,无 粒子粒子辐射分解少,标记物稳定性好辐射分解少,标记物稳定性好三、放射性碘标记化合物的制备三、放射性碘标记化合物的制备33CONHCH2COOHICONHCH2COOH131I+Na131IKIOKIO3 3H+131I邻碘马尿酸邻碘马尿酸(一一)同位素交换法同位素交换法HOIHO131I Na131I150 1h131I
16、6 胆固醇胆固醇34(二二)蛋白质、多肽的碘标记技术蛋白质、多肽的碘标记技术Na125IHOCH2CHCOOHCH2CHCOOHHO125I+125I2NH2NH2125I碘代酪氨酸碘代酪氨酸氧化剂氧化剂 Ch-T,H2O2标记原理:标记原理:35NHN125ICH2CHCOOHNH2125I碘代碘代组氨酸组氨酸N125ICH2CHCOOHNH2125I碘代碘代色氨酸色氨酸36蛋白质、多肽的碘标记常用方法蛋白质、多肽的碘标记常用方法37381.氯胺氯胺T 法法SO2NCH3NaCl+2Na125I+2H2OSO2NHCH3+125I2+NaCl2NaOH温和氧化剂温和氧化剂39反应液组成:反应
17、液组成:Na125I 74MBqMBq(10L10L)蛋白质蛋白质 5gg(10L10L)缓缓 冲液(冲液(pH7.4)30LL 氯胺氯胺 T 100gg(10L10L)室温室温13min 加加Na2S2O5 200gg(0.2mL)0.2mL)中止反应中止反应用用SephadexG50柱层析柱层析分离纯化分离纯化 125I-蛋白质蛋白质4041422.乳过氧化物酶法乳过氧化物酶法乳过氧化物酶乳过氧化物酶 +H2O2 O2(新生氧)新生氧)标记原理:标记原理:Na125I125I243反应液:反应液:Na125I 37MBq(10L10L)缓缓 冲液(冲液(pH5.6)30LL蛋白质蛋白质 5
18、gg(10L10L)乳过氧化物酶乳过氧化物酶 25ngng(10L10L)H2O2 200ngng(10L10L)室温室温7min 巯基乙醇(巯基乙醇(10mmol/L10mmol/L)0.5mL(mL(中止反中止反应应)H2O2 200ngng(10L10L)室温室温7min H2O2 200ngng(10L10L)室温室温7min 加入加入NaI载体溶液载体溶液,用用SephadexG50柱层析柱层析分离纯分离纯化化 125I-蛋白质蛋白质44注意事项:注意事项:1.乳过氧化物酶使用前新鲜配制乳过氧化物酶使用前新鲜配制2.H2O2保持低浓度:保持低浓度:0.1mmol/L3.酶的浓度酶的浓
19、度,标记率,标记率酶的用量酶的用量 1%标记蛋白标记蛋白酶自身碘化而引入的放化杂质酶自身碘化而引入的放化杂质453.3.双酶标记法双酶标记法葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶葡萄糖葡萄糖 H H2 2O O2 2标记原理:标记原理:乳过氧化物酶乳过氧化物酶O2(新生氧)新生氧)Na125I125I246反应液:反应液:Na125I 37MBq(10L)缓缓 冲液(冲液(pH7.0)30L蛋白质蛋白质 5g(10L)乳过氧化物酶乳过氧化物酶 25ng(10L)葡萄糖氧化酶葡萄糖氧化酶 10ng(10L)室温室温420min葡萄糖葡萄糖(0.5%)5L(2)0.1%叠氮钠叠氮钠 100L 中止反应中止反应(
20、3)用用Sephadex柱层析柱层析分离纯化分离纯化474.固相氧化法固相氧化法固相酶法固相酶法:将乳过氧化物酶等交联在琼脂糖凝胶上将乳过氧化物酶等交联在琼脂糖凝胶上氯甘脲法氯甘脲法:(Iodogen)NNNNOOClClClCl固相氧化剂(温和)固相氧化剂(温和)1,3,4,6-四氯四氯 3a,6a-双苯基甘脲双苯基甘脲4、48 1mg 氯甘脲氯甘脲 溶于溶于25mL二氯甲烷,取二氯甲烷,取50L加入加入3mL试试 管中,用管中,用N2气吹干,在试管底部形成气吹干,在试管底部形成 氯甘脲薄膜氯甘脲薄膜 -20条件下可保存半年条件下可保存半年 (Iodogen管管)(2)(2)试管中加入:试管
