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1、2022年生物实验心得体会(精选多篇) 第一篇：生物试验心得体会 生物学是一门以试验为基础的自然科学，现代生物科学的发展尤其依靠科学试验。在生物教学中，试验、学习和视察等实践环节对我们驾驭生物学学问、科学方法、培育我们的动手实力和形成科学素养都起到了至关重要的作用。正是因此，从我们起先接触生物这门学科起先，就不断有生物试验课程，熬炼我们各种各样的实力。 但是，也的确是上过各种各样的生物试验课，我才更加深刻的感受到这次做的现代生物技术综合试验对我的影响有多大。 首先，我肯定得提的，便是金卫华老师，还有金老师给我们提出的试验要求。 独到的试验支配，让我听后为之一震，因为从初中起先，甚至是高校的前两
2、年间，没有一位老师有提过，要求我们在学校支配的试验课时间以外也能来试验室做试验，当然这也许也与我们的生物技术试验的内容支配有密不行分的关系。始终以来，我们都按部就班的精确听从着课程表给我们定下的规则，而金老师却轻描淡写，扬手舞舞便打破了覆盖着我们多年的囚笼。有时，我甚至会暗想，伴随着这种思维限制的打破，是否也会激发出我们名为想象力的翅膀，让我们能够在学问的世界中翱翔呢？ ，不能扯太远，还须要拉回我心得的主题试验！老师在第一次课上，对我们详尽的讲解了我们此学期须要完成的一系列试验。其中全是环环相扣，嵌合紧密，有点一招即失，满盘皆输的压力，不过我们更多的是怀着一种跃跃欲试的激烈，恨不得立马动手，靠
3、着自己学来的学问，仔细的完成这套试验，并且还能看到最终那令人欣喜的结果。就这么妄想着妄想着，我们从其次周起先的现代生物技术综合试验的漫长旅程。 由于，老师没有硬性的要求试验时间，我们便是一有空闲就往试验室里钻，也就少了以前试验课上出现的，因为部分试验仪器的数量缺少，同学们每次做试验都是你推我嚷的，造成了试验爱好的流失。以至于做试验的看法越来越涣散，甚至只是简洁的走下过场而已，几次试验课下来，热忱全无。但根据金老师的提议来，大家来试验的时间不同，使得对仪器运用的时间错开，削减了为争抢仪器或是药品而嘈杂不堪的场面，试验也变得顺当了很多。 金老师会很体谅一些先起先忙活的同学，在黑板上写清他们试验也许
4、会做到的步骤和留意事项，后面试验的打算物品和要求，然后起先在忙于试验而奔跑中的同学之间晃悠。视察我们的试验操作，或是时时常提点说明一下我们试验步骤的缘由；试验药品的作用；如何做会得到更的结果；试验没有得到的结果或是做的失败了的缘由。可是，随着试验的发展，后来更多的时候，是我们在看过书本上要求的试验步骤后，去缠着金老师，围在他四周，问他关于试验的各种问题，就算同样的问题被问过很多次，金老师依旧是亲善的笑着一一解答我们的疑问，他的平易近人，他的悉心教育，他的不骄不躁，他的耐性与笑容都深深的打动了试验中的每位同学。 其实，他的这种教学方式，亮点就在于此，自主试验迫使我们会细致品尝步骤中的点滴；试验过
5、程中的出现的各种问题，就要求我们会去思索如何解除，接着试验；试验结果的不志向，更是强迫我们能仔细回顾试验中的任何细微环节，找出问题所在，也会须要我们去深化了解这步试验的机理，用药品的理由，试验操作要求等。这些自己通过自己动手动脑而逐步累积起来的阅历，是在以往任何时候都没有获得过的，那时，只知道根据老师和书本上写的步骤来，根本不在意为什么要这么做，于是少了对试验的探究，能学到的东西自然也削减。 说完对金老师和老师教化方式的看法，其次我想谈谈，我在这样的教学指导下获得的收获。 我是一个很懒散的人，以前做试验，大部分都是照本宣科，很少动脑筋去思索试验的前因后果，对台上老师的讲解也都是一知半解的混着。
