88剂和益生素对断奶仔猪生长性能的影响.pdf

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1、分类号S 81 亘1 3 2密级U D C 硕士学位论文复合酶制剂和益生素对断奶仔猪生长性能的影响蒋治国学科专业动物萱差垣坷牾越堂童些指导教师王篮教握扬塞是珏究虽论文答辩日期2 Q Q 查堡垒! Q 目学位授予日期答辩委员会主腰塞盟运教援论文评阉人塞生生熬援主凰墓亟塞虽复合酶制剂和益生素对断奶仔猪生长性能的影响摘要本研究主要包括三个方面:其一对植物乳酸杆菌、枯草芽孢杆菌的特性进行研究,并利用这两个菌种生产益生素:其二对黑曲霉特性进行研究,并利用该菌种生产复合酶:其三,分别将益生素、复合酶按一定水平均匀混合到断奶仔猪饲料中,观察益生素、复合酶制剂对仔猪生长性能的影响。主要研究结果如下:实验一:以

2、细菌数( c f u g ) 或o D 光密度值为指标,研究植物乳酸杆菌,枯草芽孢杆菌的生长曲线,繁殖生长适宜的碳氮源比例,温度和酸度对植物乳酸杆菌、枯草芽胞杆菌的影响。结果表明:植物乳酸杆菌,枯草芽孢杆菌能耐受p H 为3 4 的溶液,但存活率受到一定影响。植物乳酸杆菌能耐受7 5 的高温,而枯草芽孢杆菌能耐受8 0。植物乳酸杆菌适宜碳氮源比例为7 :3 ,枯草芽胞杆菌适宜碳氮比例为8 :2 。实验二、以植酸酶活力为指标,研究黑曲霉分泌植酸酶活力最高时发酵的碳氮源比例,温度和酸度对植酸酶活- 陛的影响。结果表明:黑曲霉发酵生产植酸酶的适宜碳氮源比例为8 :2 ,在温度为5 5 时,植酸酶还能

3、保持活性。该植酸酶在p H 为3 时保持酶的活性。实验三、分别把复合酶、益生素按一定比例均匀混合到断奶仔猪饲料中,观察复合酶、益生素对仔猪生长性能,营养物质消化率,血液生化指标的的影响。结果表明:复合酶( 0 2 添加量) 比对照组的T平均日增重提高6 2 ( P 0 0 5 ) ,添加复合酶、益生素对仔猪日采食量无影响。复合酶( O 2 添加量) 比对照组料肉比降低8 9 ( P O 0 5 ) ;血液生化指标方面:试验组比对照组的血糖含量有所提高,其中酶制剂( O 1 添加量) 比对照组提高7 0 ( P 0 0 5 ) ,益生素( 0 3 添加量) 比对照组提高8 8 ( P O 0 5

4、 ) 。试验组比对照组血清磷含量有所提高,其中复合酶( 0 2 添加量) 比对照组的提高8 6 ( P O 0 5 ) ,益生素( 0 2 添加量) 比对照组提高9 4 ( P 0 0 5 ) 。营养物质消化率方面:其中试验组比对照组纤维素消化率有所提高,其中益生素( O 3 添加量) 比对照组提高2 0 8 ( P 0 0 1 ) ;磷表观消化率方面复合酶( 0 2 添加量) 比对照组提高1 9 8 ( P O 0 5 ) ,益生素( 0 1 )比对照组提高7 6 ( P O 0 5 ) ,其它营养成分有提高趋势,但差异不显著。关键词:植物乳酸杆菌枯草芽孢杆菌黑曲霉益生素酶制剂仔猪酶活I I

5、E F F E C T0 FC O M B I N E DE N S Y M E SA N DP R O B I O T l C S0 NT H EP E R F O R M A N C E0 FPlG L E T SA B S T R A C TT l l r e ee x p e r i m e n t sa r ec o n d u c t e dt os t u d yt h ee a e c to fe n z y m e sa I l dp r o b i o t i c so n l ep e 晌m 锄c eo fp i g l e t S T h ef i r s te x p

6、 e r i m e mi sd e V i s e da n do p e r a t e dt os t u d ym eb i o l o g yc h a r a c t e ro f 三日c f D 6 口c 讲螂p 肠玎幻r “柳a 1 1 dB 口c 讲姗s “6 f 玎括w h i c ha r eu s e dt op r o d u c ep r o b i o t i c si ns u i t a b l ec o n d i t i o n T h es e c o n de X p e r i m e n ti s t 1 1 es t u d ya b o u t

7、 爿印P 馏讲淞一哲甜w h i c hi su s e dt op m d u c ec o m b i n e de n z ) r m e s T h et l l i r de x p e r i m e mi st h e 叩p l i c a t i o no fm et v v op m d u c t St op i g l e t sT h er e s u l ti sl i s t e db e l o w :1 T h ea b i l i 移f o r 三口c f D 6 日c f ,淞p 肠”幻州ma n dB 口c 讲淞s 甜6 f 甜括t ot o l e r

