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1、必修 1 实验 考点 1 检测生物组织中的还原糖、脂肪和蛋白质【实验原理】(B)生物组织中某些有机化合物能与某些化学试剂产生特定的颜色反应。糖类 还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖)+斐林试剂 砖红色沉淀 脂肪+苏丹 III 染液橘黄色 脂肪+苏丹 IV 染液红色 蛋白质+双缩脲试剂紫色【实验材料用具、实验方法步骤】(A)还原糖的检测和观察 选材:含糖量较高、颜色为白色或近于白色的植物组织(如苹果、梨、白色甘蓝叶、白萝 卜等)制浆 制备组织样液 过滤(用一层纱布)取液 呈色反应:结论:可溶性还原糖与斐林试剂在加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。脂肪的检测和观察 方法一:花生种子
2、匀浆+3 滴苏丹 III 染液橘黄色 方法二:(此法需要使用显微镜,因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴)取材:做脂肪的鉴定实验,应选择富含脂肪的种子,以花生种子为最佳,实验前需浸泡 3-4h。将子叶削成薄片 取理想的薄片 制片 滴 23 滴苏丹 III 染液 洗去浮色(12 滴体积分数 50%的酒精溶液)制成临时装片(1 滴蒸馏水,加盖玻片)观察:先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察 5065水浴加热 约 2min 结论:圆形小颗粒呈橘黄色,说明有脂肪存在 蛋白质的检测和观察 选材与制备:豆浆或蛋清(使用蛋清做实验材料要稀释)呈色反应:结论:说明组织样液中存在蛋白质【实验结果分析】(C)【小
3、结】斐林试剂与双缩脲试剂的比较 试剂 斐林试剂 双缩脲试剂 鉴定成分 还原糖 蛋白质 鉴定原理 还原糖中的醛基(-CHO)在加热条件下能将 Cu(OH)2中的 Cu2+还原成 Cu+,从而生成砖红色的 Cu2O 沉淀 双缩脲(H2NOC-NH-CONH2)在碱性溶液中能与 Cu2+结合生成紫色络合物,蛋白质分子中含有与双缩脲结构相似的肽键 试剂浓度 甲液:0.1g/mL的 NaOH;乙液:0.05g/mL 的 CuSO4 A液 0.1g/mL 的 NaOH;B 液:0.01g/mL 的 CuSO4 使用方法 甲液、乙液混合均匀后,再加入样液 先加 A液造成碱性环境,再加 B 液 使用条件 加热
4、(水浴 5065)不加热,摇匀即可 实验现象 浅蓝色棕色砖红色 紫色 溶液颜色的变化过程为浅蓝色棕色砖红色 脂肪的鉴定可以使用花生匀浆或花生切片来做,后者需要使用显微镜 鉴定的材料一定要选择白色的 斐林试剂只能证明是不是还原性糖,不能确定是哪一种还原性糖 考点 2 观察植物细胞的质壁分离和复原【实验原理】:(B)质壁分离的原理:当细胞液的浓度 小于 外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而 失水,使细胞壁和原生质层都出现一定程度的收缩。由于原生质层比细胞壁的收缩性大,当细胞不断失水时,原生质层就会与细胞壁分离。质壁分离复原的原理:当细胞液的浓度大于外界溶液的浓度时,细胞就会通过渗透作用而吸水,
5、整个原生质层就会慢慢地恢复成原来的状态,紧贴细胞壁,使植物细胞逐渐发生质壁分离复原。【实验材料用具、实验方法步骤】:(A)(1)实验材料紫色的洋葱鳞片叶(细胞具有紫色大液泡,容易观察),质量浓度为0.3g/mL 的蔗糖溶液,清水等。特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做
6、脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋(2)主要实验仪器-载玻片,盖玻片、光学显微镜(3)实验方法步骤 步 骤 注 意 问 题 分 析 1制作洋葱表皮的临时装片。在载玻片上滴一滴水,撕取洋葱鳞片叶外表皮放在水滴中展平。盖上盖玻片。盖盖玻片应让盖玻片的一侧先触及载玻片,然后轻轻放平。防止装片产生气泡。2观察洋葱(或水绵)细胞 可看到:液泡大,呈紫色,原生质层紧贴着细胞壁。先观察正常细胞与后面的“质壁
