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1、 1 生物药物分析练习题 一、名词解释：生物药物分析应用微生物学、分子生物学、免疫学、生物化学等多学科的理论及其技术成就，检测和研究各种生物药物质量的一门综合性学科。生物药物生物体生命活动过程中产生的，或通过生物技术加工的，用于疾病的诊断、预防、治疗的初级或次级代谢产物，包括微生物药物、基因工程药物、动植物细胞组织制备的生化药物。药品标准指国家对药品的质量规格及检验方法所作的技术规定，是药品的生产、流通、使用及检验、监督管理部门共同遵循的法定依据。药典是一个国家记载药品标准、规格的法典，一般由国家药典委员会组织编纂，并由政府颁布、执行，具有法律约束力。基因工程药物是先确定对某种疾病有预防和治疗
2、作用的蛋白质，然后将控制该蛋白质合成过程的基因取出来，经过一系列基因操作，最后将该基因放入可以大量生产的受体细胞中去，这些受体细胞包括细菌、酵母菌、动物或动物细胞、植物或植物细胞，在受体细胞不断繁殖过程中，大规模生产具有预防和治疗这些疾病的蛋白质，即基因疫苗或药物。药物杂质指药物中存在的无治疗作用或影响药物的稳定性和疗效，甚至对人体健康有害的物质。面积归一法测量各杂质峰的面积和色谱图上除溶剂峰以外的总色谱峰面积，计算各杂质峰面积及其之和占总峰面积的百分率以测定杂质含量。内消法是指将一定重量的纯物质作为内标物加到一定量的被分析样品混合物中，然后对含有内标物的样品进行色谱分析，分别测定内标物和待测
3、组分的峰面积（或峰高）及相对校正因子，按相应公式和方法即可求出被测组分在样品中的百分含量。外消法用已知不同含量的标样系列等量进样分析，然后做出响应信号与含量之间的关系曲线（校正曲线）。定量分析样品时，在测校正曲线相同条件下进同等样量的等测样品，从色谱图上测出峰高或峰面积，在从校正曲线查出样品的含量。微生物限度检查法系指检查非规定灭菌制剂及其原料、辅料受微生物污染程度的方法。放射性免疫测定法利用免疫学上抗原和抗体反应的高度特异性和放射性同位素测定的高度灵敏性结合而形成的一种超微量的分析法。酶免疫测定法利用免疫反应的高度特异性和酶的高效性，用酶代替放射性同位素来标记药物，测定抗原和抗体含量的方法。
4、抗血清的滴度酶免竞争法 非竞争法 2 均相法不需要将结合的与游离的酶标志物分离便可测定的酶免疫测定法。非均相法指抗原抗体反应后，需要将结合的与游离的酶标志物分离才能测定的酶免疫分析法。酶的交联 液相酶免疫测定法 酶分析利用酶作为分析工具或分析试剂，测定样品中用一般化学方法难以测定的物质（这些物质可以是酶的底物，也可以是酶的抑制剂或活化剂以及酶的辅助因子）的方法。终点法先借助酶反应使被测物质定量地进行转变，在转化完成后，测定底物、产物或辅酶物质等的变化量的酶法分析。反应速度法指通过测定酶促反应速度对被测物质（底物、辅酶或抑制剂）进行定量的方法。酶循环放大法利用底物的专一性，使微量的底物“增幅放大
5、”以达到定量目的的分析方法 电泳带点粒子或离子在电场作用下的定向移动，依据带点粒子在电场作用下迁移行为不同进行分离的技术。电渗在电场的影响下，带电荷的液体对携带相反电荷的固定介质进行相对运动的现象。可以改变带电离子在电泳中的移动速度甚至方向。电泳迁移率带电粒子在单位电场强度下移动的泳动速度。SDS PAGE向样品加入还原剂(打开蛋白质的二硫键)和过量 SDS，SDS 是阴离子去垢剂，使蛋白质变性解聚，并与蛋白质结合成带强负电荷的复合物，掩盖了蛋白质之间原有电荷的差异，使各种蛋白质的电荷质量比值都相同，因而在聚丙烯酰胺凝胶中电泳时迁移率主要取决于蛋白质分子大小。是分析蛋白质和多肽、测定其分子量等