6、但是，这次试验着实让我很费了一番脑子，有深化的去了解个中原理，试验操作的机理，仪器的运用方法，帮助我订正和娴熟很多操作，同时让我相识到自己以前的模糊与不负责任，也让我体会到全身心的投入到一件事中，是如此欢乐和满意，还得到了多在课堂上恒久无法获得的学问。下面，详细说说看我的几件不小的收获。 有小到大来叙述，分有这样一些。第一件，混试验室久了，我有了可以变出任何大家想要的器皿的功能，只要是试验室里有的且我们熟知的物品，无论是药品试剂，还是不同规格的量筒试管，我都可以摸出来，省去了四处找老师寻求帮助的时间和气力。其次件，学会了配置很多的试剂，于是知道了不同的试剂配置须要留意的问题，巩固了某些药品相关
7、的学问，并且在多次配置时，得出了一个结论：假如不是很熟识的试剂配方，最是拿一个特地的本子记录下来，以备时常之需，这样一来，以后试验也不会因为试剂的问题而手忙脚乱。第三件，试验步骤须要细致的斟酌其中的奇妙，每一步如此走，自然有前人的用意，终归这些试验都是过去的科学家探讨出来的精华继承，理解了他们的意图和原由，做起试验来会更加的得心应手也不易遗忘或出错。第四件，这件是我最大的心得，也不全是从今次试验中得来，且也不是只能运用于做试验中，这份心得是：在确定要做的事情后，最考虑清晰行动时会须要用些什么，做些什么，将打算工作做，为后续行动铺垫，按其规律列清单，会使得试验或者任何别的事情做得更加顺当，有条理
8、，解除做过多无用功的可能性，提高了效率的同时还降低错误失误的出现概率，胜利率也会增高。 以上是我这个学期里，从现代生物技术综合试验里得到的一些心得。我希望在下个学期里，我能将自己从这里得到的心得，学习应用到其他的试验甚至是学习生活中去，扩充自己的学问，拓宽自己的视野，增厚自己的底蕴，加强自己的实力，不敢放言称自己要成为将来生物界中的一流人才，只能勉励自己成为一个不负众望的有用的人。 其次篇：生物试验心得体会 试验心得体会 在真正投入到创新试验安排当中之前，我以为不会很难。因为课内试验我们也做了许多，只要做预习工作，听老师的讲解，再加上自己多动脑筋，几乎没遇上什么比较大的困难，试验完成起来也比较
9、快。各种各样的试验加起来，涉及的学问面很广，学到了许多，让自己对于这样的探讨与试验工作也更加感爱好。 但是真正起先创新试验安排时，发觉我仿佛进入了一个新的空间。一切要从头学起，从最简洁的做起。与高年级的学长比起来，自己的基本试验技能与专业学问少的可怜，面对那些精密的仪器与多数的献资料，信念一下子被浇熄了大半。每天跟在学长后面做着清洗瓶子，到扫卫生，摘桑叶，诸如此类的体力活。貌似什么也学不到，看着学长学姐一言不发的娴熟操作，却一点也摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想泄气，但幸亏老师经常与我们开会探讨，开导激励我们，他还时常有意无意地启发我们的平安防意识。古语说的没错:耳闻目睹。一每天下来，不知不
10、觉当中，我们的试验技巧越来越娴熟，对于一些仪器的基本操作也能单独上手，学长学姐很有耐性地一次次订正我们犯下的或大或小的错误，并不厌其烦的嘱咐我们留意平安。 慢慢地我们可以单独完成一些比较系统全面的试验工作。但错误当然也是不行避开的，而且人往往要犯错之后才能明白如何不犯错和为什么不要犯下这样的错误。比如因为我们某一步的试验操作不规，导致最终的试验结果不尽入人意，无法纳入最终的总结分析中，也就是说我们白忙活一场。其实这样的失败也未尝不是一件事，通过它我们更加清楚地相识到这个试验步骤的原理、影响及详细细微环节。 重复这是整个试验过程中常做的一件事，面对规律性不强的试验结果，我们只有一次次反思，重新再
