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1、色谱分析法复习题1. 色谱法作为分析方法的最大特点是什么? 1色谱法的突出特点是具有很强的分别力气。所以,色谱法成为很多分析工作的先决条件和必需的步骤。2 近二十年来, 随着与色谱法相关的一系列技术,如填料与柱制备技术、仪器一体化技术、检测器技术、数据处理技术的进展与创,色谱法已具有分别效率高、分析速度快、样品用量少、灵敏度高、分别和测定一次完成、易于自动化等优点。2. 一个组分的色谱峰可用哪些参数描述?这些参数各有何意义? 色谱峰的特征一个组分色谱峰特征的描述:峰高或峰面积用于定量峰位用保存值表示,用于定性峰宽用于衡量柱效3. 衡量色谱柱效的指标是什么?请作简要的说明. 色谱峰的柱效参数 (
2、区域宽度 )标准差():正态分布曲线上两拐点间距离之半 . 的大小说明组分在流经色谱柱的过程中的分散程度。小,分散程度小,极点浓度高,峰形 “瘦”,柱效高。反之,大,峰形“胖”,柱效低。峰宽W :在峰两侧拐点处所作切线与峰底相交两点间的距离.W = 4半峰宽W1/2:通过峰高的中点作平行于峰底的直线,此直线与峰两侧相交两间的距离.W1/2= 2.355W = 1.699W1/24. 简述谱带展宽的缘由.5. 什么是分别度?要提高分别度应从哪两方面考虑?分别度是相邻两组分色谱峰保存时间之差与两峰峰宽均值之比。分别度是总分别效能指标。R=tR2tR1/W1+W2/ 2=6. 以下参数发生何种变化可
3、使理论塔板高度减小?(1) 流淌相速度;(2)固定相颗粒;(3)组分在固定相中的集中速度;(4)柱长. Ven Deemter 方程式HA + B/u + CuH:理论塔板高度 A:涡流集中系数B:纵向集中系数影响塔板高度的 C:传质阻抗系数 u:流淌相线速度在填充色谱柱中,由于填料粒径大小不等,填充不均匀,使同一组分的分子经过多个不同长度的途径流精彩谱柱,使色谱峰展宽。涡流集中的程度由下式打算:A2dp7. 名词解释: (1)噪声和飘移;(2)灵敏度和检测限;(3)线性和线性范围.(4)梯度洗脱.8. 写出分别度(R)与柱效(n)、安排系数比()及容量因子(k)间的关系式.指出各项 的含义.
4、当分别增加 n、k 时,R 有什么样的转变?9. 色谱分析法进展定量分析的依据是什么?10. 简述 Van Deemter 方程在气相色谱和高效液相色谱中表达形式的异同.11. 某色谱柱的理论塔板数很大 ,是否任何两种难分别的组分确定能在该柱上进行分别?为什么?12. 什么是正相色谱?什么是反相色谱?争论正、反相色谱中流淌相强度与极性的关系.13. 在 RP-HPLC 中使用的甲醇-水流淌相体系中参与磷酸盐时,流淌相的洗脱力气是增大还是减小?为什么?14. HPLC 的光二极管阵列检测器可以得到那些信息?15. 用方程式说明反相离子对色谱法分别强酸、强碱的机制.16. 何谓化学键合相?常用的化学键合相有哪几种类型?17. 常用的 HPLC 定量分析方法是什么?内标法的特点是什么?18. 以液相柱色谱方法分别纯化蛋白质的分别模式有几种 ,各自的根本特点是什么?19. 用 HPLC 建立一种测定生物材料中某种活性成分的含量的方法时,进展课题设计需要从哪几个根本方面来考虑?