6、常用的方法。梯度聚丙稀酰胺凝胶电泳 比移值色谱法中原点到斑点中心的距离与原点到溶剂前沿的距离的比值。等电聚焦使电泳的介质中形成一定范围的 pH 梯度，电泳时待分离的两性分子可以在这种 pH 梯度中迁移，直到聚集于与其等电点相同的区域。两性载体 色谱法指一种利用混合物中诸组分在两相（流动相和固定相）间的分配原理以获得分离的方法。放射性比度单位质量或单位体积的放射性物质的放射性活度。分离度用以判断分离物质在色谱柱中的分离情况，常作为柱的总分离效能指标。用 R 表示。R 等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却
7、失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 3 托尾因子是通过计算 5%峰高处峰宽与峰顶点至前沿的距离比来评价峰形的
8、参数，目的是为了保证色谱分离效果和测量精度，常用T 来表示。牛津单位在标准情况下，能完全抑制 50ml 肉汤培养基中的金黄色葡萄球菌标准菌株（牛津标准菌株）生长的青霉素最低含量。稀释单位能完全抑制 1 ml 肉汤培养基中大肠杆菌标准菌株生长的最低含量作为链霉素的一个效价单位。用以标示链霉素的抗生活力。重量单位以抗生素的生物活性部分的重量作为效价单位。旋光性当光通过含有某物质的溶液时，使经过此物质的偏振光平面发生旋转的现象。比旋度指偏振光通过长 1dm 且每 1ml 含旋光物质 1g 的溶液，在一定的波长和温度下的旋光度。稀释法一般是在一系列的试管中用液体培养基逐管将抗生素做 2 倍稀释，并于各
9、个试管中加入同量的对该抗生素有高度敏感性的试验菌液。将各个试管放置于 37的培养箱中培养 24h，观察能抑制细菌生长的最低抗生素浓度作为测定终点。再用同法测得的抗生素标准品终点作比较，即可求得被测定抗生素的效价。比浊法将抗生素标准品的稀释液与供试品的稀释液分别加入试管中，再加入已接种试验菌的液体培养基，摇匀，置 37的培养箱中培养 2-4h，观察试验菌的生长情况。由于抗生素的浓度不同，试验菌受抑制的程度不同，因而产生不同程度的浑浊。用分光光度计测定其透光度或吸收度，用标准曲线法可测定出供试品的效价。琼脂扩散法（管碟法）利用抗生素在摊布特定供试菌的琼脂培养基内扩散，形成含一定浓度抗生素的球形区，
10、抑制供试菌的繁殖，通过透明琼脂培养基，可观察到透明的抑菌圈。并且在一定的抗生素浓度范围内，对数浓度（剂量）与抑菌圈面积或直径成正比的原理的抗生素效价测定法。生物检定利用药物对生物体（微生物、细胞、离体组织、整体动物等）所引起的药理作用来测定药物的生物活性或效价的一种方法。容量分析法依据已知浓度的标准试剂溶液与被测定的一定量供试品药物完全作用所消耗的标准试剂的体积，来计算被测定药物中有效物质含量的方法。直接滴定法用标准溶液直接滴定被测物质含量的一种分析方法。逆滴定法指加入定量且过量的滴定剂使之与待测物质反应，然后用另外的试剂滴定过量的滴定剂，进而对待测物进行定量的方法。维生素指一类维持人体正常生
11、理代谢功能所必需的低分子有机化合物。电位滴定法是指在滴定过程中通过测量电位变化以确定终点的滴定方法。化学聚合 117 光聚合利用光照加速化合物单体之间共价连接的现象。微分比容当加入 1 克干物质于无限大体积的溶剂中时，溶液的体积增量。茚三酮反应茚三酮与氨基酸、肽类或蛋白质的自由 氨基或其他氨基化合物所产生的一种可定量的显色反应。所呈现的颜色随反应的条件(酸球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文
12、章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 4 度、温度、盐浓度、铜、镉离子等)不同而异。用于氨基酸和肽的层析及定量测定。双缩脲反应蛋白质在碱性溶液中与硫酸铜作用形成紫蓝色络合物的呈色反应。在 540nm 波长处有最大吸收。可用于蛋白质的定性和定量检测。等电点蛋白质或两性电解质