7、分离”起对照作用。3观察质壁分离现象。从盖玻片的一侧滴入0.3g/ml的蔗糖溶液,在另一侧用吸水纸吸引(引流法),重复几次。镜检。观察到:液泡由大变小,颜色由浅变深,原生质层与细胞壁分离。原生质层与细胞壁之间充满蔗糖溶液。重复几次 糖液浓度不能过高 蔗糖溶液浓度大于细胞液浓度,细胞通过渗透作用失水,细胞壁伸缩性小原生质层的伸缩性大,液泡和原生质层不断收缩,所以发生质壁分离。重复是为了使细胞完全浸入蔗糖溶液 糖液浓度过高细胞会严重失水死亡,看不到质壁分离的复原。4观察细胞质壁分离的复原现象。从盖玻片的一侧滴入清水,在另一侧用吸水纸吸引,重复几次。镜检。观察到:液泡由小变大,颜色由深变浅,原生质层
8、恢复原状。发生质壁分离的装片,不能久置,要马上滴加清水,使其复原。重复几次。细胞液的浓度高于外界溶液,细胞通过渗透作用吸水,所以发生质壁分离复原现象。不能久置因为细胞失水过久,也会死亡。为了使细胞完全浸入清水中。【实验结果的分析】:(C)细胞液浓度外界溶液浓度 细胞失水(质壁分离)细胞液浓度外界溶液浓度 细胞吸水(质壁分离复原)【小结】本实验不仅能证明成熟的植物细胞是一个渗透系统,而且还可以用来判断细胞的死活和测量植物细胞的细胞液浓度范围。质壁分离时间不能太长,否则细胞会死亡,无法观察质壁分离的复原。质壁分离的时候液泡会缩小,紫色加深。细胞大小基本不变,因为外有细胞壁。在实验中用的蔗糖溶液浓度
9、要适当。浓度过低,细胞不能发生质壁分离;浓度过高,细胞失水太快,导致细胞死亡,不能发生质壁分离复原。植物细胞发生质壁分离后,原生质层和细胞壁之间充满的液体时外界溶液,因为细胞壁是全透的。过量施肥引起的“烧苗”其本质就是由于过量施肥引起根系所处的外界溶液浓度过高,引起植物大量失水,发生烧苗时仍能进行矿质元素的吸收,烧苗的对策是交替灌溉几次以稀释土壤溶液浓度。渗透作用的条件是半透膜和浓度差。本实验的观察指标是中央液泡大小(根据紫色大小)、原生质层的位置、细胞大小。质壁分离的“质”与“壁”:“质”是指原生质层而不是细胞质,“壁”则指细胞壁。用“内外因法”来理解质壁分离及其复原的原理。特定的颜色反应糖
10、类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋内部原因:
11、构成植物细胞的细胞壁和原生质层都具有一定程度的伸缩性,但细胞壁的伸缩性较小,而原生质层的伸缩性较大,这样细胞壁和原生质层之间才能发生分离和复原现象。外部原因:与外界溶液有关。考点 3 探究影响酶活性的因素【实验原理】(B)温度或 pH 等能够影响酶的催化活性,在一定范围内,随着温度或 pH 的升高酶活性升高;越过这一范围酶活性下降,甚至失活。【实验材料用具、实验方法步骤】(A)a材料:新配置的淀粉酶溶液,新鲜肝脏研磨液(含有较多的 H2O2 酶),可溶性淀粉溶液,过氧化氢溶液等。b方法步骤 I 探究温度对酶活性的影响 步骤 项目 试管 1 试管 2 试管 3 1 加入可溶性淀粉溶液 2mL 2
12、mL 2mL 2 新配置的 -淀粉酶溶液 1mL 1mL 1mL 3 放置在相同温度环境下,混匀 0 100 60 4 完成反应 5min 5 滴入碘液 2 滴 2 滴 2 滴 观察结果 变蓝 变蓝 不变蓝 注:实验室使用的 -淀粉酶最适温度为 5070(唾液淀粉酶最适温度为 36左右);由于 H2O2不稳定,因此探究温度对酶活性影响,不选择 H2O2作为反应物。II 探究 pH 对酶活性的影响 步骤 项目 试管 1 试管 2 试管 3 1 加入过氧化氢溶液 2mL 2mL 2mL 2 加入蒸馏水 1mL-3 加入盐酸-1mL-4 加入 NaOH 溶液-1mL 5 滴加肝脏研磨液 2 滴 2
13、滴 2 滴 6 37水浴 5min 5min 5min 7 检验 放入带火星的木条 能够复燃 不能够复燃 不能够复燃 试管内气泡产生量 多 很少 很少 3实验结果的分析 (C)产生气泡多的试管中酶活性越高。只有在适宜 PH 条件下酶的活性才最高 考点 4 叶绿体中色素的提取和分离【实验原理】(B)提取原理:叶绿体中的色素能够溶解在有机溶剂,所以,可以在叶片被磨碎以后用乙醇提取叶绿体中的色素 特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在
