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1、2023届新高考生物备考复习发酵工程一、发酵1、概 念：指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产物的过程。2、对发酵的理解:必 修1中提到的发酵特指“微生物的无氧呼吸”，是狭义的发酵概念。这里的发酵特指微生物的代谢，而 代谢”并非仅指“呼吸作用”，还包括微生物的其他物质合成与分解过程，最重要的是不同微生物可以产生不同 的 酶，因而能利用原料产生不同的代谢产物。3、类型:根据是否需氧分为:需氧发酵（醋酸、谷氨酸、腐 乳）厌氧发酵（酒精、泡菜、酸 奶）根据培养基的物理性质不同分为：固体发酵、半固体发酵和液体发酵4、实 例：腐乳的制作蛋 白 质-蛰 詈-k小肽?旃
2、 菌 施 麻 隹i藤福i微生 物 整 起主要作用）脂 肪-甘油脂肪酶+氨基酸+脂肪酸毛塞是一种丝状真菌，其生殖方式为袍子生殖，代谢类型是异养需氧型。二、传统发酵技术1、概念直接利用原材料中天然存在的微生物，或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵，制作食品的技术。2、类 型：传统发酵以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主。3、特 点：操作简单、便于家庭式或作坊式生产（优 点）生产条件不易控制，容易受杂菌污染（缺 点）4、发 酵 食 品：腐乳、泡菜、果酒、果醋、酱、酱油、豆豉、酸奶、奶酪、米酒、面包、馒头等。三、尝试制作传统发酵食品1、传统发酵常见菌种（1 ）乳酸菌代谢特点：厌
3、氧细菌，代谢类型为异养厌氧型;在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸。发酵原理（反应简式）C6H12。6 上 2c3H6。3+能量生产应用：可用于乳制品的发酵、泡菜的腌制等。分布：广泛分布于空气、土壤、植物体表、人或动物的肠道内。常见类型：乳酸链球菌和乳酸杆菌。（2）酵母菌代谢特点：单细胞真菌，代谢类型为异养兼性厌氧型；在无氧的情况下能进行酒精发酵发酵原理（反应简式）梅c 6 H l 2。6”2 c 2 H 5 )H+2 C O 2+能最生产应用：可用于酿酒、制作馒头和面包等。影响因素：温度是影响酵母菌生长的重要因素，酿酒酵母的最适生长温度约为28o分布：在一些含糖量较高的水果、蔬菜表面。(3 )
4、醋酸菌代谢特点：好氧细菌，代谢类型为异养需氧型；当。2、糖源都充足时，能将糖分解成醋酸；当缺少糖源时则将乙醇转化为乙醛，再将乙醛变为醋酸。多数醋酸菌的最适生长温度为30-35o发酵原理(反应简式)C6Hl2。6+201-2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量C2H5 OH+Ch 舞f CH3coOH+H2O+能量(4)小结菌种名称生物分类代谢as繁殖发酵对氧的需求乳酸菌原核生物 异养厌氧1 8 2 0 二分裂密闭不需氧酵母菌真核生物兼性厌氧L 8 3 0 出芽生殖前期需氧，后期不需氧醋酸菌原核生物 异养需氧3 0 3 5 二分裂一直需氧2、制作传统发酵食品(1)泡菜的制作1 )原理：利用植
5、物体表面天然的乳酸菌发酵(种类较多）b发 酵 期 间，乳 酸 不 断 积 累，当乳酸的质百分 比 为0.4%0.8%时，泡菜品质、口味最佳。2）条 件：无 氧；182（TC（室 温），根据室温控制发酵时 间，严格控制无氧条件。3）操作流程用清水和食盐配制质量百分比为5%-20%的 盐 水，并将盐水煮 沸，冷却待用；原料处理、蔬菜装坛加 盐 水 一封坛发酵将新鲜蔬菜 洗 净，切成块状或条 状，混合 均 匀，晾干后装入泡菜坛内；装至半 坛 时，加入蒜瓣、生姜及其他香 辛 料，继续装至;至满;将冷却好的盐水缓缓倒入坛中使盐水没过 菜 料，盖好坛盖向坛盖边缘的水槽中注满水，并在发酵过程中注意经常向水槽