13、(如氨基酸)所带净电荷为零时溶液的 pH，此时蛋白质或两性电解质在电场中的迁移率为零。符号为 pI。福林酚法利用蛋白质与福林酚试剂反应后形成的化合物可在750nm 波长处测定其吸光度，以测定蛋白质含量的分析方法。蛋白质换算系数指含有 1g 氮的蛋白质重量，一般为 6.25。甲醛滴定法依据一分子氨基酸与两分子甲醛反应生成一个氢离子，再用已知浓度氢氧化钠滴定氢离子以确定氨基酸含量的方法。非水滴定法在冰醋酸中用高氯酸标准溶液滴定测定氨基酸含量的方法。酶催化特定化学反应的蛋白质、RNA 或其复合体。是生物催化剂，能通过降低反应的活化能加快反应速度，但不改变反应的平衡点。绝大多数酶的化学本质是蛋白质。具
14、有催化效率高、专一性强、作用条件温和等特点。酶的高效性主要是指催化能力，蛋白质（环境适宜）的催化能力是普通化学催化物质的 105108 倍。酶的绝对专一性指一种仅能催化一种底物的生化反应。酶的相对专一性指一种酶仅能催化相应的某一类化合物或具有某种化学键的物质的变化。酶的立体结构专一性指底物有立体异构体时，酶只能以其中之一作为底物。酶的活力指酶催化一定化学反应的能力。酶的活力单位（U）在规定的条件下，每分钟转化 1u mol 底物所需要的酶量。酶的比活力每毫克酶蛋白所含有的酶活力。用 U/mg 表示。恒比活力 多肽生长因子指那些分子量不算太大的，在体内含量极微，但却发挥极大生理作用的一类生物活性
15、物质。肽图分析根据蛋白质、多肽的分子量大小以及氨基酸组成特点，使用专一性较强的蛋白水解酶（一般为肽链内切酶）作用于特殊的肽链位点将多肽裂解成小片断，通过一定的分离检测手段形成特征性指纹图谱。蛋白质免疫印记法 299借助 PAGE 技术，将生物活性物质高效分离，再与固相免疫学方法相结合。分离后的样品几乎可以原位、定量驱动或吸印在另一种固相载体上，因此能保持原有的生物活性和物质类型，所以可以进行各种生物监测、免疫识别、扫描、积分和保存。细胞病变抑制法 310 H3TdR 掺入法 311在测试液中加入由 H3 标记的胸腺嘧啶（H3TdR），由于在细胞增殖过程中 H3TdR 是 DNA 合成的必备物质
16、，所以 H3TdR 掺入的多少就代表细胞增殖能力的强弱（通过同位素液闪计数仪来测定），进而确定多肽药物的生物效价。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日
17、的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 5 微量酶检测法（MTT）312利用活细胞特别是增殖期的细胞可通过线粒体能量代谢过程中的琥珀酸脱氢酶的作用使淡黄色的MTT 分解产生蓝色结晶状甲攒沉积于细胞内或细胞周围，而且甲攒的量与细胞的增殖程度呈正比，甲攒经异丙醇作用后可溶解显色的性质，通过测定OD 值对多肽药物进行定量的方法。生物制品以天然或人工改造的微生物、寄生虫、生物毒素或生物组织及其代谢产物等为起始原料，采用生物学、分子生物学或生物化学、生物工程等相关技术制成，并以相应分析技术控制其中间产物和成品质量的生物活性
18、制品，可用于某些疾病的预防、治疗和诊断。异烟肼法利用甾体激素 C3-酮基及某些其他位置上的酮基都能在酸性条件下与羰基试剂异烟肼缩合形成黄色异烟腙，在一定波长下具有最大吸收的性质对甾体激素进行定量的方法。激素指内分泌细胞所产生的微量化学信息分子。这些物质通过扩散或被血液转运到作用细胞或器官，从而调节细胞或器官的代谢，并有反馈性地调节机制以适应机体内环境的变化，也有调节体内各部分之间相互联系的作用。保护指数 抗毒素单位（U）将抗毒素与一个 L+量的毒素作用后，注射小鼠仍能使该小鼠在 96h 左右才死亡的最小抗毒素量。致死剂量指与一个国际单位抗毒素混合后在一定时间杀死一只规定体重动物的最小毒素量。絮