8、a t eh i g ht e m p e r a t u r ea n ds 打o n ga c i di sn o th i 曲e n o u 曲t os u r v i V ei nt l l ec o n d i t i o no f7 5 8 0 a n dP H 2 3 T h es u i t a b l ef e m e n t a t i o no ft l l er a t eo fCa n dNr e c o u r s e si s7 :3f o r 三日c 幻6 口c f 盯淞p 肠”胁r “m ,8 :2f o rB n c i l l 锐ss n b n z i

9、S 2 T l l es u i t a b l ef e m e n t a t i d no fm ec o m p a r a b i l i t yb e t w e e nCa n dNr e c o u r s e si s 8 :2f o rA 咿P ,:鲥,螂辔盯t op r o d u c ep h y t a s e P h y t a s ec a I ls t i l ll 【e e pa c t i v ew h e ni ti si nt l ec o n d i t i o no f5 5 a n dp H33 A d de n 巧m e sa I l dp m

10、b i o t i c sr e s p e c t i v e l yt om ed i e to fw e a n i l l gI I Ip i g l e t st os t u d yt I l ee 仃e c to ft h et w op r o d u c t so nm ep e r f o 咖a n c eo fp i g l e t s T h er e s u l ts h o w st 1 1 a t :C o m p a r e dw i t I lt h ec o n t r o lg r o u p ,恤a v e r a g ed a i l yg a i n

11、 si nt 1 1 et r i a lg m u p ( e n z y m e s0 2 a d d e d ) w e r es i g n i f i c a n t l yi m p r o V e db y6 2 ( P O 0 5 ) ,a n dr a t i oo ff - e e dt ob o d yw e i 曲td e c r e a s e ds i g n i f i c a n t l yb y8 9 ( P O 0 5 ) C o m p a r e dw i t lt h ec o n 们l 伊o u p ,m es e r u ms u g a ri n

12、m et r i a lg r o u p ( e n 巧m e s0 1 a d d e d )a J l d ( p r o b i o t i c s0 3 a d d e d ) w e r es i g n i f i c a l l t l yi m p m V e db y7 0 ( P 0 0 5 )a J l d8 8 ( P 0 0 5 ) r e s p e c t i v e l y C o m p a r e dw i t l lt h ec o n t m l 铲o u p ,t l l es e m mp h o S p h o m si nt l l et r

13、i a lg r o u p ( e n 巧m e s0 2 a d d e d ) a J l d( p r o b i o t i c s0 2 a d d e d ) w e r es i g n i f i c a n t l yi m p r o v e db y8 6 ( P 0 0 5 )Ia I l d9 4 ( P O 0 5 ) r e s p e c t i V e l y C o m p a r e dw i mt h ec o n t r o l 铲o u p ,也ea p p a r e n td i g e s t i b i l i t yo ff i b e

14、ri nm et r i a lg r o u p ( p m b i o t i c s0 3 a d d e d )w e r es i g n i f i c a n t l yi m p r o v e db y2 0 8 ( P 0 0 5 ) C o m p a r e dw i t ht l l ec o n 臼o lg m u p ,t l l e 印p a r e n td i g e S t i b i l i t yo fp h o s p h o m si nm e 廿i a lg r o u p( e n 巧m e sO 2 a d d e d ) a I l d (

15、 p m b i o t i c s0 1 a d d e d ) w e r es i g n i f i c a n t l yi m p m V e db y19 8 ( P 0 0 5 ) ,7 6 ( P 0 0 5 ) r e s p e c t i v e l y K qw 吼d s :L n c t o b d c i l i 懈p l a n t 口r u m ,B a c i i t t l ss b t i l 讧。A s p e r g t l l H s诳巧e n z y m e s ,p r o b i o t i c s ,p i g l e t ,a c t i

16、 V i 够o fe n z y m e广西大学硕士论文复合酶和益生素对断奶仔猪生长性能的影响复合酶制剂和益生素对断奶仔猪生长性能的影响前言生物饲料添加剂是近十几年发展起来的的一种新型饲料添加剂,它是随着人们对抗生素和有机砷制剂使用所带来的强烈副作用认识的逐步深入而发展起来的。作为饲料添加剂,抗生素在预防和抵制畜禽疾病,促进动物生长等方面曾经起到很大的作用,但它在杀死有害病菌的同时也杀死了肠道内的有益微生物,造成肠道内微生物群的不平衡:另外,长期使用抗生素会使病菌产生抗药性,并且会残留于畜禽产品中对人体造成危害。在抗生素之后,有机砷作为一种良好的促生长制剂曾经一度被当作抗生素的替代品,但由于有