6、中补 充 水；根据室内温度控制发酵时间；4）结果分析：选择新鲜蔬菜的原因：新鲜蔬菜中亚硝酸盐少、营养丰富盐水的作用：杀菌、析出蔬菜水分、调味盐水浓度要合适的原因：过 高，乳酸发酵将受抑制，泡菜风味差；过 低，杂菌易繁殖，导致泡菜变质煮沸的作用：杀 菌，去除水中的溶解氧冷却的目的：保证乳酸菌等微生物的生命活动原料不能削皮原：泡菜利用的是原料表面的乳酸菌将菜装至八成满的原因：在泡菜发酵初期，由蔬菜表面带入的大肠杆菌、酵母菌等较为活跃，它们可进行发酵，发酵产物中有较多的C02,如果泡菜坛装得太满，发酵液可能会溢出坛外；另 外，泡菜坛装得太满，会使盐水不太容易完全淹没菜料，从而导致坛内菜料变质腐烂；同
7、时留有一定空间，也更方便拿取泡菜。使盐水没过全部菜料的原因：防止菜料腐烂变质泡菜制作过程中，除乳酸菌外，还有一些酵母菌和大肠杆菌在起作用。用水密封泡菜坛的目的：给泡菜坛内创造无氧环境,严格控制厌氧条件。制作泡菜往往要加入一些白酒的作用：白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长，它也是一种调味剂，可增加醇香感。怎样创造无氧条件？选择气密性好的泡菜坛；盐水煮沸冷却待用；装坛压实，盐水没过全部菜料；盖好盖后，沿水槽注满清水，且经常补水。5）泡菜腌制中乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的变化发酵时期乳酸菌乳酸亚硝酸盐发酵前期少（O抑制乳酸菌活动）少增 加（硝酸盐还原菌的作 用）发酵中期最 多（乳酸积累，抑制其他菌活动）增多达
8、到最多后开始下降（硝酸盐还原菌受抑制，部分亚硝酸盐被分解）发酵后期减 少（乳酸积累一pH下 降，抑制乳酸菌活M L蓑续增多，最下降至保持相对稳定（硝酸盐还原菌被完全抑制）变化曲线乳酸菌乳酸L厂，亚硝酸盐发酵时间发酵时间发 酵 时 间泡菜制作过程中影响亚硝酸盐含的因素有哪些？温度过高,食盐不足，腌制时间过短会使细菌污染、大繁殖后，会导致亚硝酸盐含增加。（2）果酒的制作1 ）原 理：新鲜水果表面附着有不同类型的野生酵母菌,在有氧条件下，酵母菌可以大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌可以将葡萄糖转变为酒精。2）条 件:18303）操作流程发酵时间:1512天4）结果分析:体积分数为70%的酒精的作用是：消
9、毒。冲洗的目的是：去除表面灰尘、污物。冲洗12次即可，不能连续冲洗的原:防止果皮表面的野生菌种数减少，影响发酵。去梗前冲洗的原因：避免葡萄破损，减少被杂菌污染的机会葡萄汁装入发酵瓶时，留有1/3空间的原a、先让酵母菌进行有氧呼吸，快速繁殖，耗 尽。2后，再进行酒精发酵；b、防止发酵过程中产生的CO2造成发酵液溢出。每隔12h左右将瓶盖拧松一点的目的：排出气体。拧松但不打开的目的：防止杂菌污染。在制作果酒的过程中，除了酵母菌，是否还有其他微生物生长？它们会对果酒发酵产生影响吗？如果有，如何避免这种影响？（还有一些乳酸菌和醋酸菌；乳酸菌能将糖分解为甘油、酒石酸等，从而使果酒变质，而在有氧的情况下，
10、醋酸菌能把糖分解成醋酸或者把乙醇转化为乙醛进而转化为醋酸。可以通过调节发酵的温度、pH等来控制乳酸菌含量;可以通过减少。2含量、调节发酵温度、pH来控制醋酸菌含检测果酒产生：闻、品尝、用酸性条件下的重锚酸钾溶液检测(橙色一灰绿色x果酒制作过程中，在不灭菌的情况下，酵母菌成为优势菌种的原因：发酵后期在缺氧和酸性发酵 液 中，绝大多数微生物的生命活动受到抑制，而酵母菌可以适应这一环境成为优势菌种。温度是183(TC,而不是一个确定的值的原因：多种酵母菌同时发酵。如果密封不严会变酸的原：醋酸菌大量繁殖的结果。在果酒制作过程中往往会出现“先来水、后来酒”的 现 象,原 因 是：前期酵母菌进行有氧呼吸产