19、状单位能与一个单位抗生素首先发生絮状沉淀反应的类毒素（或毒素）的量。二、问答题 1、生物药物分析的基本任务有哪四个方面？答：全面控制生物药物质量，保障人民用药安全、合理、有效。、原料药和制剂的检验；、生产过程的质量过程；、运输、储存质量控制；、进行临床分析。2、中国药品质量标准分为哪几种？答：药典、部颁标准、地方标准。3、2000 年版中国药典的内容分为几部分？答：两部。一部收载中药材，中药成方制剂；二部收载化学药品、抗生素、生化药品等。4、生物药物质量标准的特征是什么？答：权威性、科学性、进展性。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽
20、风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 6 5、试述生物药物检验工作的基本内容？答：A：学习分析生物药品的若干方法及新技术；B：
21、生物药物测定及药品检验；C：体内药物分析；D：生物药品制品的标准制定。6、一般杂质检查遵循的原则是什么？费休法测水分的基本原理是什么？在平板菌落计数法中向培养基中加入TTC 的原理是什么？答：一般杂质检查遵循遵循平行操作原则；费休法测水分的基本原理：利用费休试液（碘：二氧化硫：吡啶：甲醇=1:1:3:1）与水一比一反应，通过反应消耗的费休试液量计算药物中含水量的方法 加入 TTC 的原理：TTC 本身为无色化合物，接受氢离子和电子后成为红色的甲噆，且不再被空气氧化。细菌体内含有多种脱氢酶，进行氧化作用时释放出电子和氢离子，遇 TTC 指示剂菌落呈红色。在培养集基中加入适量的 TTC，既可以限制
22、细菌蔓延生长又便于计数。7、如何鉴别大肠杆菌、沙门菌、绿脓杆菌？答：8、放射性免疫测定法中竞争法与非竞争法的原理分别是什么？P61 抗血清的质量检定分为哪三个方面？影响抗体产生的因素是什么？答：球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候
23、不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 7 抗血清的质量检定：特异性、滴度、亲和性。影响抗体产生的因素：佐剂、剂量要适当、免疫竞争。9、在酶免疫测定法中竞争法与非竞争法的原理分别是什么？P63 它们分别有哪些类型？在酶免测定法中胰岛素测定实例P79。答：竞争法：固相法；双抗体法；均相酶免疫测定；酶抑制剂免疫测定。非竞争法：双抗体夹心法；免疫酶测定法。10、酶免疫测定法中实验条件的建立包括哪五个过程？答：包被，洗涤，加待测物，温育，检测
24、。11、在酶法分析中终点法的条件和应注意的问题分别是什么？P97 答：条件：要有专一地作用该被测物质的酶，并能得到它的制品；能够确定使这种酶反应接近进行完全的条件；反应中底物的减少、产物的增加、辅酶物质的改变等可以借助某种简便的方法进行测定。注意的问题：酶的底物特异性；反应的平衡；反应液；反应产物的抑制。12、酶法分析有哪三种方法？答：终点法、反应速度法、酶循环放大分析法。13、如何在一个比色杯中同时定量丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和 D2磷酸甘油酸？P102 答：对于丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和 D2磷酸甘油酸共存的混合液来说，用乳酸脱氢酶作用时，由于乳酸脱氢酶反应定量地向右方进行，因此根据340
25、nm 吸收度的减少便可以容易地算出丙酮酸量；如向这种反应液中再加入丙酮酸激酶，使丙酮激酶反应与乳酸脱氢酶反应成偶联反应，则 NADH的减少和磷酸烯醇式丙酮酸量成正比。如果进一步向该反应系统中加烯醇化酶，使烯醇化酶反应与丙酮酸激酶及乳酸脱氢酶偶联，那么此时 NADH减少与 D-2-磷酸甘油酸的量成正比例。这样在一个比色杯内就能依次进行丙酮酸、磷酸烯醇式丙酮酸和 D2磷酸甘油酸的定量。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无