17、机砷制剂的毒性、对环境的污染及对细菌也具有抗药性等问题的出现,使得人们不得不努力地根据市场需求,开发出能够对致病菌起抑制作用,而对畜产品无毒,对人类无副作用的绿色保健型饲料添加剂,生物饲料添加剂正是基于这一优点而备受人们与市场的青睐益生素和酶制剂是目前市场销售较多,普遍为人们所接受的两类生物饲料添加剂。近年来在国内外有许多研究者对益生素和酶制剂在仔猪上的应用进行了不少的研究,益生素和酶制剂的生产工艺流程却没有实现规范化、标准化,而且人们对益生素和酶制剂在猪日粮中的最适宜添加量的结果并不一致,所得出的结果范围比较宽。因此,如何确立规范化的益生素和酶制剂生产工艺,如何根据益生素和复合酶制剂的添加量

18、更科学地指导日粮配方的设计及饲养方案的确立,正越来越受到国内外研究者和生产者的重视。因此本研究旨在对以上两个方面作初步的探讨。广西大学硕士论文复合酶和益生索对断奶仔猪生长性能的影响第一章益生素的研究进展1 1 益生桑的定义益生素( p r o b i o t i c s ) 又称为益生菌、活菌剂、生菌剂或促生素等。早在1 9 0 7 年,欧洲学者M e t c h n i k o f f 就认为保加利亚农民长寿与其经常服用大量微生物( 嗜乳酸杆菌发酵的牛奶) 有关,并称其为保加利亚杆菌,由此便引出了“有益菌”的概念。“益生素”一词首先被L i l l e y 和S t i l l w e u

19、在1 9 6 5 年使用,定义为“由一种微生物分泌刺激另一种微生物生长的物质“1 。2 0 世纪五六十年代,由于抗生素使用中出现的药残、过敏及抗药性等问题越来越受到重视,科学家们开始努力寻求其绿色替代品,益生素的研究成为热点。R E p a r k e r ( 1 9 7 4 年) 埘定义益生素为“维持肠道内微生态平衡的活的或死的微生物及其发酵物”。F u l l e r ( 1 9 8 9 年) “3 定义益生素为:“一种可通过改善肠道菌群平衡,而对动物施加有利影响的活微生物饲料添加剂”。并指出这一制剂应具备5 个特点:应能对宿生施加有利影响( 即提高生长率和抗病率) 的微生物;应是无毒的和

20、非致病性的;应是活的,含菌量要大;应能在肠道环境中存活并进行代谢,即能抵抗低P H 和有机酸:应能长期保持存活和稳定。丹麦学者骆云中( 1 9 9 0 年)定义为“益生素是饲喂畜禽的活的或死的微生物及其培养物,目的是加强畜禽肠道微生物群落的屏障功能和非特异免疫系统功能”。苏联学者( 1 9 9 1 ) 定义为“益生素是生物制剂,是共生微生物的稳定培养物或其发酵产生的物质,这种发酵产物能促进共生微生物的生长”。与此同时,对益生素的内涵也有不同的看法。H S o s s a r d ( 1 9 9 0 ) 嘞给益生素定义为“摄入动物体内参与肠内微生物群落的阻碍作用,或者通过增强非特异性免疫功能来预

21、防疾病而间接地起到促进生长作用和提高饲料效率的活的微生物培养物”。1 9 8 8 年我国学者提出使用“微生态制剂( m i c r o e c o l o g i c s ) ”这一术语。1 9 9 1 年又提出通俗化概念一饲用微生物添加剂。近年来,又有学者根据成分细分为( 1 ) 益生菌( 或益生剂,旧称“益生素”) 指一类通常分离自相应部位的正常菌群,以至几种高含量活菌为主体,一般经口服或黏膜途径投入,有助于改善宿主特定部位的微生态平衡并兼有若干其它有益生理活性的新型生物菌剂。( 2 ) 益生素,由G R G i b s o n 等( 1 9 9 5 ) ”3 提广西大学硕士论文复合酶和益

22、生索对断奶仔猪生长性能的影响出,系指寡糖等一些不被宿主消化吸收却能有选择地促进其体内双歧杆菌等有益菌的代谢和增殖,从而改善宿主健康的物质,常称双歧因子( 3 ) 合生剂( s y n b i o t i c s ) 理论上是兼有上述( 1 ) 和( 2 ) 成分和特性的合剂。目前,人们对于益生素、微生态制剂、活菌剂等等的概念还处于交互阶段,并没有进行严格的区分,在概念使用上,也没有做统一规定,有待于学者们的进一步确定和规范。但是我们从上述定义的演化也能看出益生素的研究进展情况,从简单的认识有益菌到认识其调节肠道微生态平衡及作用机理,都逐步地融入到了概念中,从另一角度反映出了益生索理论在不断地完