21、中加入:Na125I 37MBq(10L10L)缓缓 冲液(冲液(pH7.4)30LL蛋白质蛋白质 5gg(10L10L)室温室温3min(3)(3)取出反应液,上柱取出反应液,上柱分离纯化分离纯化 125I-蛋白质蛋白质特点特点:标记率高,标记蛋白损伤少标记率高,标记蛋白损伤少杂质少,多为单碘化合物杂质少,多为单碘化合物49 二、二、50联接标记法联接标记法(BoltonHunter法法)CH2CH2CO NHOOOO125I125ICH2CH2CO NOHOOO+NH2CHCOCH2CH2CHOO125I125INHCHCO3(对羟基苯对羟基苯)丙酸丙酸N 琥珀亚胺酯琥珀亚胺酯125I标记
22、蛋白质标记蛋白质蛋白质分子末端氨基蛋白质分子末端氨基Na125IChT(联接试剂联接试剂)51室温室温13 min具体操作方法:具体操作方法:碘化碘化:琥珀亚胺酯琥珀亚胺酯 0.4gNa125I 74MBq氯胺氯胺 T 50g(10L)Na2S2O5 120g(10L)NaI 2mg苯苯 250g(2)联接联接:分离上述苯液,移入试管,用分离上述苯液,移入试管,用N2气吹干后加入气吹干后加入:蛋白质蛋白质 10gPB(pH8)50L室温室温1030 min甘氨酸甘氨酸(0.2mol)500L0,5 min(3)上柱分离纯化上柱分离纯化125I-标记蛋白质标记蛋白质52优点优点二部操作,避免蛋白
23、质变性二部操作,避免蛋白质变性 缺点缺点蛋白质接上琥珀亚胺酯,分子较大,影响活性蛋白质接上琥珀亚胺酯,分子较大,影响活性 标记率低标记率低53第四节第四节 放射性标记化合物的纯化和鉴定放射性标记化合物的纯化和鉴定54没有被标记上的游离放射性核素,如碘标残存的没有被标记上的游离放射性核素,如碘标残存的125125I I;待标记物中杂质亦被标记,如蛋白标记中的杂蛋白;待标记物中杂质亦被标记,如蛋白标记中的杂蛋白;标标记记后后形形成成的的杂杂质质,如如在在储储存存期期内内,或或者者由由于于标标记记物物本本身身的的不不稳稳定定,或或者者由由于于辐辐射射自自分分解解,产产品品的的性性质质、结结构构等等可
24、可能能发发生生变变化化而而形形成成的的放放射射性性杂杂质质,所所以以标标记记结结束束一段时间后再用的化合物需要进行重新的纯化鉴定。一段时间后再用的化合物需要进行重新的纯化鉴定。一、放射性杂质的来源一、放射性杂质的来源55标记率:标记率:指放射性核素被标记到待标记化合物上的量占指放射性核素被标记到待标记化合物上的量占放射性总的投入量的百分比。放射性总的投入量的百分比。标标记率记率(%)=标记物的放射性标记物的放射性/投入的总放射性投入的总放射性100%测定方法:测定方法:最常用最常用纸层析或薄层层析法纸层析或薄层层析法,对于生物制剂,对于生物制剂有时也用柱层析或蛋白沉淀法。有时也用柱层析或蛋白沉
25、淀法。二、标记率的测定二、标记率的测定56常用方法:常用方法:层析法,主要有纸层析、薄板层析柱层析(如层析法,主要有纸层析、薄板层析柱层析(如凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析)等。凝胶过滤层析、离子交换层析和亲和层析)等。三、标记物的分离纯化三、标记物的分离纯化5758测定放化纯度的测定放化纯度的常用方法常用方法放射性产物放射性产物标准品标准品放射化学纯度放射化学纯度%=特定化学形态的放射性活度特定化学形态的放射性活度样品总放射性活度样品总放射性活度100%层析法和电泳法层析法和电泳法纸纸层析、薄板层析层析、薄板层析59601 1、放射化学纯度鉴定:、放射化学纯度鉴定:包括放射性纸层析法、