26、处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 8 14、如何在样品中同时测定葡萄糖和果糖？如何进行 G-1-P的定量测定？P102 答：15、酶循环放大法的基本原理和注意事项分别是什么？P107 酶循环放大法特点是什么？P107 答：基本原理：酶循环放大
27、法分析法是一种超微量分析法，本分析法分为三个步骤：第一步，转换反应：以试样中的待测组分为底物，经特异反应生成与待测组分相当的定量循环产物。第二步，循环反应：生成的循环底物反复参加由两个酶反应组成的偶联反应，所得产物量为循环底物的若干倍。第三步，指示反应：采用酶法测定反应产物。有反应产物量及循环次数，计算出循环底物量，再推算试样中待测组分的量。注意事项：在循环反应中各成员的浓度应符合一定要求，底物Sa 和 Sb 的浓度比相应酶 Ea 和 Eb 的米氏常数值大，循环底物 A 和 B的浓度应比相应酶 Ea 和 Eb 的米氏常数值小；转化反应后，需将剩余的未参加转化反应的循环底物那一型除去；许多循环底
28、物的对应两型，对酸碱、热的稳定性有较大差别，常用于在循环反应前对对循环底物进行选择性破坏。特点：酶循环放大法分析法具有很高的灵敏度，具有较强特异性，分析生物试样时，可直接进行测定，不必先用各种分离方法对样品进行纯化，当试样中含有吸光性或荧光性质时，可先将试样进行充分稀释，使干扰物浓度降到几乎无影响的程度，而待测组分经循环放大仍可测出。随着酶试剂供应的改善，酶循环放大分析法在生化分析中将会越来越广。16、电泳法的基本原理是什么？影响电泳迁移率的因素有哪些？P112 答：电泳法的基本原理：依据带电粒子在电场的作用下迁移行为的不同进行分离的方法 影响电泳迁移率的因素：颗粒性质；电场强度；溶液性质（p
29、H 值；离子强度；溶液粘度）；电渗；焦耳热；筛孔。17、聚丙烯酰胺凝胶的制备方法有哪两种？它们的催化剂、加速剂是什么？答：制备方法：化学聚合、光聚合 催化剂 加速剂 化学聚合 过硫酸铵或过硫酸钾 N,N,N,N-四 甲 基 乙 二 胺（TEMED）、三乙醇胺、DMPN 球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾
30、分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 9 光聚合 核黄素 TEMED 18、聚丙烯酰胺凝胶电泳的基本原理是什么？答：19、SDSPAGE 的基本原理是什么？P122 答：在聚丙烯酰胺凝胶系统中引进 SDS（十二烷基硫酸钠），SDS 会与变性的多肽，并使蛋白带负电荷，由于多肽结合 SDS 的量几乎总是与多肽的分子量成正比而与其序列无关，因此 SDS 多肽复合物
31、在丙稀酰胺凝胶电泳中的迁移率只与多肽的大小有关，在达到饱和的状态下，每克多肽可与 1.4g 去污剂结合。当分子量在 15KD 到 200KD 之间时，蛋白质的迁移率和分子量的对数呈线性关系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW 为分子量，X 为迁移率，k、b 均为常数，若将已知分子量的标准蛋白质的迁移率对分子量对数作图，可获得一条标准曲线，未知蛋白质在相同条件下进行电泳，根据它的电泳迁移率即可在标准曲线上求得分子量。20、影响 SDS 与蛋白质结合的因素有哪些？P122 答：溶液中 SDS 单体的浓度；样品缓冲液的离子强度；二硫键是否完全被还原。21、梯度聚丙烯酰胺凝胶的基本原理是什么？
32、p114 蛋白质染色的方法有哪五种？答：蛋白质染色的方法：氨基黑10B 法、考马斯亮蓝 R250 法、考马斯亮蓝G250 法、1-苯胺基-8-苯磺酸法、银染色法。22、色谱法的基本原理是什么？P131 纸色谱的影响因素有哪些？答：色谱法的基本原理：混合物中各组分在两相间进行分配，其中一相是不动的，称为固定相；另一相是携带混合物流过固定相的，称为流动相。当流动相中所含混合物经过固定相时，就会球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无
