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1、回冻法在林麝解剖中的应用摘要：对林麝开展深层次解剖研究，可进一步了解其形态结构 和生理机能。本文在未改变林麝材料各器官自然形态结构下，采用回 冻法对林麝各器官的形态、构造、位置关系进行解剖研究，充分保留 了各脏器的原有色泽和形状，有效的缓解了林麝尸体腐烂速度，提高 了林麝材料的利用效率，有利于收集各组织器官的细微解剖数据，为 林麝的解剖学研究提供了一种切实可行的方法。关键词：林麝；解剖；回冻法中图分类号：S865.41文献标识码：A DOI ： 10.11974/nyyjs. 20150932002林麝为国家一级保护濒危动物，由于数量稀少，人们对这种动物 还不甚了解。开展深层次解剖研究，揭示林
2、麝体内精细结构，对于林 麝的形态学研究、生理学研究、病理学研究以及发育生物学研究等都 具有重要意义。在解剖过程中，我们最常用的解剖方法就是液体填充 管道法、化学物质固定铸型法、X射线造影法、神经溃变法等。采用 这些方法之后，很难恢复材料的原貌，并不能对其进行二次利用。要 获得林麝原材料很不容易，一旦获得，若处置不当或没有很好地保存, 便会造成资源的浪费。在动物解剖过程中，冷冻技术可解决标本表面 的结缔组织毛修净和肌肉断头切齐问题1。根据这个原理，本文在 未改变林麝材料各器官的自然形态结构下，通过冷冻方法对其进行固 定，采用回冻法对林麝各器官的形态位置、构造、位置关系进行解剖 研究，分析林麝材料
3、的变化，为后续的解剖工作提供一定的理论依据。1材料与方法1.1 动物来源及样本不同年龄及不同性别林麝共10只，其中，6只来自四川养麝研 究所马尔康养獐场，4只来自四川养麝研究所都江堰养麝场，均为自 然死亡。1.2 林麝材料冷冻固定方法林麝自然死亡后，在支架和布带的辅助作用下，根据林麝活体时 的站姿，在不影响器官位置、形态、大小的情况下，将其保定后，放 入-20C冰柜冷冻定型。1. 3解剖方法采用徒手拔毛法，除去林麝外皮毛发,对林麝材料进行大体解剖, 分析不同解剖方法对林麝材料各组织的影响，并对林麝材料进行局部 分析，观测回冻法在局部解剖中的作用程度（注：回冻法：对冷冻后 的林麝材料进行解剖，在
4、解剖研究过程中，发现组织出现解冻软化现 象，立刻又将其放回-20低温冰箱进行冷藏，经过12h后，发现 组织出现硬化状态，此刻便可再次取出材料对其进行解剖分析）。1.4 资料整理和分析所有图片均采用Canon 5DH相机进行拍摄。2结果与分析1.5 不同解剖方法对林麝材料的影响取3只自然死亡的林麝材料直接进行解剖，另取7只经过冷冻的 林麝材料进行回冻解剖。随着解剖时间的增加，观察两种解剖方法对 林麝材料肌肉的影响（图4）。发现在解剖第1天，常温下解剖肉 色呈现红润状态，冷冻后的肉色也呈现相同的状态；在解剖第3天, 常温下的肌肉组织呈现黑褐色，出现腐败迹象，回冻后的肌肉组织依 然保持原样，呈现出樱
5、桃红色，并且层次分明，易于剥离。1.6 回冻法解剖效果观察对6只林麝材料进行局部解剖，观测林麝材料内脏组织的变化情 况（图5-7）0对比发现6只林麝内脏组织在3次解冻后所呈现的色 彩基本相同，均为鲜红色。2. 3完全解冻后各组织状态取1只林麝进行完全解冻，发现各器官保存良好，富有弹性，呈 自然色泽，界限分明，能够清晰分辨出肌肉系统、心血管系统、神经 系统和内脏系统。图8T0分别显示了林麝被皮血管分布情况、内脏 系统的在体固定位置、腹腔网膜覆盖情况。3讨论与分析2.4 不同解剖方法对林麝材料的影响在常温下对林麝材料进行解剖研究，虽然能很好的呈现林麝的自 然色彩和结构，但由于材料主要由蛋白质构成，
6、很容易发生腐烂现象, 并不能维持长时间的解剖研究和拍摄照相。本文采用的回冻法对林麝 进行解剖学研究，随着解剖时间的增加，反复回冻能够降低林麝材料 的自溶进程，减缓材料腐烂速度。采用化学固定法进行解剖，虽然能 很好的呈现各组织的在体结构关系，但会引起林麝材料各组织产生化 学变化，容易使各组织变形失水，失去原本色彩，并会引起解剖测量 的误差。采用回冻法对林麝进行解剖，能够很好的呈现材料的原本色 彩，并充分能锁住组织水分，使组织保持原来的形状和大小，大大提 高了解剖测量的精确性。2.5 徒手拔毛对解剖的影响本研究针对已固化的林麝材料，采用徒手法对林麝进行拔毛，可 清晰分离出需要解剖的组织样本，尽可能
7、避免了在解剖过程中因毛发 过多而造成解剖组织被污染的情况。待皮毛拔除到一定程度时对林麝 尸体进行解剖，这样可保证有毛包围的组织始终处于缓慢解冻的状态, 而已分离的组织能够即可呈现自然状态。对林麝内脏组织进行进一步 解剖，能够清晰分辨出肌肉系统、心血管系统、神经系统和内脏系统， 发现均处于半解冻状态，很好的呈现了各组织的形态学结构，也为各 组织的颜色描述提供了一定的事实依据。2.6 回冻法对局部组织材料的影响采用冷冻法对研究的局部组织进行反复回冻，在解剖时，局部组 织呈现缓慢溶解状态，对解剖塑型起到了很好的辅助作用，也对各组 织的在体解剖研究提供了一种可行的工作思路。待组织完全解冻后， 各器官组织基本保持原有的状态，血管走向和神经分布清晰，能够充 分展现材料的细微结构，有利于林麝材料各组织的精细研究。综上所述，回冻法可运用到林麝的解剖中，不仅能有效的缓解林麝尸体腐烂速度，直观地观察到各脏器的自然形态，还能提高林麝标本的利用效率，也能在解剖过程中得到各组织在体的详细的解剖数据,参考文献1陈旺，马贵骥，张川平等,冷冻在解剖技术中的应用J, 解剖学杂志，1989 (03)： 199.作者简介：郑程莉(1986-),女，四川成都人，研究实习员，四 川养麝研究所，主要从事动物遗传育种与繁殖工作。