11、来，假如一而再再而三的重复失败，我们就只得求助于学长学姐和老师们了，但是这样详细的操作细微环节中失误，非当事人又是无法完全了解的，还是须要我们自己一点一点的去摸索。 当然整个试验过程中最困难的还要数自行设计试验的详细步骤了，老师所能给的学问一个全面概括的指导看法，让我们不致发生方向性的失误。老师也给了我们一些相关的献资料，但同样的道理，详细到某一方面我们还是要自己去搜寻，筛选，概括。有时甚至要面对一些英献，仅凭我们已有的英水平还过于单薄。困难就是让人来解决的。我们摸索前进，自己跑到机房查资料，下载翻译软件，制定试验方案，阅读大量晦涩难懂的献，失败了就再来一次，总结后再勇往直前。困难一个接着一个
12、，但既然选择了这条路，我们就要毅然决然的走下去，不管后面的路是沼泽泥泞还是荆棘丛生。 最终我们的试验数据渐渐变得有规律起来，面对麻烦的麻烦我们也能镇静自若，试验的因素探究一个个完成，一点点接近于目标。回望之前，发觉与取得的成果，获得的学问相比，以前都算不了什么。 不得不承认，通过这项本科实践创新训练项目，我们学到了许多，得到了许多，有些是书本上恒久也学不来的，有些仅靠我们自己摸索几乎为不行能的，有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来的。 在这里要感谢关切爱惜我们的老师，学长学姐还有同届同学以及学弟学妹，没有你们我们无法完成这项艰难的工作。 试验一 :本次试验中对交换机的基本配置的学习探讨有了新的体
13、会，在计算机上配置交换机的基本配置，驾驭交换机吩咐行各种操作模式的区分，以及模式之间的切换。实现上有了肯定的突破，在配置过程中用到的吩咐，让我感觉到英语也要多学习，尤其是专业英语，对配交换机有很大便利！ 试验二：这次试验关于交换机的全局配置，通过交换机的全局的基本配置，让我充分明白配置交换机的设备名称和配置交换机的描述信息必需在全局配置模式下执行。hostname配置交换机的设备名称。当用户登录交换机时，你可能须要告知用户一些必要的信息。你可以通过设置标题来达到这个目的。你可以创建两种类型的标题：每日通知和登录标题。banner motd配置交换机每日提示信息motdmessage of th
14、e day。banner login配置交换机登录提示信息，位于每日提示信息之后。 试验三：做试验既能加深我们对试验原理的理解和相识，学会应用这些原理，又能煅炼我的动手实力，通过这次试验让我明白对于络，我们要树立重视实践更甚于重视理论的观点！业余时间扩宽计算机络硬件方面的视野，尤其希望可以去电信公司的机房参观学习，提高个人修养与实力；加强本试验小组内部各成员之间的沟通，现在的团队合作精神很重要，要及早的去培育。 试验四：这次试验总体来说没什么困难，都是一些基本的交换机配置，但是最终的思索题中提出一些问题还是很有意思的，配置起来也很好玩。主要是查看交换机的系统和配置信息。主要要到的技术原理是查看
