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1、党参对小鼠记忆获得性障碍的改善作用（跳台法）【目的】 学习记忆获得性障碍模型的制作方法，掌握用跳台法观 察中药的益智作用。【原理】小鼠跳台仪底面可以通电，底面上放置1个绝缘的跳台。当小鼠在一次训练中受到电击时，跳上跳台可逃避电击，从而获得记 忆。记忆障碍模型组动物在u I练前注射胆碱受体阻断剂樟柳碱或东食若碱造成记忆障碍，在一定时间内学习记忆能力下降，跳下潜伏 期缩短，跳下次数增加。通过记忆障碍模型动物可观察补益药复方党 参对小鼠记忆障碍的改善作用。智力低下多见于虚证，是由于气血亏损，心脾两虚导致肾精不足, 髓海不充所致。许多具有补益作用的中药及其复方制剂常有益智、增 强记忆和填髓补脑等功效。
2、【器材】 小鼠跳台仪：为一个60cm x 12cm x 18cm的被动回避反射箱，箱内用不透明的黑色塑料板分隔成5间，箱底铺以铜栅，铜丝直径为2mm，间隔为5mmo每间左后方放置一个高和直径均为405cm的橡皮垫，作为跳台。可调变压器、秒表5只、1ml注射器 3支。【药品】 党参10g/ml、东苴若碱lmg/ml、脑复康10mg/ml。【动物】小白鼠。【方法】 用小鼠6只，雄性，体重为152g ,按体重随机分为3 组，每组2只。分别为给药组、模型组和对照组。首先将可调变压器 与跳台仪相连，用变压器控制电流强度。训练前lOmin，模型组、 给药组小鼠分别腹腔注射东苴若碱2mg/kg，对照组腹腔注
3、射等量的 生理盐水。训练时，同时将5只小鼠分别放入小室内，适应3min , 然后通以36V电流。小鼠双足同时接触铜栅为触电，视为错误反应。 训练5min并记录触电次数。2h后重新测试，观察小鼠记忆情况。测试时，先把小鼠放在跳台上，记录并比较5min内跳下次数，作为 记忆指标。统计、分析并比较3或5min内跳下次数及跳下潜伏期(将 小鼠放到台上开始计时，到第一次双足触电时间)作为记忆指标，比 较各组间差异。【结果】按表记录。党参对东苴若碱所致小鼠记忆获得障碍的改善作用(士SD)组别5min内错误次数潜伏期(s)对照组模型组给药组【注意】(1)实验室应保持安静，光线不宜过强，室温应控制在20 25
4、 ;实验前动物应在实验室适应2 3d。(2)实验用动物应预先经过挑选，两前肢间皮肤电阻在150 300k。之间为宜，实验时各组间动物应交叉进行，以减少时辰的影响。(3)实验过程中要及时清理动物大小便，实验完成后跳台仪底部要彻 底清洗，擦干；铜栅上如污垢沉积会影响触电效果。此方法简便易行，不需要复杂的技术设备，同时可以观察5只小鼠 的反应，适用于初筛。缺点是动物个体差异比较大。【附】记忆损伤模型的制备：中枢抑制药、M受体阻断剂、脑蛋 白合成抑制剂以及缺氧均可制作各类型学习记忆缺损的动物模型。例 如：用戊巴比妥钠15 30mg/kg，训练前30min腹腔给药，或20 40%的乙醇0.1ml/10g训练前30min灌胃，均可制作小鼠记忆获得 性障碍模型；脑蛋白质合成抑制剂环乙酰亚胺120mg/kg训练后腹 腔给药，或致缺氧剂亚硝酸钠120mg/kg训练后皮下给药，均可造 成记忆巩固障碍；上述乙醇于测试前30min灌胃给药可造成小鼠记 忆再现障碍，这些方法均可用于益智药物的筛选。【思考题】1 .为什么要在记忆损伤模型动物身上来观察药物的作用？采用正常 动物能否观察到该药的益智作用？为什么？2 .从实验结果分析党参有无益智作用？有何临床意义？