14、加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋分离原理:叶绿体中的色素在层析液中的溶解度不同,溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快;溶解度低的随层析液在滤纸上扩散得慢。根据这个原理就可以将叶绿体中不同的色素分离开来。【实验材料用具、实验方法步骤】(
15、A)a实验材料用具:菠菜叶(含有丰富色素);无水乙醇(溶解叶绿体中的色素);SiO2(使研磨充分);CaCO3(防止研磨过程中色素分子遭到破坏);层析液(分离色素分子)。b实验方法步骤 叶绿体中色素的提取:研磨(研钵中加入:剪碎的新鲜绿叶、无水乙醇、SiO2、CaCO3,迅速、充分研磨)过滤(不能用滤纸,可以用脱脂棉或尼龙网)保存(收集到的色素绿叶要加棉塞,以防止无水乙醇挥发)色素的分离 制备滤纸条画滤液细线(注意:待滤液干燥后要重复画两到三次,要求滤液细线要细而齐)层析法分离色素(注意:一定不要让层析液没及滤液细线)观察和记录 实验结果:最后滤纸条上将分离出四条色素带,颜色从上往下分别是橙黄
16、色、黄色、蓝绿色和黄绿色,四种色素分别是胡萝卜素、叶黄素、叶绿素 a 和叶绿素 b【实验结果的分析】(C)实验结果分析:色素在滤纸条上的分布如下图:(橙黄色)最快(溶解度最大)(黄色)(蓝绿色)最宽(最多)(黄绿色)最慢(溶解度最小)【小结】:无水乙醇:提取(溶解)叶绿体中的色素 层析液:分离叶绿体中的色素 石英砂:有助于研磨充分 碳酸钙:防止研磨时叶绿体中的色素受到破坏;分离色素时,层析液不能没及滤液细线的原因是:滤液细线上的色素会溶解到层析液中;提取和分离叶绿体色素的关键是:a.提取叶绿体色素的关键是:叶片要新鲜、浓绿;研磨要迅速、充分;滤液收集后,要及时用棉塞将试管口塞紧,以免滤液挥发。
17、b.分离叶绿体色素的关键是:一是滤液细线要细且直,而且要重复划几次;二是层析液不能没及滤液线。特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂
18、肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋在圆滤纸的中央,点上含叶绿体色素的提取液进行层析,随着层析液从滤纸中央向四周扩散,形成四个同心的色素环,由外到内的顺序依次是:胡萝卜素、叶黄素、叶绿素 a、叶绿素 b 滤纸条上色素颜色太浅的可能原因:1、研磨时加无水乙醇太多,色素浓度太低;2、研磨时 CaCO3没有加或加量太少,部分叶绿素遭到破坏;3、选材不够嫩绿;4、多次划线之间没有注意等到干燥;用绿叶量太少;5、研磨不够充分;未加入 SiO2 考点 5 探究酵母菌的呼吸方式【实验原理】:(B)酵母菌属于兼性厌氧微生物,有氧时进行有氧呼吸将葡
19、萄糖彻底分解成二氧化碳和水,并释放大量能量,无氧时进行无氧呼吸将葡萄糖分解成酒精和二氧化碳,释放较少的能量。CO2可使澄清的石灰水变浑浊,也可以使溴麝香草酚蓝水溶液由蓝变绿再变黄。根据石灰水混浊程度或溴麝香草酚蓝水溶液变成黄色的时间长短,可以检测酵母菌培养液中 CO2的产生情况。橙色的重铬酸钾溶液,在酸性条件下可与乙醇发生化学反应,变成灰绿色。【实验设计】:(B)检测 CO2的产生,装置如图所示 【有氧呼吸装置】【无氧呼吸装置】检测酒精的产生:自 A、B 中各取 2mL 酵母培养液滤液注入已编号 1、2 的两支试管中分别滴加 0.5mL溶有 0.1g 重铬酸钾的浓硫酸溶液振荡并观察溶液中颜色变
20、化【实验结果的分析】(B)甲、乙两装置中石灰水都变浑浊,且甲中浑浊程度高且速度快酵母菌在有氧呼吸条件下产生的 CO2比无氧呼吸条件下产生的多且快;2 号试管中溶液由橙色变成灰绿色,1 号试管不变色酵母菌在无氧条件下分解葡萄糖产生酒精【小结】将装置甲中 NaOH 的锥形瓶:除去空气中的 CO2,保证第三个锥形瓶的澄清石灰水特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方