15、交换机的系统和配置信息吩咐要在特权模式下执行。showversion查看交换机的版本信息，可以查看到交换机的硬件版本信息和软件版本信息，用于进行交换操作系统升级时的依据。show mac-address-table查看交换机当前的mac地址表信息。show running-config查看交换机当前生效的配置信息。 试验五：通过这次试验，让我明白了一个道理磨刀不误砍柴工。前期的学问储备、献储备、材料打算、方法打算可以避开手忙脚乱，充分的预试验使你充溢信念。一步一个脚印，就不必“从头再来”。最不能容忍的是在起先的几步偷懒，造成后面总有一些无法解除的障碍。这次试验让我学会了vlan是指在一个物理段
16、内，进行逻辑的划分，划分成若干个虚拟局域。vlan最大的特性是不受物理位置的限制，可以进行敏捷的划分。 试验六：这次试验总体来说没什么困难，都是一些基本的交换机和vlan配置，但是最终的思索题中提出一些问题还是很有意思的，配置起来也很好玩。让我明白了千万不能把时间全部消耗在试验台上。看献、看书、看别人的操作、听别人的阅历、探讨别人的思路，边做边思索。要学会比较，不要盲从。否则，会被一些小小的问题困扰许久。要想让自己学问更加的丰富，只有让自己的理论与实践相应的结合起来；才会学到更加丰厚的学问和地道的阅历！ 试验七：通过这次试验，让我体会到对于络，我们要树立重视实践更甚于重视理论的观点，做试验既能
17、加深我们对试验原理的理解和相识，学会应用这些原理，又能煅炼我的动手实力，人总是有一点虚荣心的。只把胜利的步骤或美丽的结果记到试验记录里，是许多人的做法。殊不知，很多珍贵阅历和意外发觉就这样与你擦肩而过。客观、真实、详尽的记录是一笔珍贵的财宝。 试验八：计算机络的试验在做了几周后最终把交换机有关的试验的全部做了！个人感觉通过这几次试验，自己在计算机络方面有了许多的了解，对计算机络也有了更多的爱好！让我明白了英语也要多学习，尤其是专业英语，对配置路由，交换机有很大便利，依据须要加深络编程语言的学习；多看看<络工程师>方面的书,对了解络有很大帮助.对于络，我们要树立重视实践更甚于重视理论
18、的观点！ 试验九：本次试验中对路由器吩咐行各种操作模式学习探讨有了新的体会，在计算机上配置路由器吩咐行各种操作模式，驾驭路由器吩咐行各种操作模式的区分，以及模式之间的切换。实现上有了肯定的突破，在配置过程中用到的吩咐，让我感觉到英语也要多学习，尤其是专业英语，对配交换机有很大便利！ 试验十：这次试验关于路由器端口的基本配置，通过路由器端口的基本配置，让我充分明白 锐捷路由器接口fastethernet接口默认状况下是10m/101m自适应端口，双工模式也为自适应，并且在默认状况下路由器物理端口处于关闭状态。路由器供应广域接口，运用v.35线缆连接广域接口链路。在广域连接时一端为dce，一端为d
19、te。要求必需在dce端配置时钟频率才能保证链路的连通。在路由器的物理端口可以敏捷配置带宽，但最大值为该端口的实际物理带宽。 试验十一：通过查看路由器的系统和配置信息试验，加深我们对试验原理的理解和相识，学会应用这些原理，又能煅炼我的动手实力，通过这次试验让我明白对于络，我们要树立重视实践更甚于重视理论的观点！业余时间扩宽计算机络硬件方面的视野，尤其希望可以去电信公司的机房参观学习，提高个人修养与实力；加强本试验小组内部各成员之间的沟通，现在的团队合作精神很重要，要及早的去培育。 试验十二：通过这次试验，让我明白做过试验的人都经验过失败和挫折。有些失败应当在预试验阶段发生，你这时能坦然接受。假