11、生了水，后期酵母菌进行无氧呼吸才产生酒精。果酒制作过程中酵母菌数量和酒精浓度的变化：酵母菌先增加后趋于稳定，发 酵 后 期 数,减 少，酒精浓度先增加后趋于稳定-酒精浓度酵母菌数量 M N P发酵时间（3）果醋的制作1 ）原 理：空气中或人工接种的醋酸菌在有氧条件下,将酒精转变为醋酸，当糖源充足时，醋酸菌还可以将葡萄糖直接分解为醋酸。2）条 件：30 35 发酵时间：7-8天 氧气充足3）操作流程4）结果分析:在制作果醋的过程中，酵母菌不会继续发酵的原因:随着醋酸发酵的进行，发酵液的pH、发酵温度等均不利于酵母菌的生长繁殖，因此酵母菌活性很低，不会继续发酵。醋酸菌的来源：打开瓶盖后，空气中的醋
12、酸菌会进入果酒发酵液中大繁殖，其他的菌因不适应环境条件（不能利用乙醇）而不能繁殖。工业上加快果醋制作的措施：在工业上，后期醋的发酵需要人工接种醋 酸 菌；或者买一瓶醋，将其打开暴露于空气中，一段时间后在醋的表面会有一层薄膜（即醋酸菌膜），用这层薄膜进行接种亦可。在制作果酒和果醋的过程中，发酵液分别有哪些变化？其中最明显的变化发生在发酵后多少天？引起变化的原是什么？a.在葡萄酒的制作过程中，发酵液会产生气泡，这是为酵母菌发酵产生了 C02；b.开始发酵后，C02产生越来越多，会使发酵液出现“沸腾”现 象，在发酵的10天后，这种现象最明显；c.发酵过程产热，会使发酵液温度上升，应注意控温；d.发酵
13、过程中，由果皮进入发酵液的花青素会越来越多,而发酵液的颜色会逐渐加深变成深红色9e.果醋发酵完成后，发酵液的液面上会出现一层菌膜，即醋酸菌膜；在果酒和果醋制作中，哪些做法可防止发酵液被污染？a.发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精清洗干净，并用体积分数为70%的酒精消毒，晾干备用；b.处理葡萄时应先冲洗再去除枝梗；c.排气时只需拧松瓶盖，不要打开瓶盖检测果醋的发酵情况的方法：a.闻；b.品尝；c,使用pH试纸检测检测和比较发酵前后的p H 值；d.观察醋酸菌膜是否形成。5）果酒发酵与果醋发酵的比较果酒发酵果醋发酵发酵菌种酵母菌醋酸菌菌种来源附着在新鲜水果果皮表面的野生酵母菌空气中的醋酸菌或人工接种的醋
14、酸菌菌种代谢类型异养兼性厌氧型异养需氧型菌种生物类型真核生物原核生物发酵原理-Ji-=-eovia1soim|C J HM iIA-=-*2C,I I.（H I（M M）灌 管aani NH3（细菌生长的氮源）3H2N编号成分(NH4)7SO4KH?PO4FeSO4CaCI,HQ含量0.4 g4.0 g0.5 g0.5 g100 mL该选择培养基为液体培 养 基，可用于筛选自养型微生物(利用空气中的C02),若用该培养基来分离尿素分解菌,应去除成分，加入尿素和不含氮的有机物。(二)选择培养与计数1g 土壤中有多少能分解尿素的细菌？分离：获得分解尿素的细菌的纯培养物计数：测定分解尿素的细菌的数量
15、稀释涂布平板法(1)稀释涂布平板法的概念将菌液进行一系列梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基的表面，进行培养。注 意：当样品的稀释度足够 高 时,培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。(2)两个基本操作：梯度稀释和涂布平板(3)稀释涂布平板法操作过程梯度稀释铲取土样，将样品装入纸袋中注 意：取土样用的小铁铲和盛土样的的纸袋在使用前都要灭菌ImL1mL1 x107 1 xIO61x105 1乂1。41 x103 1 x102J J1 x1090mL）无菌水91nL无菌水取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。将10g 土样加入盛有90mL无菌