23、善和深化。1 2 益生素生产中常使用的菌种关于益生菌剂的种类,各国有不同的规定。1 9 8 9 年,美国食品与药物安全管理局( F D A ) 和美国饲料管理协会公布了被认为安全、可直接饲喂的4 2 种微生物菌种名单:而我国农业部1 9 9 9 年第1 0 5 号公告公布的允许使用饲料级微生物添加剂仅有1 2 种,它们是:干酪乳杆菌( a c f D 6 a c j 坩c a s P J ) 、植物乳杆菌( a c f D 6 a c j “s a 刀 ar f 埘) 、粪链球菌( S 打印,口c D c c 坩角P c j “田) 、屎链球菌0 S t r e p r o c o c c u

24、 sf a e c i u m 、马懒P c 球菌0 P e d i o c o c c u s a c id i j a c t i 、女 薄芽胞杆菌( 毖c j J 出s 曲f j j 曲、纳豆芽胞杆菌( 毖c j 坩册 砌、嗜酸乳杆菌( a c f D 6 a c j J “sa c j I ,5 2 口方j s ) 、孚L 链球菌( S f ,印 D c D c c ,sJ a c j 占) 、啤酒酵母( 国c c 舾r 伽阳e sc B 阳订s j a e ) 、产阮假丝酵母( C 幻甜如“ j J j 0 、沼泽红假单胞菌( 励D 幽p s P u 面舱印a 晒栅曲。目前常用的益生

25、菌主要有乳酸菌、芽胞杆菌、光合细菌和真菌四大类。生产中应用的益生菌制剂常常由上述菌种单一或复合加工而成。益生素生产中使用的菌种通常包括以下几种:1 2 1 乳酸菌制剂乳酸杆菌是动物肠道中的正常微生物,该制剂应用历史最早,制剂种类最多,其中包括乳酸杆菌发酵饲料、乳酸杆菌粉及乳酸杆菌提取物。当前,作为饲料添加剂应用较多的嗜酸乳酸杆菌( a c D 妇c j 晒a c j 却 j “s ) 、植物乳酸杆菌( 幻c t D 6 a c J J 晒叫a 疗 甜删、干酪乳酸杆菌( a c D 施c J J s s P j ) 及粪链球菌( S 打印t D c D c c 晒角P c j 删) 。我国最早使

26、用的乳酶生就是用粪链球菌0 S t r e p t o c o c c u Sf a e c iu 商懿戏。1 2 2 芽孢杆菌制剂广西大学硕士论文复合酶和益生素对断奶仔猪生长性能的影响芽孢杆菌在动物肠道微生物群落中存在数量极少,目前生产中应用的芽孢杆菌主要有地衣芽孢杆菌( 肋c j 吣J j 曲鲫j 内珊圆、枯草芽孢杆菌( 助c j 船s 曲f ,拈) 、纳豆芽孢杆菌( 毖c j 坩加r 幻) 、迟缓芽孢杆菌( 毖c J J “s 鲫 ,s )及蜡样芽胞杆菌( 肋c j 船c 伽“s ) 。与乳酸杆菌相比,芽孢杆杆菌具有许多优点:能耐受胃内酸性环境,稳定性较高具有较强的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶

27、等多种有效的酶促活性。还有研究表明,芽孢杆菌具有平衡或稳定乳酸杆菌的作用。1 2 3 酵母类制剂酵母只是零星存在于动物肠道中,目前应用的主要有啤酒酵母和石油酵母。它可为动物提供蛋白质,帮助消化,刺激有益菌的生长抑制病原微生物繁殖,提高机体免疫力和抗病力,对防治畜禽消化道系统疾病起到有益作用。1 2 4 其它益生素制剂除上述外,黑曲霉和米曲霉也可用于制备微生态制剂。此外还有噬菌蛭弧菌,它是一种细菌内寄生的G 一弧杆菌,噬菌特性与噬菌体极为相似。已经证明,噬菌蛭弧菌能裂解猪大肠杆菌、禽霍乱沙门氏菌、鸡白痢伤寒沙门氏茵。目前,比较典型的微生态制剂产品是由日本硫球大学教授比嘉照夫研制的E M ( E

28、f f e c t i v eM i c r o o r g a n i s m ) 制剂,E M 制剂是由光合菌、酵母菌和乳酸菌等1 0 属8 0 多种微生物复合培养成的有效微生物群,用于饲料中能增强畜禽免疫力、促进生长,改善环境卫生,而且具有天然无毒、无残留等优点,因而被广泛应用于世界各国畜牧业。1 3 益生素的作用机理处于理想状态的动物在消化道内有特定量的有益微生物,以维持消化道内的平衡和养分的消化吸收,但是在生理和环境应激时则会造成消化道内微生物区系紊乱,病原菌开始大量繁殖,正常的微生物区系平衡遭到破坏,使动物的生产力下降或出现临床病态。益生素进入人畜肠道后,会与其中的正常菌群会合,显