20、如不做预试验，在正式的试验中遇到，你的挫折感就很明显。假如你因为赶时间而误操作，你会懊丧。假如你能因为目前心浮气燥而坚决地放一放，就可以避开悲剧的发生。假如你早上进入试验室之前还不知道今日要干什么，你最想了再去。最大的错误是重复犯同样的错误。记住，屡教不改者不适合做试验，要想让自己学问更加的丰富，只有让自己的理论与实践相应的结合起来；才会学到更加丰厚的学问和地道的阅历！ 第三篇：生物试验心得体会 试验心得体会 在真正投入到创新试验安排当中之前，我以为不会很难。因为课内试验我们也做了许多，只要做预习工作，听老师的讲解，再加上自己多动脑筋，几乎没遇上什么比较大的困难，试验完成起来也比较快。各种各样
21、的试验加起来，涉及的学问面很广，学到了许多，让自己对于这样的探讨与试验工作也更加感爱好。 但是真正起先创新试验安排时，发觉我仿佛进入了一个新的空间。一切要从头学起，从最简洁的做起。与高年级的学长比起来，自己的基本试验技能与专业学问少的可怜，面对那些精密的仪器与多数的献资料，信念一下子被浇熄了大半。每天跟在学长后面做着清洗瓶子，到扫卫生，摘桑叶，诸如此类的体力活。貌似什么也学不到，看着学长学姐一言不发的娴熟操作，却一点也摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想泄气，但幸亏老师经常与我们开会探讨，开导激励我们，他还时常有意无意地启发我们的平安防意识。古语说的没错:耳闻目睹。一每天下来，不知不觉当中，我们
22、的试验技巧越来越娴熟，对于一些仪器的基本操作也能单独上手，学长学姐很有耐性地一次次订正我们犯下的或大或小的错误，并不厌其烦的嘱咐我们留意平安。 慢慢地我们可以单独完成一些比较系统全面的试验工作。但错误当然也是不行避开的，而且人往往要犯错之后才能明白如何不犯错和为什么不要犯下这样的错误。比如因为我们某一步的试验操作不规，导致最终的试验结果不尽入人意，无法纳入最终的总结分析中，也就是说我们白忙活一场。其实这样的失败也未尝不是一件事，通过它我们更加清楚地相识到这个试验步骤的原理、影响及详细细微环节。 重复这是整个试验过程中常做的一件事，面对规律性不强的试验结果，我们只有一次次反思，重新再来，假如一而
23、再再而三的重复失败，我们就只得求助于学长学姐和老师们了，但是这样详细的操作细微环节中失误，非当事人又是无法完全了解的，还是须要我们自己一点一点的去摸索。 当然整个试验过程中最困难的还要数自行设计试验的详细步骤了，老师所能给的学问一个全面概括的指导看法，让我们不致发生方向性的失误。老师也给了我们一些相关的献资料，但同样的道理，详细到某一方面我们还是要自己去搜寻，筛选，概括。有时甚至要面对一些英献，仅凭我们已有的英水平还过于单薄。困难就是让人来解决的。我们摸索前进，自己跑到机房查资料，下载翻译软件，制定试验方案，阅读大量晦涩难懂的献，失败了就再来一次，总结后再勇往直前。困难一个接着一个，但既然选择
24、了这条路，我们就要毅然决然的走下去，不管后面的路是沼泽泥泞还是荆棘丛生。 最终我们的试验数据渐渐变得有规律起来，面对麻烦的麻烦我们也能镇静自若，试验的因素探究一个个完成，一点点接近于目标。回望之前，发觉与取得的成果，获得的学问相比，以前都算不了什么。 不得不承认，通过这项本科实践创新训练项目，我们学到了许多，得到了许多，有些是书本上恒久也学不来的，有些仅靠我们自己摸索几乎为不行能的，有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来的。 在这里要感谢关切爱惜我们的老师，学长学姐还有同届同学以及学弟学妹，没有你们我们无法完成这项艰难的工作。 第四篇：生物试验心得体会刘焕龙 试验心得体会 在真正投入到srp试验苦