33、水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 10 与固定相发生作用，由于混合物中各组分在结构和性质上存在差异，它们与固定相发生作用的大小、强弱就有差异，因此，在同一条件下，不同组分在固定相中滞留的时间不同，从而按先后不同次序从固定相中流出而得到
34、分离。纸色谱的影响因素：物质极性；溶剂；pH；滤纸；温度和时间。23、HPLC 的基本原理是什么？P140HPLC 的色谱类型有哪几种？答：基本原理：HPLC 的流动相和固定相都是液体。流动相与固定相之间应互不相溶（极性不同，避免固定液流失），有一个明显的分界面。当试样进入色谱柱，溶质在两相间进行多次的分配。从而使流出时间不同，进而达到分离。类型：正相色谱、反相色谱、离子交换色谱、凝胶色谱。24、气相色谱的基本原理和类型分别是什么？P151 答：基本原理：混合物的分离依据色谱柱的性质（柱效）和相关的保留或固定相的性质（选择性）。利用被测物质各组分在不同两相间分配系数（溶解度）的微小差异，当两相
35、作相对运动时，这些物质在两相间进行反复多次的分配，使原来只有微小的性质差异产生很大的效果，而使不同组分得到分离。类型：气固色谱、气液色谱 25、抗生素的鉴别常用方法有哪三类？P162 答：物理方法、化学方法、生物学方法。26、怎样进行抗生素类药物的鉴别？P162 答：抗生素类药物的鉴别包括抗生素及其衍生物的鉴别。前者是鉴别抗生素的种属，后者是鉴别衍生物是属何种盐类、脂类、复合物等。常用的鉴别方法有物理方法、化学方法、生物学方法。物理学方法有紫外光吸收图谱、红外光吸收图谱、色谱分析及溶解度等。化学方法常用的有功能基团反应、特异性的呈色反应等。生物学方法利用特异的酶反应，如用青霉素酶在一定条件下水
36、解青霉素，使其丧失抗菌活性，以此鉴别青霉素。27、如何鉴别氨基糖苷类抗生素？P168 答：茚三酮反应（蓝紫色）；坂口反应（橙红色）；糖类试剂反应，即莫利西试验；埃尔松-摩根反应（红色）；麦芽酚反应（紫红色）。28、测定青霉素中过敏原青霉噻唑衍生物的原理是什么？P187 答：氯化汞与青霉噻唑衍生物形成 Penamaldate 衍生物该衍生物在 285nm 处有吸收峰。可先通过凝胶过滤分离青霉噻唑衍生物，以磷酸盐缓冲液为对照，测定 285nm 处的吸收度。再与以青霉噻唑正丙胺为标准品所作的标准曲线作对比，即可定量。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去
37、了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 11 29、抗生素的效价微生物测定方法有哪三种？管碟法测定生抗素的效价基本原
38、理是什么？P196 答：稀释法、比浊法、琼脂扩散法（管蝶法）管碟法测定生抗素的效价基本原理：利用抗生素在摊布特定试验菌的琼脂培养基内扩散，形成含一定浓度的球型区，抑制了试验菌的繁殖，通过透明琼脂培养基，可观察到透明的抑菌圈；并且在一定的抗生素浓度范围内，对数浓度（剂量）与抑菌圈面积或直径成正比。方法设计是在同样条件下将已知效价的标准品溶液与未知效价的供试品溶液的剂量反应（抑菌圈）进行比较；当标准品和供试品是属于同一性质的抗生素时，标准品溶液和供试品溶液，对一定试验菌所得的剂量反应曲线，在一定剂量范围内应相互平行。根据以上原理，可设计为一剂量法、二剂量法及三剂量法等，从而可以较为准确地测定供试品