26、放射性高包括放射性纸层析法、放射性高效液相层析法、放射性凝胶电泳法等。效液相层析法、放射性凝胶电泳法等。2 2、放射性浓度测定:、放射性浓度测定:取取1ml产品,测其放射性活度,即产品,测其放射性活度,即为放射性浓度,单位为为放射性浓度,单位为Bq/ml。3 3、放射性比活度测定:、放射性比活度测定:采用直接测定法,即将纯化后的采用直接测定法,即将纯化后的标记物配成合适的溶液,测量其放射性浓度(标记物配成合适的溶液,测量其放射性浓度(Bq/L)及其化)及其化学浓度(学浓度(mmol/L)。)。四、标记物的鉴定四、标记物的鉴定614.4.生物活性及免疫活性测定:生物活性及免疫活性测定:标记物制备
27、过程中的各种标记物制备过程中的各种因素都可能导致生物活性、免疫活性的改变,因此,生物学因素都可能导致生物活性、免疫活性的改变,因此,生物学活性、免疫活性测定是一个重要的质量指标。活性、免疫活性测定是一个重要的质量指标。5.5.其他:其他:物理化学鉴定及化学纯度鉴定。物理化学鉴定及化学纯度鉴定。四、标记物的鉴定四、标记物的鉴定6263第五节第五节 放射性标记化合物的辐射自分解放射性标记化合物的辐射自分解64辐辐射射自自分分解解(autoradiolysis):由由于于标标记记化化合合物物所所含含放放射射性性核核素素电电离离辐辐射射的的作作用用,致致使使标标记记化化合合物物本本身身或或临临近近的的
28、分分子子的的结结构构被被破破坏坏,从从而而丧丧失失原原有有特特性性的的现现象象。会会产产生生放放射射化化学学杂杂质质或或化化学学杂杂质质。如如3 3H-H-丙丙醇醇,由由于于辐辐射射自自分分解解,产产生生甲烷,乙醛,丙醛,异丙醇及丙烯醇等。甲烷,乙醛,丙醛,异丙醇及丙烯醇等。651.初初级级内内分分解解:指指标标记记核核素素本本身身的的衰衰变变,引引起起带带有有该该核核素素的的标标记记物物分分子子结结构构发发生生变变化化,如如:14C标标记记的的化化合合物物,当当14C衰衰变变成成14N,原原来来14C的的位位置置必必然然发发生生键键的的断断裂裂,从从而而导导致致该该分分子子的的破破坏坏,并并
29、且且这这种种分分解解方方式式是是放放射射性性标标记记化化合合物物固固有有的的特特性性,目目前前还还不不能人为加以控制。能人为加以控制。一、辐射自分解的方式一、辐射自分解的方式662、初级外分解:、初级外分解:标记核素所发出的射线直接作用于标记标记核素所发出的射线直接作用于标记化合物本身或临近的同种分子,使得该分子的电离、激发并最终化合物本身或临近的同种分子,使得该分子的电离、激发并最终导致其化学键断裂,比放射性愈高,标记分子愈集中,这种作用导致其化学键断裂,比放射性愈高,标记分子愈集中,这种作用愈明显。愈明显。3、次级分解:、次级分解:射线首先作用于标记化合物临近的分子射线首先作用于标记化合物
30、临近的分子(如如水分子水分子),使其产生激活物质或称自由基,这些化学性质活泼自由,使其产生激活物质或称自由基,这些化学性质活泼自由基可以作用于标记化合物分子,使其产生断键、氧化及分解作用。基可以作用于标记化合物分子,使其产生断键、氧化及分解作用。一、辐射自分解的方式一、辐射自分解的方式67二、影响辐射自分解的因素二、影响辐射自分解的因素1、标记化合物发射射线种类及能量、标记化合物发射射线种类及能量 不同种类的射线,不同种类的射线,电离能力强,造成的辐射自分解就越严重。电离能力强,造成的辐射自分解就越严重。如如射线电离能力比射线电离能力比射线小得多,引起的辐射自分解也小得多。同射线小得多,引起的
