《2023年高考生物二轮复习讲义江苏专版：第一部分 七生物技术实践.pdf》由会员分享，可在线阅读，更多相关《2023年高考生物二轮复习讲义江苏专版：第一部分 七生物技术实践.pdf（63页珍藏版）》请在taowenge.com淘文阁网|工程机械CAD图纸|机械工程制图|CAD装配图下载|SolidWorks_CaTia_CAD_UG_PROE_设计图分享下载上搜索。
1、专 题 七 I 生 物 技 术 实 践 点 清 二 线 明;；面 广 三 专 题 主 干 知 识 整 合 建 议 学 前 理 一 理，平 时 翻 一 翻，考 前 忆 一 忆 理 清 知 识 联 系 果 酒 和 果 醋 的 制 作 原 理、流 程 传 统 发 酵 技 术 腐 乳 的 制 作 原 理、流 程 的 应 用 微 生.物 的 培 养、分 需 与 计 数 传 统 发 酵 技 术 的 应 用 培 养 其、无 菌 技 术 微 生 物 的 培 养 平 板 划 线 法、稀 和 涂 布 平 板 法 与 应 用 专 题 学 什 么 高 考 考 什 么 微 生 物 的 利 用 和 生 物 技 术 在 食
2、 品 加 工 中 的 应 用 生 物 技 术 在 其 他 方 实 面 的 践 应 用 专 题 学 什 么 DNA的 粗 提 取 与 鉴 定 探 究 加 施 洗 衣 粉 的 洗 涤 效 果 酵 母 细 胞 的 固 定 化 DNA的 粗 提 取 与 鉴 定 高 考 考 什 么 牌 的 应 用 生 物 技 术 记 清 主 干 术 语 1.制 作 果 酒、果 醋、腐 乳、泡 菜 利 用 的 微 生 物 分 别 是 酵 母 菌、醋 酸 菌、毛 霉（主 要）和 乳 酸 菌，异 化 作 用 类 型 分 别 是 兼 性 厌 氧 型、需 氧 型、需 氧 型、厌 氧 型。2.制 作 果 酒 和 果 醋 的 实 验
3、 流 程：挑 选 葡 萄 一 冲 洗 一 榨 汁 一 酒 精 发 酵 一 醋 酸 发 酵。3.制 作 果 酒 和 果 醋 的 发 酵 装 置 中 充 气 口 的 作 用 是 在 醋 酸 发 酵 时 连 接 充 气 泵 进 行 充 气，排 气 口 是 在 酒 精 发 酵 时 排 出 JCQz,出 料 口 用 来 取 柱。4.制 作 果 酒 时 温 度 一 般 控 制 在 比 洛 S，时 间 为 1也;114,前 期 需 氧 后 期 丕 需 氧;制 作 果 醋 时 温 度 控 制 在 3。35，时 间 为 h8 d,始 终 需 氧。5.毛 霉 等 微 生 物 产 生 的 蛋 白 酶 能 将 豆 腐
4、 中 的 蛋 白 质 分 解 成 小 分 子 的 肽 和 氨 基 酸，脂 肪 酶 可 将 脂 肪 水 解 为 甘 油 和 脂 肪 酸。6.腐 乳 制 作 的 实 验 流 程：让 豆 腐 上 长 出 毛 霉 一 加 盐 腌 制 一 加 卤 汤 装 瓶 一 密 封 腌 制。7.加 盐 腌 制 时 间 约 为 左 右，配 制 卤 汤 中 的 酒 的 含 量 一 般 控 制 在 12%左 右。8.用 盐 腌 制 时，注 意 控 制 盐 的 用 量：盐 的 浓 度 过 低，缺 乏 以 抑 制 微 生 物 的 生 长,可 能 导 致 豆 腐 腐 败 变 质；盐 的 浓 度 过 高 会 影 响 腐 乳 的
5、口 味。食 盐 的 作 用：抑 制 微 生 物 的 生 长，防 止 腐 败 变 质；析 出 水 分,使 豆 腐 变 硬，在 后 期 制 作 过 程 中 不 易 酥 烂；调 味 作 用，给 腐 乳 以 必 要 的 咸 味；浸 提 毛 酶 菌 丝 上 的 蛋 白 酶。9.配 制 卤 汤：卤 汤 直 接 关 系 到 腐 乳 的 色、香、味。卤 汤 是 由 酒 及 各 种 香 辛 料 配 制 而 成 的。酒 的 作 用：防 止 杂 菌 污 染 以 防 腐；与 有 机 酸 结 合 形 成 酯，赋 予 腐 乳 风 味；酒 精 含 量 的 上 下 与 腐 乳 后 期 发 酵 时 间 的 长 短 有 很 大