29、现出共生、栖生、竞争或吞噬等复杂关系。益生素归根到底是作用于肠道内微生物而起作用的“1 。因此,微生态制剂的作用机理相当复杂,当前对其认识可归纳为以下几点:1 3 1 补充有益菌群,维持动物肠道菌群平衡4广西大学硕士论文复合酶和益生素对断奶仔猪生长性能的影响正常微生物群与机体内环境之间所构成的微生态系统内,微生物种群中的优势种群对整个种群起决定作用,一旦失去了优势种群则该优势种群发生更替,微生态平衡失调,使用微生态制剂的目的在于恢复优势种群。一些需氧的微生物特别是芽孢杆菌能消耗肠道内氧气,造成局部厌氧环境,有利于厌氧微生物生长同时也抑制了需氧病原菌和兼性厌氧病原茵的生长,从而使失调菌群恢复正常

30、,即生物夺氧作用。1 3 2 抑制病原菌繁殖益生素中的有益微生物可竞争性抑制病原菌附着到肠细胞上,即屏障碍作用,并在消化道内形成致密性膜菌群,防止病原菌吸附于肠壁上,促使其随粪便排出体外。给新生家畜、禽接种( 或饲喂) 益生素有助于畜禽建立正常的微生物区系,排除或控制潜在的病原体,即人为创造有益微生物区系。益生素在动物肠道内代谢后产生乳酸、丙酸等,使消化道内酸度降低抑制大肠杆菌等有害菌,同时酸的作用可促进饲料的消化与吸收,而且乳酸的生成又会防止仔猪腹泻。另外,益生素在代谢过程中产生的过氧化氢对潜在的病原微生物有杀灭作用。1 3 3 提高饲料转化率,合成营养物质,促进生长机体中正常微生物菌群与动

31、物及其生存环境进行着有序的能量,物质交换,共同维持着胃肠道的正常功能,确保动物生长发育所必需的营养物质、酶、调节因子的供应和利用。饲用益生素中含有或能够合成参与机体物质代谢的各种消化酶,如蛋白酶,脂肪酶,淀粉酶,植酸酶和氨基酸,提高饲料利用率,产生未知的生长因子,促进动物的生长。陈惠( 1 9 9 4 年) 报道,在生长育肥猪饲料中添加芽孢杆菌添加剂,可使a 一淀粉酶及胰蛋白酶活性显著增加,益生素( 如双歧杆菌,芽孢杆菌) 能够合成多种维生素,如维生素B l ,维生素B 2 ,叶酸,烟酸等,并能促进机体对蛋白质,钙,铁和维生素D 的消化吸收。同时,益生素可以提高有益菌群的优势地位,保持胃肠道环

32、境的相对稳定,降低病原菌对营养物质的消耗,抑制某些细菌对营养物质的分解作用,减少病原菌或抗原对肠黏膜刺激而诱发免疫反应以及对环境应激反应,从而减少对能量和养分的损耗,确保最佳生产性能的发挥。另外,许多微生物本身富含营养物质,添加到饲料中可作为营养物质被动物摄取吸收,从而促进动物生长。1 3 4 提高机体免疫功能广西大学硕士论文复合酶和益生索对断奶仔猪生长性能的影响益生菌可作为非特异免疫调节因子,通过细菌本身或细胞壁成分刺激宿主免疫细胞,使其激活,促进吞噬细胞活力或作为佐剂发挥作用。此外,还可发挥特异性免疫功能,促进宿主B c 产生抗体的能力。益生素对动物免疫力的改善主要表现在促进巨噬细胞对微生

33、物细胞以及碳粒的吞噬作用;提高免疫系统抗体产生水平;提高如肠壁粘膜细胞表面的局部抗体水平吼F u l l e r ( 1 9 8 9 ) 州指出,直接饲喂活的微生物可刺激动物肠道免疫器官发育,提高动物抗体水平或提高巨噬细胞活性,增强机体免疫功能。刘克琳等( 1 9 9 5 ) 用微生物饲料添加剂饲喂肉鸡6 周,胸腺、法氏囊和脾脏的重量都显著提高了。( 胡文锋综述,2 0 0 3 ,葛风霞等,1 9 9 8 ) 【9 。1 川也证实了乳酸杆菌具有较强的活化巨噬细胞的能力。益生素对免疫系统的影响表明:它不仅能改善肠道微生态环境,而且能防止远离肠道的其他组织的病变。1 3 5 改善环境卫生微生态制剂