16、水的锥形瓶中,充分摇匀，制成菌液。涂布平板将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。注 意：多余的酒精在烧杯中满尽,然后再放在火焰上 灼 烧。107 1 06 1 06 1 04 103 1 021 I 1 091nL无菌水取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。将涂布器放在火帽上灼烧,待酒精燃尽、涂布器冷却后,再进行涂布。用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。注 意：各浓度分别涂布3个 平 板（重复实脸）菌落培养待涂布的菌液被培养基吸收后,将平板倒置，放入3037的恒温培养箱中，培养12d。特 别 注 意：1、10g 土样加入盛有90mL无菌水中后，已稀释10倍,再 计 算
17、时，不要忽略。2、细菌一般 选 用104、105、106稀释倍数的菌液进行涂布培养。3、由于使用的是选择培养基，所以一般情况下，获得的单菌落即目的菌，但因为有些微生物可以利用目的菌的代谢产物来生长繁殖，所以还需要进一步验证。4、过程中所有操作都应在酒精灯火焰旁进行;5、将涂布器从酒精中取出时，要让多余的酒精在烧杯中滴尽，然后再放在火焰上灼烧；不要将过热的涂布器放在盛有酒精的烧杯中，以免引燃酒精。(4)微生物的数量测定稀释涂布平板法间接计数法显微镜直接计数法直接计数法1 )方 法1 :稀释涂布平板法原理：当样品的稀释度足够 高 时,培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过计数
18、平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。要求：A、选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证获得菌落数为30-300、适于计数的平板。B、同一稀释度至少对3 个平板进行重复计数,然后求平均 值;(分析实验结果时，要考虑重复组结果是否接近，如果相差太大，意味着操作有误，需重新实验。)计算公式：每克(或每mL)样品中的菌落数=(C+V)XMC 代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V 代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL),M 代表稀释倍数。统计的结果一般用菌落数而不是活菌数表示。缺点：统计 的 整 数往往比通董的实际数目少【原 因：当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌
19、落】醺 计 数 板：对细菌等较小的细胞进行观察和计数；每毫升原液所含细菌数=每小格平均细菌数*400 x104x稀释倍数优 点：快速、直观缺 点：不能区分死菌和活菌-结果偏大不适于对运动细菌的计数。个体太小的细菌在显微镜下难以观察。主要方法稀释涂布平板法平板划线法主要步骤系列梯度稀释操作和涂布平板操作接种环在固体培养基表面连续划线接种工具涂布器接种环菌体获取从适宜稀释度的平板上的菌在具有显著的菌落特征的区域落中挑取菌体挑取菌体能否用于计数可以计数，但是操作复杂，需涂布多个平板不能计数都能将微生物分散到固体培养基表面，以获得单细胞菌落,达到分离纯化微生物的目的，也可以观察菌落特征。八、探究实 践
20、：土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1、实验目的(1)从土壤中分离出能够分解尿素的细菌(2)统计每克土壤样品中究竟含有多少这样的细菌2、实验原理绝大多数微生物都能利用葡萄糖，但是只有能合成服酶的微生物才能分解尿素。利用以尿素作唯一氮源的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。3、实验设计利用以“尿素作为唯一氮源”的选择培养基，可以从土壤中分离出分解尿素的细菌。同时配制基础培养基(牛肉膏、蛋白陈培养基)作为对照组，来判断选择培养基是否具有选择作用。若基础培养基或完全培养基中生长的菌落数菌多于该选择培养基，则该选择培养基具有选择性。培养基一牛肉膏5.0 g蛋白陈1 0.0 gN a C I5.