25、马豆的黄酮提取安排当中之前，我以为不会很难，觉得只要做打算工作，听导师的讲解，再加上自己多动脑筋，试验应当能够顺当进行。各种各样的试验加起来，涉及的学问面很广，学到了许多，让自己对于这样的探讨与试验工作也更加感爱好。 但是真正起先创新试验安排时，发觉我仿佛进入了一个新的空间。一切要从头学起，从最简洁的做起。与高年级的学长比起来，自己的基本试验技能与专业学问少的可怜，面对那些精密的仪器与多数的献资料，信念一下子被浇熄了大半。每天跟在组长后面做着清洗瓶子，到扫卫生诸如此类的零活。貌似什么也学不到，看着组长一言不发的娴熟操作，却一点也摸不到头脑。 有时真的懊恼的有些想泄气，但幸亏老师有时会与我们探讨
26、，开导激励我们，还时常有意无意地启发我们的平安防意识。古语说的没错:耳闻目睹。一每天下来，不知不觉当中，我的试验技巧越来越娴熟，对于一些仪器的基本操作也能单独上手，组长很有耐性地一次次订正我们犯下的或大或小的错误，并不厌其烦的嘱咐我们留意平安。 慢慢地我们可以单独完成一些比较系统全面的试验工作。但错误当然也是不行避开的，而且人往往要犯错之后才能明白如何不犯错和为什么不要犯下这样的错误。比如因为我们某一步的试验操作不规，导致最终的试验结果不尽入人意，无法纳入最终的总结分析中，也就是说我们白忙活一场。其实这样的失败也未尝不是一件事，通过它我们更加清楚地相识到这个试验步骤的原理、影响及详细细微环节。
27、 重复这是整个试验过程中常做的一件事，面对规律性不强的试验结果，我们只有一次次反思，重新再来，假如一而再再而三的重复失败，我们就只得求助于学长学姐和老师们了，但是这样详细的操作细微环节中失误，非当事人又是无法完全了解的，还是须要我们自己一点一点的去摸索。 当然整个试验过程中最困难的还要数自行设计试验的详细步骤了，老师所能给的学问一个全面概括的指导看法，让我们不致发生方向性的失误。老师也给了我们一些相关的献资料，但同样的道理，详细到某一方面我们还是要自己去搜寻，筛选，概括。有时甚至要面对一些英献，仅凭我们已有的英水平还过于单薄。困难就是让人来解决的。我们摸索前进，自己跑到机房查资料，下载翻译软件
28、，制定试验方案，阅读大量晦涩难懂的献，失败了就再来一次，总结后再勇往直前。困难一个接着一个，但既然选择了这条路，我们就要毅然决然的走下去，不管后面的路是沼泽泥泞还是荆棘丛生。 最终我们的试验数据渐渐变得有规律起来，面对麻烦的麻烦我们也能镇静自若，试验的因素探究一个个完成，一点点接近于目标。回望之前，发觉与取得的成果，获得的学问相比，以前都算不了什么。 不得不承认，通过这项本科实践创新训练项目，我们学到了许多，得到了许多，有些是书本上恒久也学不来的，有些仅靠我们自己摸索几乎为不行能的，有些仅凭我们自行监督是无法坚持下来的。 在这里要感谢关切爱惜我们的老师，学长学姐还有同届同学，没有你们我们无法完
29、成这项意义深刻的工作。 第五篇：生物技术试验心得体会 生物技术试验心得体会 基因克隆技术是分子生物学的核心技术，其目的是获得某一基因或dna片段的大量拷贝，用于深化分析基因的结构与功能，并可达到人为改造细胞以及物种遗传性状的目的。本论主要从以下几个方面来介绍基因克隆技术：目的基因的获得 、目的基因和载体的连接、重组分子的扩增和鉴定。 可概括为分、切、连、转、选。“分”是指分别制备合格的待操作的dna，包括作为运载体的dna和欲克隆的目的dna；“切”是指用序列特异的限制性内切酶切开载体dna，或者切出目的基因；“连”是指用dna连接酶将目的dna同载体dna连接起来，形成重组的dna分子；“转