34、中的某些菌属,例如嗜胺菌可利用消化道内游离的氨、胺及吲哚等有害物质,同时优势菌群抑制大肠杆菌活动,扭转蛋白质向胺及氨的转化,使肠内粪便和血中氨下降排除的氨也减少。而且排出的粪中还含有大量的活性菌体,可以利用剩余的氨。孙黎等( 2 0 0 0 ) 。1 在从肉仔鸡饲料中添加E M 4 0 0 9 k g ,结果使鸡舍内氨浓度下降2 4 9 5 。因此微生态制剂的添加可极大地降低粪便臭味,改善舍内空气质量,减少机体应激,降低对环境的污染。总之,有关益生素的作用原理目前仍在继续研究。一种益生素的作用可能是由于上述的任何一种或全部因素形成的。1 4 影响益生素作用效果的因素1 4 1 动物种类益生素制

35、剂有很多类型,对某种特定动物,某一种类型可能比其它类型更适宜。现在研究表明:适于单胃动物的菌株多为乳酸菌、芽孢杆菌、酵母菌等;适于反刍动物的则多为真菌类以曲霉菌效果为好。1 4 2 水分益生素制剂在相当干燥条件下,水分对菌群活力有明显影响,但是在贮藏条件下,提高水分含量则菌群活力可能明显下降。水分对菌群活力影响最小的是芽孢杆菌,其次是粪链球菌,水分对乳酸菌影响甚大。有人认为,受水分影响大的6广西大学硕士论文复合酶和益生素对断奶仔猪生长性能的影响有益微生物不适宜作微生态添加剂使用。为了保证微生态制剂中菌群活力,配合饲料中含水量越低越好,含水量低于1 0 比较理想。1 4 3P H 值对益生素制剂

36、的影响大多数微生物在p H 4 4 5 的条件下均会自动死亡。芽孢杆菌类耐受低p H值的能力强。因此认为作为益生素制剂作用的微生物在干燥收获以前,置于P H 6 7 的中性条件下培养比较适宜。基于微生物这一特性,在配合日粮中使用时不适宜于与酸化剂混合使用。1 4 4 温度对益生素制剂的影响来源不同种类微生物对温度耐受力不同,芽孢杆菌能耐受较高温度,5 2 1 0 2范围内损失很小。加入配合词料中,在1 0 2 条件下制粒贮藏8 周后仍然比较稳定。经长时间贮存变化也很小。乳酸菌类在温度6 6 或更高时几乎完全失去活性。链球菌在7 1 条件下,活菌损失9 6 以上;酵母菌在8 2 8 6 条件下完

37、全失去活性。益生素制剂正常贮藏条件下以温度不高于2 5 为宜1 4 5 营养物质对益生素制剂的影响研究证明一些营养物质与微生态制剂混合,显著影响微生物的活性。不饱和脂肪酸对微生态制剂具有拮抗作用。配合日粮中添加微生态制剂应尽量避免与添加油脂直接接触。也有研究表明,饲料中的油脂,在制粒过程中对微生态制剂耐受温热压的能力具有保护作用。此外,饲料中的矿物质、防霉剂、抗氧化剂对微生物有拮抗作用,可降低其活性,使其不能发挥正常作用。1 5 益生素在使用时应注意的问题1 5 1 在微生物大家族中可用作益生素菌种的很多,在实际应用中应深入研究各菌种的生理特性,从中筛选出一些优良菌种,而且要尽量选育一些来自动

38、物的正常菌群,这样才能最大限度地发挥其益生的作用。芽孢杆菌等虽不是动物的正常菌群,但由于其特殊的生理特性,可以起到促生长作用,因此也常被用作益生素的菌株。1 5 2 选择菌种时要以菌株安全性为出发点,要在试验过程中定期进行安全试验检测,以保证菌株的无毒副作用;同时要保证活菌制剂中活菌的含量与稳定性,主要是控制一些外界因素的影响,如温度、湿度、酸度等;此外,饲料品质也会广西大学硕士论文复合酶和益生素对断奶仔猪生长性能的影响影响益生菌的活力。尤其是在饲料加工过程中,菌株必须能经受起高温的考验,可以通过一些微胶囊包被技术和基因工程技术来保证益生素正常效力的发挥。1 5 3 使用益生素要有一定的针对性

39、,充分考虑到其作用对象以及使用目的,对不同的动物要区别对待,对不同的使用及生产需要应选择合适的制剂,才能以最经济的代价达到最理想的效果。反刍动物一般选用真菌类益生素,以曲霉为好,可加速纤维素的分解:促进仔猪生长发育、提高日增重和饲料报酬则应选用双歧杆菌等菌株:用于改善养殖环境的主要是光合细菌、消化细菌以及芽孢杆菌。1 5 4 合理正确把握益生素的施用时间和施用剂量。益生素在动物的整个生长过程中都可以使用,但不同的生长时期其作用效果不尽相同,般多用于幼龄动物,以防止病原微生物侵害肠道,提高其防御能力,同时要达到合适的菌株数量,才能在体内形成菌群优势,发挥积极作用。另外,环境因素的影响也是不可忽视