6、关 系，酒 精 含 量 越 高，对 蛋 白 酶 的 抑 制 作 用 也 越 大，使 腐 乳 成 熟 期 延 长；酒 精 含 量 过 低，蛋 白 酶 的 活 性 高，加 快 蛋 白 质 的 水 解，杂 菌 繁 殖 快，豆 腐 易 腐 败，难 以 成 块。10.微 生 物 培 养 基 的 成 分 一 般 包 括 水、无 机 盐、碳 源、氮 源 及 生 长 因 子 等。11.消 毒 指 使 用 较 为 温 和 的 物 理 或 化 学 方 法 杀 死 物 体 外 表 或 内 部 的 局 部 微 生 物（不 包 括 芽 抱 和 抱 子）。灭 菌 则 是 指 使 用 强 烈 的 理 化 因 素 杀 死 物
7、 体 内 外 所 有 的 微 生 物，包 括 芽 胞 和 泡 子。12.制 备 固 体 培 养 基 的 步 骤 包 括 计 算、称 量、溶 化、灭 菌、倒 平 板 等。13.纯 化 微 生 物 常 用 的 接 种 方 法 有 平 板 划 线 法 和 稀 释 涂 布 垩 板 法，平 板 划 线 法 可 以 别 离 微 生 物 但 不 能 对 微 生 物 进 行 让 数，稀 释 涂 布 平 板 法 既 可 别 离 微 生 物 也 可 以 对 微 生 物 进 任 计 数。14.平 板 划 线 法 是 通 过 接 种 环 在 琼 脂 固 体 培 养 基 外 表 连 续 划 线 的 操 作，将 聚 集
8、的 菌 种 逐 步 稀 释 分 散 到 培 养 基 的 外 表。在 数 次 划 线 后 培 养，可 以 别 离 到 由 一 个 细 胞 繁 殖 而 来 的 肉 眼 可 见 的 子 细 胞 群 体，这 就 是 菌 落。15.稀 释 涂 布 平 板 法 是 将 菌 液 进 行 一 系 列 的 梯 度 稀 释，然 后 将 不 同 稀 释 度 的 菌 液 分 别 涂 布 到 琼 脂 固 体 培 养 基 的 外 表，进 行 培 养。分 为 系 列 稀 费 操 作 和 涂 布 里 板 操 作 两 步。16.对 于 频 繁 使 用 的 菌 种，可 以 采 用 临 时 保 藏 的 方 法。对 于 需 要 长
9、期 保 存 的 菌 种，可 以 采 用 甘 油 管 藏 的 方 法。17.DNA在 不 同 浓 度 的 NaCl溶 液 中 溶 解 度 不 同，在 浓 度 0JL 4取 皿&的 NaCl溶 液 中 溶 解 度 最 低。18.DNA不 溶 于 酒 精 溶 液，但 细 胞 中 的 某 些 蛋 白 质 可 溶 于 酒 精,可 利 用 冷 却 的 酒 精 对 提 取 的 DNA进 行 纯 化。19.在 鸡 血 细 胞 液 中 参 加 一 定 量 蒸 储 水 并 用 玻 璃 棒 搅 拌，过 滤 后 收 集 滤 液，可 获 取 含 DNA的 滤 液；切 碎 洋 葱，参 加 一 定 量 洗 涤 剂 和 食
10、盐，搅 拌 研 磨，过 滤 后 收 集 滤 液，可 获 取 含 DNA的 滤 液。20.处 理 植 物 组 织 时 需 要 进 行 研 磨，其 目 的 是 破 碎 细 胞 壁，使 核 物 质 容 易 溶 解 在 NaCL溶 液 中；研 磨 不 充 分 会 使 DNA的 提 取 量 减 少,影 响 实 验 结 果，导 致 看 不 到 丝 状 沉 淀 物、用 二 差 胺 鉴 定 不 显 示 蓝 色 等。21.用 二 苯 胺 鉴 定 D N A,在 沸 水 浴 的 条 件 下 呈 现 蓝 色。22.目 前 常 用 的 加 酶 洗 衣 粉 的 酶 制 剂 有 四 类：蛋 自 醒、崩 肪 醵、淀 粉 酶
11、 和 纤 维 素 酶，其 中，应 用 最 广 泛、效 果 最 明 显 的 是 碱 性 蛋 自 醵 和 碱 性 脂 肪 蹶 23.探 究 加 酶 洗 衣 粉 与 普 通 洗 衣 粉 洗 涤 效 果 的 实 验 自 变 量 是 洗 衣 粉 的 种 类;探 究 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤 的 最 正 确 温 度 条 件 实 验 的 自 变 量 是 水的 温 度。24.一 般 来 说，酶 更 适 合 采 用 化 学 结 合 和 物 理 吸 附 法 固 定，而 细 胞 多 采 用 包 埋 法 固 定 化。这 是 因 为 细 胞 个 大，而 酶 分 子 很 小；个 大 的 难 以 被 吸 附 或 结 合，