21、0 g琼脂2 0.0 g蒸博水定容到1 0 0 0 m I培养基二KH2P O41.4gIwan2ru42.1gteS04 7H2(0.2g葡荀檐10.0g尿素CO%)21.0g琼脂15.0g蒸憎水定容到1000ml4、操作步骤取样地点要求：酸碱度接近中性的潮湿土壤1 ）土 壤 取 样 取样过程：铲 去 表 土（一般3 c m左 右）,注意事项：铁铲和取样袋在使用前都要灭菌；事毕洗手。中 士 什.小 选择培养基*以尿素为唯一氮源2）配制培养基 完 全 培 养 基（如牛肉膏蛋白陈培养基）作为对照，来判断选择培养基是否具有选择作用3）样品的稀释与涂布平板103104MMQ10,选择培养基（平行重复
22、）I。土 样 勰 梦1尊 一2*-0 7 V9 mL无 菌水已3牛肉膏蛋白陈培养基4（作为对照）105105B 组106一f 修C 组107107107-O.O一Of D 组3组已接种的选择培养基：对土壤中分解尿素的细菌分离和计数；可分离得到单菌落。1组已接种的牛肉膏蛋白陈培养基：判断选择培养基是否具有选择作用；可得到多种菌落。未接种的选择培养基:验证选择培养基中是否含有杂菌；无菌落。_ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _ _未接种的牛肉膏蛋白陈培养基：验证牛肉青蛋白陈培养基中是否含有杂菌;无菌落。4）微生物的培养与观察培养条件：不同种类的微生物，往往需要不同的培养温度和培养时间。*细
23、菌一般在3 0-3 7 C的温度下培养2 d观察：每隔2 4 h统计一次菌落数目，选取数目稳定时的记录作为结果。*防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目一般来说，在相同的培养条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征,如形状、大小和颜色等。5、尿素分解菌的鉴定(1)原理：在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂。培养某种细菌后，如果pH升高,指示剂将变红，说明该细菌能够分解尿素。CO(NH2)2+H2OCO2+2NH3 呈 成性，遇酚红指示剂呈红色。时M阳性6、选择培养基与鉴别培养基的区别项目邮 培 养 基鉴别培养基原理加入不影晌甚至促进目标微生物生长，而抑制或阻止其他种类微生物生长的化学物质加
24、入某种指示剂或化学药品（不影响微生物正常生长），使微生物的臬种代谢产物与培养基中的特定指示剂或化学药品发生反应用途培养、分离出目标微生物鉴别目标微生物举例培养酵母菌和霉菌时，可在培养基中加入青霉素，抑制细菌的生长；利用以尿素为唯一包源的培养基来培养可分解尿素的细菌可用伊红美蓝培养基鉴定饮用水或乳制品中是否含有大肠杆菌（若有，则菌落呈黑紫色，且带有金属光泽）图示.巴汉尿素分解葭用清水浸泡48h,切半放入加淀粉的琼脂平板。放入种子6h后,用碘液冲洗平板。用赤霉素溶液浸泡4 8 h,切半放入加淀粉的琼脂平板。九、发酵工程的基本环节发酵罐内发酵1、选育菌种1）目的：获得性状优良的菌种。2）菌种来源：从
25、自然界中筛选、诱变育种（产生的是常规 菌，生产微生物自身能合成的产品，如青骞素x基因工程、细胞工程定向育种（产生的是工程菌，生产微生物自身不能合成的产品，如胰岛素）3）菌种选育的重要性（意 义）优良的菌种不仅具有健壮，不易退化，其发酵产品的产高、质稳定等优点，它往往还会赋予发酵产品独特的风味，因此菌种选育环节在很大程度上决定了生物发酵产物的成败4）实例筛选产酸量高的黑曲霉用来生产柠檬酸；使用基因工程改造的啤酒酵母，加速发酵、缩短生产周期2、扩大培养1）目 的：获得更多的菌种。2）原：工业发酵罐的体积一般较大此，需要接入的菌种总体积大。3）扩大培养的培养基：一般为液体培养基。3、培养基的配制、灭
26、菌1 ）配制要求在菌种确定之后（结合菌种代谢特点）选择原料制备培养基;在生产实践中，培养基的配方要经过反复试验才能确 定（即不断优化培养基）;2）灭菌原发酵工程种所用的菌种大多是单一 菌 种，一旦有杂菌污 染，可能导致产大大降低。如在青霉素生产过程中如果污染了杂菌，某些杂菌会分泌青骞素酶将青霉素分解掉。培养基和发酵设备都必须经过严格的灭菌4、接种将扩大培养后的菌种投放到发酵罐中5、发酵罐内发酵1 ）地 位：发酵工程的中心环节2）要 求：发酵过程中，要随时检测培养液中微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程；要及时添加必需的营养物质，要严格控制温度、pH、溶氧等发酵条件。3）严格控制发酵条件的原因