21、法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋变浑浊是由于酵母菌有氧呼吸产生 CO2所致。B 瓶应封口放置一段时间后,待酵母菌将 B 瓶中的氧消耗完毕,再连通盛有澄清石灰水的锥形瓶。确保产生 CO2的是无氧呼吸产生的 本实验葡萄糖溶液质量分数为 5%,不能过高,浓度太高,酵母菌失水不能生长,甚至死亡 啤酒酿制过程中,
22、先通入一定量的空气让酵母菌进行大量繁殖,为发酵提供更多的酵母菌,密闭为营造无氧条件,好发酵产生酒精 橙色的重铬酸钾溶液可以用于日常生活中交警检测司机是否酒后开车,并且可以检测饮酒的量 酒精的检测可使用重铬酸钾溶液,但必须强调在酸性的条件下,重铬酸钾才能与酒精反应,变成灰绿色。单独的重铬酸钾溶液是不能与酒精反应的 考点 6 观察植物细胞的有丝分裂【实验原理】(B)高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同,可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况,识别该细胞处于哪个时期。细胞核内的染色体易被碱性染料(如龙胆紫、醋酸洋红)染成深色。【实验材料用具、实验方
23、法步骤】(B)实验材料 洋葱、显微镜、质量分数为 15%的盐酸、体积分数为 95%的酒精、质量浓度为 0.01g/mL或 0.02g/mL 的龙胆紫溶液或醋酸洋红液、载玻片、盖玻片、镊子、剪子、滴管 实验方法步骤 a洋葱根尖的培养 实验前 34d,待根长到 5 b装片的制作 取材:取根尖 23 解离液:质量分数为为 15%的盐酸和体积分数为 95%的酒精混合液(1:1)解离 目的:使组织中的细胞分离开 时间:35min 程度:根尖酥软 漂洗液:清水 漂洗 目的:洗去解离液,便于染色 时间:10 min 染液:0.01g/mL 或 0.02g/mL 的龙胆紫溶液或醋酸洋红液 染色 目的:使染色体
24、(质)着色 时间:35min 用镊子将根尖弄碎,盖上盖玻片,复加一块载玻片用拇指轻压 制片 目的:使细胞分散开来 c观察 I低倍镜观察:找到分生区细胞,其特点是细胞呈正方形,排列紧密,有分裂细胞 II高倍镜观察:在低倍镜观察的基础上换高倍镜,直到看清细胞的物象为止 特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因
25、为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋 III仔细观察:先找中期,再找前期、后期、末期,最后找间期,注意染色体特点 IV移动观察:慢慢移动装片,完整地观察各个时期 d绘图【实验结果分析】(B)前期细胞中染色体散乱分布在细胞中央,两消、两现 中期细胞中的染色体的形态数目最清晰,染色体均排列在赤道板上 后期细胞中的染色体分布在细胞两极 末期细胞赤道板处出现细胞板,形成
26、细胞壁,两消、两现 绝大部分细胞处于分裂间期【小结】实验中观察的是死细胞有:根尖细胞已经被杀死 本实验中解离充分是实验成功的必要条件,也是制片的前提 洋葱根尖细胞有丝分裂观察记录表 细胞周期 样本 1 样本 2 样本 3 样本 4 总数 每一时期的细胞数/计数细胞的总数 间期 前期 中期 后期 末期 计数细胞的总数 根据得到的每一时期的细胞数与计数的细胞总数的比值,来比较细胞周期不同时期的时间长短,数字上存在着正相关(间接转换法)特定的颜色反应糖类水浴加热还原糖葡萄糖果糖麦芽糖斐林试剂砖红色沉淀约脂肪苏丹染液橘黄色脂肪苏丹染液红色蛋白质双缩脲试剂紫色实验材料用具实验方法步骤还原糖的检测和观察选材含糖量较高颜色为白色或近于白色的植剂在加热的过程中生成砖红色沉淀说明组织样液中有可溶性还原糖脂肪的检测和观察方法一花生种子匀浆滴苏丹染液橘黄色方法二此法需要使用微镜因为要在脂肪细胞中找到脂肪油滴取材做脂肪的鉴定实验应选择富含脂肪的种子以成临时装片滴蒸馏水加盖玻片观察先在低倍镜下寻找到已着色颗粒再用高倍镜观察结论圆形小颗粒呈橘黄色说明有脂肪存在蛋白质的检测和观察选材与制备豆浆或蛋清使用蛋清做实验材料要稀释呈色反应结论说明组织样液中存在蛋