30、”是指通过特别的方法将重组的dna分子送入宿主细胞中进行复制和扩增；“选”则是从宿主群体中选择出携带有重组dna分子的个体。基因克隆技术包括把来自不同生物的基因同有自主复制实力的载体dna在体外人工连接，构建成新的重组dna，然后送入受体生物中去表达，从而产生遗传物质和状态的转移和重新组合。 一. 目的基因的获得 目的基因是指所要探讨或应用的基因，也就是将要克隆或表达的基因。获得目的基因是分子克隆过程中最重要的一步。基因工程流程的第一步就是获得目的dna片段,。所需目的基因的来源, 不外乎是分别自然存在的基因或人工合成基因。常用的方法有pcr 法、化学合成法、cdna法及建立基因库的方法来筛选
31、 pcr方法 pcr 是一种在体外快速扩增特定基因或dna。聚合酶链式反应是体外酶促合成特异dna片段的一种方法，由高温变性、低温退火及适温延长等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的dna得以快速扩增，具有特异性强、灵敏度高、操作简便、省时等特点。它不仅可用于基因分别、克隆和核酸序列分析等基础探讨，还可用于疾病的诊断或任何有dna,rna的地方。 化学合成法制备基因片段 采纳dna合成仪，对目的基因进行分段合成，然后进行连接，可以得到所需的目的基因。 二、 重组质粒的构建 dna体外重组是将目的基因在dna连接酶作用下，连接到合适的载体dna上，以便下一步转化之用。重组的dna分子是在dna
32、连接酶的作用下，有mg2 、atp存在的连接缓冲 系统中，将分别经酶切的载体分子与外源dna分子进行连接。连接反应的温度在37时 有利于连接酶的活性。但是在这个温度下粘末端的氢键结合是不稳定的。因此实行折中的温度，即1216，连接1216h，这样既可最大限度地发挥连接酶的活性，又兼顾到短暂配对结构的稳定。 三、重组分子的扩增和鉴定 重组dna分子导入受体细胞 目的基因和载体在体外连接形成重组dna分子后，须要被导入受体细胞中才能进行增殖和表达。受体细胞是重组基因增殖的场所，所以对受体细胞也应具有几点要求：简单接纳重组dna分子；对载体的复制扩增无严格限制；不存在特异的能降解外源dna的内切酶体
33、；不对外源dna进行修饰。一般将重组dna分子导入原核细胞的过程称为转化，而导入真核细胞的过程称为转染。将重组dna分子和感受态大肠杆菌细胞相混合，使重组dna分子进入大肠杆菌中，就可以实现重组dna分子的转化。 重组dna分子的鉴定 (本 来自.hr.c) 重组dna分子导入受体细胞后是否得到扩增，扩增后的重组dna分子是否正确，导入的重组dna分子是否含有正确的插入片段，重组dna分子能否表达插入的目的基因，一般可以采纳x-gal筛选的方法对重组dna分子进行鉴定。 四、试验中的留意事项 1、大肠杆菌液体培育基和固体筛选培育基制备： 1) 接种过程中，试管或三角瓶口等，也可通过火焰灼烧灭菌
34、。 2) 培育基、橡胶制品、塑料制品等不能运用干热灭菌。 3) 在加热过程中应不断搅拌，以防琼脂粉沉淀糊底烧焦，并应限制火力，以免培育基起泡而溢出容器。 4) 留意培育基分装时避开其沾污三角瓶口、试管口。 5) 严格根据高压蒸汽灭菌的灭菌指标对培育基、器皿灭菌，确保灭菌彻底。 2、大肠杆菌工程菌平板培育： 1) 划线分别时，挑菌量要小，严格无菌操作，避开环境中的杂菌污染。 2) 画线时接中环圈内不能有菌膜产生，会造成接种数过多，结果不明显。 3、pcr扩增目的基因片段： 1) pcr体系所加成分的实际用量，应依据试验者选用的该成分的终浓度及所拥有的贮备液浓度进行核算。 2) 加样时要仔细,吸头