40、的,动物处于应激状态下,体内微生态平衡遭到破坏,使用益生素对形成优势种群极为有利。1 5 5 益生素在动物中的使用主要是为了维护正常微生态平衡,这是一个长期的过程,因此,必须在动物的养殖过程中不断地加以补充,不断地加以研究,使益生素的应用更出色。1 6 必须尽快解决的问题尽管益生素的应用效果已被公认,但也有许多问题急需得到解决。目前已确认适宜作益生素的菌种种类尚少,需要开发新的菌种,也可以采用分子生物学的手段,改造现有的菌株,使之具有需要的性能。鉴于目前对益生素作用机理的研究进展缓慢,急需加强力量对益生素的作用机理进行更加深入的研究,以指导益生素的研制、生产及使用。加强对益生素剂型的研究,提高

41、活菌浓度,提高菌剂中活菌对不良环境的耐受力,延长产品保存期。可以重点考察使用真空冷冻干燥技术和微胶囊技术,制剂采用真空包装或充氮气包装。仍有部分益生素产品质量不稳定,生产处于复配、仿制阶段,检测手段不够完善,产品的标准和检测方法尚显混乱,优秀的检测人员不足,造成市场上益生索产品良莠难辨。使用不当的现象仍然存在,一定程度上影响了益生素的使用效果及发展,对益生素科学使用方法的研究的要求也就日益迫切。因此,必须建立完善的行业检测标准,制定有关法律法规的实施细则,使生产与宣传规范化。1 7 益生素未来发展方向广西大学硕士论文复合酶和益生索对断奶仔猪生长性能的影响针对目前益生索应用效果及应用过程中出现的

42、问题,人们开始研究和探讨如何更加合理有效地使用益生素,使之发挥其预期效力。从国外的开发和使用效果看,复合菌制剂较单一菌株益生素的作用效果更好,更符合生态环境;复合菌制剂一般都具有协同作用,因此有单一菌株的益生素逐渐向复合益生素发展的趋势,如肠道共生复合菌、瘤胃复合菌等:从医用益生素逐渐向适合动物生理生化特性的益生索品种开发:益生素在用于动物肠道的研究基础上逐渐转向用于伤口感染等治疗;同时在饲用益生素发展的基础上,逐渐向农业、医疗保健及环境改良等方面发展。为了提高益生菌剂有效性,人们正着力于益生素辅剂的研制开发,如微胶囊的应用。近年来,国外开发了一些具有双歧杆菌增殖效果的寡糖,并开展了寡糖与益生

43、素复合添加试验,取得了可喜的效果;同时,人们也在开发和研究益生素与其他制剂间的联合使用,如酶制剂、酸化剂、中草药等,充分利用制剂间的协同作用。益生素作为转基因工程菌的研究已有报道,主要是将益生菌作为基因工程的受体菌,使之表达一些有用的外源基因,扩大其生物学特殊功能,从而达到一种制剂发挥多种功能的目的,如可以利用此技术来增强益生菌的稳定性。第二章复合酶制剂研究进展2 0 世纪2 0 5 0 年代在畜禽养殖业中开始应用饲用复合酶,但由于酶的生产成本昂贵,6 0 7 0 年代饲用复合酶应用处于进展缓慢甚至停滞的阶段,到8 0 年代由于转基因技术和发酵工业的长足进步,饲用复合酶应用进入了突飞猛进的阶段

44、。1 9 8 4 年芬兰在全球首次将复合酶应用于大麦日粮,这标志着复合酶进入饲料工业商业化应用的开始。2 0 0 0 年,全球复合酶销售额超过1 5 亿美元。复合酶的应用不但能提高饲料利用率,降低饲养成本,而且能减少养殖业对环境的污染。添加复合酶,粪便排放量减少2 0 左右,猪粪氮排放量降低5 左右,鸡粪氮排放量降低2 0 左右。( S h e p p y 2 0 0 1 ) 12 1 复合酶的分类复合酶大多以木聚糖酶、蛋白酶、淀粉酶、植酸酶等为主。随着所应用的动物种类、生长阶段和日粮的不同,复合酶所含各种酶的种类、比例和活性也不同,广西大学硕士论文复合酶和益生索对断奶仔猪生长性能的影响因此复

45、合酶的种类就很多。2 1 1 从同一动物按不同生长阶段来分,如猪用酶分为仔猪酶、生长肥育猪酶2 1 2 对同一种且相同生长阶段的动物按饲喂日粮来分又可分为若干种,如仔猪酶分为麦类日粮复合酶、玉米豆粕日粮型复合酶等。2 1 3 按照饲用酶制剂功能可分为两大类:第一类是以降解多糖和蛋白质等生物大分子为主,主要包括一淀粉酶( 分解为直链淀粉酶、支链淀粉酶) 、糖化酶( 又称葡萄糖淀粉酶) 、纤维素酶( C 酶、C x 酶、B 一葡萄糖苷酶) 、半纤维素酶( 木聚糖酶、甘露聚糖酶、阿拉伯聚糖酶、半乳聚糖酶) 、蛋白酶和脂肪酶等。主要功能是破坏植物细胞壁( 植物细胞壁是由蛋白质、脂肪和多聚糖昔键连接而成