39、的效价。30、量反应平行法测定生抗素的效价的实验设计类型有哪些？P215 答：随机设计、随机区组设计、拉平方设计、交叉设计。31、简述量反应平行法实验结果的可靠性分析？P215 答：实验结果的可靠性是以方差分析法测验，测验多组均数之间的差别是否显著。抗生素效价测定中，存在有 S（标准差）和 T 的差别，直线及平行线关系，剂量间和双碟间的关系。通过统计以上各组均数间的方差，以试品间、回归、剂间（列）、蝶间（行）等的方差与误差项（S 平方）的比值（称 F 值），来确定各自差异的显著性程度和实验结果的可靠性，因此 F 值（F 值=该项方差/误差项）可作为观察实验显著性程度的一个指标。计算出的 F 值
40、，可通过 F 值表得知计算 F 值是处于 P0.05、P0.05、还是 P0.01。一般差别显著意义的表示法，常用：P0.05,差别有显著意义；P0.01，差别无显著意义。32、抗生素类药物的含量测定的物理化学方法有哪几种类型？P229 答：一、容量法（酸碱滴定法、碘量法）；二、光谱学测定法（旋光法、紫外分光光度法、比色法）；三、色谱测定法（洗脱法、直接测量法、生物自显影）；四、高效液相测定法 33、容量分析法分为哪几种类型？光谱分析法又分为哪几种类型？答：容量分析法：酸碱滴定法、碘量法；光谱学测定法：旋光法、紫外分光光度法、比色法 34、在抗生素的色谱分析中洗脱法哪三个步骤？P229 答：斑
41、点定位、洗脱、测量。35、维生素 C 的从哪三个方面进行鉴别?P241 答：利用还原性、利用糖类的性质、紫外分光光度法。球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣
42、恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 12 36、维生素 C 的含量测定方法有哪些？其基本原理分别是什么？P243 答：一、容量分析法 1、碘量法 2、2，6-二氯吲哚酚法 3、NBS 滴定法 二、比色法 三、紫外分光光度法 37、如何进行的维生素 C 中铁和铜盐检查？P242 答：铁盐检查：取本品 5.0g 两份，分别置 25ml 量瓶中，一份中加入 0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B），另一份中加入标准铁溶液（精密称取硫酸铁铵 863mg，置 1000ml 量瓶中，加
43、1mol/L 硫酸溶液25ml，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取 10ml，置 100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加 0.1mol/ml 硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法，在 248.3nm 波长处分别测定，应符合规定。铜盐检查：取本品 2.0g 两份，分别置 25ml 量瓶中，一份中加入 0.1mol/L硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（B），另一份中加入标准铜溶液（精密称取硫酸铁铵 393mg，置 1000ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，精密量取10ml，置100ml 量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀）1.0ml，加0
44、.1mol/ml硝酸溶液溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照溶液（A）。照原子吸收分光光度法，在 324.8nm 波长处分别测定，应符合规定。38、如何判定纯 DNA 和 RNA？P261 答：用紫外分光光度法测定 A260/A280来判定。纯 NDA 的比值应为 1.8；纯 RNA 应为 2.0。39、嘌呤类药物如何进行鉴别？P261 答：一、戊糖的鉴别（苔黑酚反应、二苯胺反应、与间苯三酚反应）二、嘌呤的鉴别（嘌呤碱基的水溶液与氨制硝酸银溶液反应，生成的银化物为白色沉淀，遇光变为红棕色）三、磷酸的鉴别 四、特征吸收光谱 五、熔点鉴别 40、嘌呤类药物的含量测定方法有哪两种？P263 答：紫外分光