27、环境条件不仅会影响微生物的生长繁殖，而且影响微生物代谢物的形成；严格控制发酵条件，有利于使发酵全过程处于最佳状态4）不同发酵条件的影响实例一谷氨酸发酵在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸在酸性条件下容易生成谷氨酰胺和N-乙酰谷胺酰胺5）发酵容器：发酵罐A1培养物或营养物质的加入口B1观察孔 W lD l排个管C3pH 计 B3A 3那门B5温度传感器C l冷却水稣 口B2取 样 管 工8放料管A2冷却水排出口 C2冷却夹层-$生物传感器装置B4发酵罐O 口 A4装置编号主要用途A1-A3控制培养物以T M 1 S A、流出发酵罐，实现连续培养A4控制溶解氧B1-B5通过肉眼观察、仪器检测等监控发酵
28、条件以及发酵过程，B2处抽取样品壮 告 检 测。C l、C2通过控制冷水流速调节罐温C3调节.压D I、D2电 机 帆 班 制 进 行 蝌，使微生物与发酵液混合均匀，加快氧气溶解以及散热.6）现代发酵工程使用的发酵罐的优点均有计算机控制系统，能对发酵过程中的温度、pH、溶氧、罐压、通气、搅拌、泡沫和营养等进行监测和控 制，还可以进行反馈控制，使发酵全过程处于最佳状态。6、产品的分离、提纯1 ）目的：获得产品2）产品的两种形式：微生物细胞本身 代谢产物3）采取手段发酵产品是微生物细胞本身时，可在发酵结束之后,采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥发酵产品是代谢物时，可根据产物的性质采取适当的提取、
29、分离和纯化措施（如蒸储、萃取、离子交换等）来获得产品。十、发酵工程的应用1、在食品工业上的应用（1 ）生产传统的发酵食品实例1生产酱油黑曲霉,蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸淋洗、调制实例2酿酒令物楸果|酿酒-酵母 情I-阖-1啤酒的工业化生产流程：原料：大麦、酵母菌过 程：1 ）发 芽：大麦种子释放淀粉酶2）焙烤：加热杀死种子胚，但不使淀粉酶失活，减少胚发育时有机物的消耗3）碾 磨：使麦芽磨碎，便于糖化4）糖 化：在淀粉酶的作用下，分解淀粉形成葡萄糖5）蒸煮：加入啤酒花这种植物，改良啤酒风味、质和防腐，同时高温灭菌、终止酶的进一步作用6)发 酵：冷却后，加入酵母菌进行发酵，发酵过程分为主发酵和
30、后发酵两个阶段，主发酵完成酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成；后发酵阶段需要低温、密 闭，以使二氧化碳溶于啤酒中。7)消 毒：杀死大多数微生物，但不是全部,公此，啤酒有保质期8)终 止：过滤、调节、分装啤酒出售(2)生产食品添加剂实例1 一 柠 檬 酸柠檬酸是一种食品酸度调节剂；可以通过黑曲霉的有氧发酵制得；实例2味精谷氨酸经过一系列处理就能制成味精；由谷氨酸棒状杆菌经有氧发酵可以得到谷氨酸；(3)生产酶制剂常见酶制剂a淀粉酶、B淀粉酶、果胶酶、氨基肽酶、脂肪酶酶制剂应用食品的直接生产、改进生产工艺、简化生产过程、改善产品的品质和口味、延长食品储存期和提高产品产量等；酶制剂来源少数由动
31、植物生产；绝大多数通过发酵工程生产;2、在医药工业上的应用(1)采用基因工程的方法，将植物或动物的基因转移到微生物中，获得具有某种药物生产能力的微生物。利用经过基因改造的微生物生产生长激素释放抑制激素利用基因工程改造的微生物生产疫苗。将病原体的苗的生产。某个或某几个抗原基因转入适当的微生物细胞，获得的表达产物就可以作为疫苗使用。如某种乙肝疫(2)直接对菌种进行改造，再通过发酵技术大生产所需要的产品。如：青霉素高产菌株的培育通过诱变青骞菌发酵生产青霉素(3)未来还可能利用微生物生产过去只能从植物中分离提取的紫杉醇、青蒿素前体等化合物。3、在农牧业上的应用(1)生产微生物肥料(2)生产微生物农药(3)生产微生物饲料原理微生物含有丰富的蛋白质，且繁殖速度快实例1单细胞蛋白以淀粉或纤维素的水解液、制糖工业的废液等为原料,通过发酵获得了大的微生物菌体，即单细胞蛋白。单细胞蛋白应用：食品添加剂、微生物饲料；实例2.乳酸菌在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，动物食用后还能提高免疫力。4、在其他方面的应用(1)解决资源短缺与环境污染问题随着对纤维素水解研究的不断深入，利用纤维废料发酵生产酒精、乙烯等能源物质已取得成功(2)将极端微生物应用于生产实践例如嗜热菌、嗜盐菌可以用来生产洗涤剂，嗜低温菌有助于提高热敏性产品的产量。