35、垂直进入试剂管，每加完一样要换一个吸头，同时在已加的样品前做个记号以防止错加或漏加，避开污染。 3) taq聚合酶应最终加入，尽量削减室温接触机会。加酶时吸头深化不行过深，酶量不能过多。 4、回收目的基因与载体连接： 1) 留意调转速 2) 放开管盖放置 3) 向吸附膜中间位置悬空滴加30ul洗脱缓冲液te 4) 盖管盖，静置10min 5、大肠杆菌液体培育: 1) 接种环节应严格进行无菌操作。 2) 试验中要留意细菌的生长状态和密度，尽量运用对数生长期的细胞。密度过高或不足均会使转化率下降。菌体密度与震荡培育的转速亲密相关，依据测定的菌液od值调整培育时间。 3) 接种的试管、三角瓶等应做标
36、记，注明菌种、日期、组别、姓名等。 6、大肠杆菌感受态细胞制备及转化: 1) 全部操作均应在无菌条件和冰上进行。 2) 所运用的器皿必需经过灭菌。并且要防止迹量的去污剂或其它化学物质、杂菌、dna酶或杂dna所污染，否则会大大降低细菌的转化效率。 3) 留意转化的质粒 dna 的质量和浓度。当加入的外源dna的量过多或体积过大时，则会使转化率下降。以质粒为载体的重组分子而言，分子量大的转化效率低，大于30kb的重组质粒将很难进行转化。 4) 试验所用的溶液最用3次蒸馏水配制。 7、筛选重组转化菌落: 1) 在含有x-gal和iptg的筛选培育基上，携带载体dna的转化子为蓝色菌落，而携带插入片
37、段的重组质粒转化子为白色菌落，平板如在37培育后放于冰箱3-4小时可使显色反应充分，蓝色菌落明显。不是一起先就4，是等菌长出来之后。一般菌长出来就会有蓝色的了，4之后会进一步显色。 2) 当出现蓝斑较大，白斑很小附在四周，还有蓝白镶嵌的斑即卫星菌落的时候，可以当心挑取中间的那个菌落，有可能是阳性克隆。 3) 要留意培育时间不宜过长，出现阳性菌落就刚好处理，以12-16小时为宜。 4) 培育基中加抗生素的时候，温度不能高了，不烫手为宜，防止抗生素失效。 8、菌液pcr分析: 留意移液枪正确的运用方法，各种量程的调试，一般以接近最大量程的为准。 9、取大肠杆菌重组质粒dna和酶切分析 1) 质粒小
38、量提取试剂盒进行质粒的提取的第三步和第四步之间的时间，操作要流畅快速，确定了试验成败 2) 禁止吸出沉淀 五、总结 在分子生物学中，基因克隆是一种常用的技术。其中关键技术是dna重组技术，它利用酶学方法将不同来源的dna分子进行体外特异性切割，重新拼接组装成一个新的杂合dna分子。在此基础上将杂合dna分子转入肯定宿主细胞中进行扩增，形成大量的子代分子，此过程称基因克隆。有目的地通过基因克隆技术，人为操作改造基因，变更生物遗传性状的系列过程总称为基因工程。 基因工程是把双刃剑。假如不加节制的运用基因工程，让它去为你包治一百零一病，那样你的整体免疫系统也将发生错乱，让你完全可以抵抗的疾病访问造成
39、你的死亡。假如人们想造什么动物就造什么动物，让这些动物急速的泛滥，动物的天敌关系，人类的生态平衡都将被破坏，动物也将超过人类，霸占我们赖以生存的地球。而且，若是谁都想起死回生，我想终有一天我们将因为人口泛滥而灭亡。 基因工程学问一种让科技发展的手段，而不是我们的目的，我们要遵循自然规律，正确的对待基因工程，正确的对待生活。 第23页 共23页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页第 23 页 共 23 页