31、辐射自分解也小得多。同种射线如同为种射线如同为射线,能量不同,造成的辐射自分解结果也不同。射线,能量不同,造成的辐射自分解结果也不同。例如例如32P与与3H同为同为射线,虽然前者能量大于后者,但后者的射程短,射线,虽然前者能量大于后者,但后者的射程短,射线的能量几乎全部或大部分为自己或相邻的分子所吸收,所以射线的能量几乎全部或大部分为自己或相邻的分子所吸收,所以3H的辐射自分解大于的辐射自分解大于32P。68二、影响辐射自分解的因素二、影响辐射自分解的因素2、标记化合物的比活度及浓度、标记化合物的比活度及浓度 标记化合物的比活度或浓度愈高,化合物分子愈集中,它们相标记化合物的比活度或浓度愈高,
32、化合物分子愈集中,它们相互间也就愈易受到自身射线的照射而使辐射自分解加重。互间也就愈易受到自身射线的照射而使辐射自分解加重。3、标记化合物的纯度、标记化合物的纯度 杂质的存在,特别是那些容易被电离辐射所激发、分解、产生自杂质的存在,特别是那些容易被电离辐射所激发、分解、产生自由基的杂质,可加速辐射自分解,且随着时间的延长而逐渐加快。由基的杂质,可加速辐射自分解,且随着时间的延长而逐渐加快。4、所用的溶剂、所用的溶剂5、储存温度等、储存温度等 一般来说,温度越低,辐射自分解越慢。一般来说,温度越低,辐射自分解越慢。691、降低标记化合物的比活度:、降低标记化合物的比活度:辐射自分解的速度与比活度
33、辐射自分解的速度与比活度成正比,贮存时应根据实际工作需要,将标记化合物用同种化合物成正比,贮存时应根据实际工作需要,将标记化合物用同种化合物(即即载体载体)稀释到所需的比活度。稀释到所需的比活度。2、选择适当的溶剂、选择适当的溶剂3、加入自由基清除剂:、加入自由基清除剂:常用少量常用少量(1%3%)乙醇。乙醇。4、降低贮存温度:、降低贮存温度:温度降低,自由基与标记分子相作用的反应温度降低,自由基与标记分子相作用的反应速度也降低,从而辐射自分解也降低。速度也降低,从而辐射自分解也降低。5、定期纯化、定期纯化 三、控制辐射自分解的方法三、控制辐射自分解的方法70分子核医学分子核医学71 分分子子
34、核核医医学学:以以分分子子识识别别作作为为理理论论基基础础,利利用用放放射射性性核核素素标标记记的的示示踪踪剂剂,从从分分子子水水平平去去认认识识生生命命现现象象和和疾疾病病发发生生、发发展展的的规规律律,从从而而诊诊断断与与治治疗疗疾疾病病的的一一门门综综合合性性的的边边缘缘性性学科学科。72当前分子核医学几个重要研究领域当前分子核医学几个重要研究领域放射免疫显像和放射免疫治疗放射免疫显像和放射免疫治疗 放射受体显像和受体介导的靶向治疗放射受体显像和受体介导的靶向治疗放射基因显像和基因的放射治疗放射基因显像和基因的放射治疗代谢显像代谢显像 73示踪技术在分子核医学中的应用示踪技术在分子核医学
35、中的应用 DNA是遗传信息的携带者、是遗传信息的携带者、DNA的半保留复制、转录、遗传的半保留复制、转录、遗传密码的破译等都是借助核素示踪技术得以阐明的;分子生物学中的密码的破译等都是借助核素示踪技术得以阐明的;分子生物学中的常用技术,如核酸序列分析技术、核酸分子杂交技术、常用技术,如核酸序列分析技术、核酸分子杂交技术、DNA重组技重组技术、术、PCR技术等往往也离不开核素示踪这一重要的手段;而在蛋白技术等往往也离不开核素示踪这一重要的手段;而在蛋白质生物合成研究中,核素示踪技术更是重要的研究手段。质生物合成研究中,核素示踪技术更是重要的研究手段。74DNA的缺口平移法的缺口平移法 随机引物法随机引物法单链单链DNA探针的标记探针的标记 cDNA探针的标记探针的标记核酸探针标记的方法核酸探针标记的方法7576Lecture Is Ended THANKS FOR ATTENTION!