46、的网状结构) ,使细胞内容物充分释放出来。第二类是以降解饲料中的植酸、B 一葡聚糖和果胶等抗营养因子为主,主要包括植酸酶、B 一葡聚糖酶和果胶酶等。植酸酶则可降解植酸,其生产应用己经比较成熟。B 一葡聚糖酶可分解构成B 一葡聚糖的B 1 ,3 葡萄糖苷键与B - 1 ,4 葡萄糖苷键,使黏度下降。果胶酶分解果胶后,能明显提高动物对植物养分的利用率。2 2 酶作用的机理饲用酶制剂可能通过以下几条途径发挥作用:2 2 1 补充内源酶的不足,提高内源酶的分泌和活性外源酶与内源消化酶之间的关系是人们直关注的焦点,如外源酶中的蛋白酶和淀粉酶等是否会对内源酶的分泌产生反馈性抑制作用以及这些蛋白酶是否会水解

47、内源消化酶,导致内源酶活性降低。从目前研究结果来看,在畜禽日粮中添加外源酶可提高内源酶活。外源酶通过提高内源酶活,从而改善畜禽生产性能的途径可能有以下几种:首先,外源酶可以弥补幼龄畜禽消化道内源酶( 如蛋白酶和淀粉酶) 等的不足。幼龄畜禽的内源消化酶般均处于不足状态。0 w s l e y 等( 1 9 8 6 ) 报道,在饲料中加入可分解纤维素、蛋白质和淀粉的酶,肠道中可供进一步水解基质增加,从而促进内源酶的分泌。“”另外,A l m i r a l l 等( 1 9 9 4 ) 也研究表明,在雏鸡大麦饲粮中,添加B 一葡聚糖酶可显著提高食糜中的胰蛋白酶、淀粉酶的活性。“”广西大学硕士论文复

48、合酶和益生索对断奶仔猜生长性能的影响其次,通过消除日粮中内源消化酶的抑制因子来提高畜禽消化酶的活性。在麦类饲料中可溶性非淀粉多糖能够对二糖酶( 孙哲等,2 0 0 0 ) “”和脂肪酶( 于旭华等,2 0 0 1 ) “”等消化酶的活性产生抑制作用,添加非淀粉多糖酶则消除其对消化酶的抑制作用( A 1 m i r a l l 等,1 9 9 5 ) “”。由此可见,补充幼龄畜禽消化道酶活和提高内源酶活水平,是饲用酶制剂提高畜禽生产性能的作用方式之一。2 2 2 摧毁植物细胞壁,提高营养物质的利用率植物细胞壁主要由纤维素、半纤维素和果胶等非淀粉多糖组成,也含有少量蛋白质、酚类和脂肪酸等物质。这些

49、物质通过氢键或共价键相互交联结合,共同构成细胞壁结构,支持和保护细胞内容物。其中,纤维素主要形成细胞壁框架结构,而以阿拉伯木聚糖和B 一葡聚糖为主的半纤维素及果胶等基质多糖将纤维素骨架包围起来,起填充和连接作用。单胃动物消化道不能分泌分解非淀粉多糖的消化酶,一部分被包裹在其中的养分不能被消化利用( 张铁鹰等,2 0 0 2 ) “”。利用微生物发酵生产木聚糖酶、葡聚糖酶、0 一甘露聚糖酶、果胶酶和纤维素酶等非淀粉多糖酶,则能够水解这些多糖,破坏细胞壁结构。经研究B 一葡聚糖酶、半纤维素酶、果胶酶等都能降解植物细胞壁,使内容物释放出来,提高能量和蛋白质的利用率。有关纤维素酶破坏细胞壁的作用也有报

50、道,N a h m 等( 1 9 8 5 ) “”发现,在高小麦麸的肉仔鸡日粮中添加纤维素酶显著提高了细胞壁成分的消化率( P 0 0 5 ) 和1 5 2 5 ( P O 0 5 ) ,料重比分别降低了3 8 3 ( P O 0 5 ) 和8 5 0 ( P O 0 1 ) 。夏枚生( 2 0 0 0 ) 研究也表明,添加木聚糖酶、p 一葡聚糖酶和纤维素酶使仔猪日增重提高了1 5 2 ( P 0 0 5 ) ,料重比降低了8 5 0 ( P O 0 1 ) 。B e d f b r d 等( 1 9 9 2 ) 【4 6 l 在大麦一大豆型日粮中使用B 一葡聚糖酶使试验猪日增重提高了1 7

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