45、光度法；先经前处理（如层析或电泳得到样品斑点，然后剪下），再测定。41、氨基酸的生产制备方法有哪四种？P270 答：水解法、发酵法、酶转化法、化学合成法。42、氨基酸的 -氨基和 -羧基分别有哪些主要反应？P274 答：-氨基：与亚硝酸反应、与酰基化试剂反应、羟基化反应、与甲醛反应 球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋
46、将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 13 -羧基：成盐、成酯、成酰氯、成酰胺。43、氨基酸的 -氨基和 -羧基同时参与的反应有哪些？P274 答：茚三酮反应、成肽反应。44、氨基酸的 R 基团特殊反应有哪些？答：酪氨酸的酚基反应；组氨酸的侧链咪唑基与重氮苯磺酸反应形成棕红色化合物；精氨酸的侧链胍基在硼酸钠缓冲液中与 1，2-环己二酮反应，生成
47、缩合物；色氨酸的侧链吲哚基在温和条件下被 N-溴代琥珀酰亚胺氧化；半胱氨酸的巯基能打开乙撑亚胺的环，生成的侧链带正电荷。45、怎样进行 AA 的鉴别？P278 答：旋光性、红外光谱、紫外吸收、纸层析、茚三酮反应。46、从哪几个方面鉴别蛋白质？P278 答：颜色反应、福林酚反应或双缩脲反应、紫外吸收、特殊性质。47、茚三酮反应测 AA 有哪三种方法？P279 答：Yemm 法、Rosen 法、Hydrindantin 法 48、AA 的含量测定有哪五种方法？其中非水滴定法的原理和种类分别是什么？P280 答：Yemm 法、Rosen 法、Hydrindantin 法、甲醛滴定法、非水滴定法（直接
48、滴定法和回滴法）。非水滴定法的原理：即溶剂的区分效应，本来在水溶液中不能滴定的弱酸或弱碱，如果选择适当的溶剂使其强度增加，则可顺利滴定。氨基酸有氨基和羧基，在水中呈中性，在冰醋酸中就显示出碱性，因此可用高氯酸等强酸进行滴定。49、胰岛素的效价测定有哪三种方法？P290 答：兔血糖法；小鼠血糖下降法；小鼠惊厥法。50、简述酶的特性和种类。P321 答：酶的特性：高效性；严格的选择性；反应条件温和；受多种因素的调节。酶的种类：氧转水裂异合 51、酶与底物复合物促进反应速度的原因是什么？P323 答：定向作用和底物浓缩；酶使底物分子变形；酸碱催化；共价催化。52、米氏方程是什么？其中 Ks与 Km的
49、意义分别是什么？求取 Vm 和Km的方法有哪两种方法？P324 球地球是宇宙中一颗灿烂的明珠昔日的地球仿佛人间仙境蓝天碧水绿树成阴而今天的地球却失去了往日的美丽风采这让人不禁深思这是为什么听森林里传来的不是鸟语花香而是无情的枪声和电锯声树木一棵棵倒下了动物们失去了家们将无水可饮无处安身地球将毁于我们之手文章来源网络整理仅供参考学习我们要做到节约用水用电少排放污水不使用白色垃圾袋将自己家的垃圾分类装袋分别投放然后为避免人们为制造纸张而乱砍乱伐我建议用过的作业本用来当候不用一次性纸杯植树节的时候我们一定要多种几颗树让地球母亲重新披上绿色的外衣恢复日的风采同学们为了我们共同的家园为了给将来留下蓝天碧
50、水绿地红花让我们携起手来共同保护地球的一草一木因为我们只有一个地球文章 14 答：E +S ES E +P 求取 Vm 和 Km的两种方法：双倒数作图法、Langmuir 作图法。53、影响酶催化速度的因素有哪些？P325 答：底物浓度；酶浓度；抑制剂；激活剂；温度；pH；离子强度。54、酶除蛋白质的鉴别常用方法以外，还有哪三种鉴别方法？P332 答：酶活性试验、沉淀试验、动物试验。55、用反应速度法测定酶类药物含量时，如何选择底物浓度、酶浓度和反应时间？答：56、酶反应的检测方法有哪三种？P335 答：容量分析法、气体检测法、分光光度法。57、基因工程药物的质量控制包括哪几个方面？P295