12、而 个 小 的 酶 容 易 从 包 埋 材 料 中 漏 出。25.酵 母 细 胞 固 定 化 的 步 骤：酵 母 菌 的 活 化 一 配 制 CaCL溶 液 一 配 制 海 藻 酸 钠 溶 液 一 海 藻 酸 钠 溶 液 与 酵 母 菌 细 胞 混 合 f 固 定 化 酵 母 细 胞。26.如 果 制 作 的 凝 胶 珠 颜 色 过 浅、呈 白 色，说 明 海 藻 酸 钠 的 浓 度 偏 低，固 定 的 酵 母 细 胞 数 目 较 少；如 果 形 成 的 凝 胶 珠 不 是 圆 形 或 椭 圆 形，则 说 明 海 藻 酸 钠 的 浓 度 偏 高，制 作 失 败，需 要 再 作 尝 试。澄 清
13、思 维 误 区 关 注 点 1 误 认 为 兼 性 厌 氧 与“有 氧、无 氧 都 一 样 澄 清 酵 母 菌 在 有 氧 条 件 下 进 行 有 氧 呼 吸，大 量 繁 殖；在 无 氧 条 件 下，进 行 无 氧 呼 吸 产 生 酒 精 和 C O2,产 生 的 酒 精 对 其 他 微 生 物 和 酵 母 菌 本 身 都 具 有 毒 害 作 用，所 以 在 无 氧 条 件 下 酵 母 菌 不 能 大 量 繁 殖。关 注 点 2 误 认 为 酿 酒 和 酿 醋 所 利 用 的 微 生 物 相 同 澄 清 酿 酒 和 酿 醋 所 利 用 的 微 生 物 不 同，前 者 为 酵 母 菌 真 核 生
14、 物；后 者 为 醋 酸 菌 原 核 生 物。二 者 本 质 区 别 是 有 无 以 核 膜 为 界 限 的 细 胞 核。关 注 点 3 不 明 确 腐 乳 前 期 发 酵 和 后 期 发 酵 的 作 用 澄 清 前 期 发 酵 的 主 要 作 用 是 创 造 条 件 让 毛 霉 生 长，使 毛 酶 形 成 菌 膜 包 住 豆 腐 使 腐 乳 成 型。后 期 发 酵 主 要 是 酶 与 微 生 物 协 同 参 与 生 化 反 响 的 过 程，即 通 过 各 种 辅 料 与 腐 乳 的 缓 慢 水 解 作 用，生 成 腐 乳 的 香 气。关 注 点 4 误 认 为 腐 乳 制 作 中 食 盐 的
15、 作 用 只 是 调 节 风 味 澄 清 食 盐 在 腐 乳 制 作 中 的 作 用 有：析 出 豆 腐 中 的 水 分，有 利 于 豆 腐 块 成 形；抑 制 杂 菌；形 成 腐 乳 的 风 味；杀 死 毛 霉 等 微 生 物，有 利 于 菌 体 内 蛋 白 酶、脂 肪 酶 等 发 挥 作 用。关 注 点 5 不 明 确 影 响 腐 乳 口 味 的 因 素 有 哪 些 澄 清 影 响 腐 乳 口 味 的 因 素 有：豆 腐 的 含 水 量；盐 的 用 量;酒 的 用 量；香 辛 料 的 种 类 和 用 量；其 他 辅 料 的 种 类；发 酵 温 度 和 时 间。关 注 点 6 不 能 区 分
16、 选 择 培 养 基 和 鉴 别 培 养 基 澄 清 按 照 培 养 基 的 用 途，可 将 培 养 基 分 为 选 择 培 养 基 和 鉴 别 培 养 基。选 择 培 养 基 是 指 在 培 养 基 中 参 加 某 种 化 学 物 质，以 抑 制 不 需 要 的 微 生 物 生 长，促 进 所 需 要 的 微 生 物 的 生 长。如 在 某 培 养 基 中 参 加 青 霉 素，则 能 抑 制 细 菌 的 生 长，对 真 菌 的 生 长 无 影 响。鉴 别 培 养 基 是 根 据 微 生 物 的 特 点，在 培 养 基 中 参 加 某 种 指 示 剂 或 化 学 药 品 配 制 而 成 的，用
17、 以 鉴 别 不 同 类 别 的 微 生 物。如 伊 红 美 蓝 培 养 基 能 指 示 大 肠 杆 菌 的 存 在。关 注 点 7 平 板 冷 凝 后，不 明 确 平 板 倒 置 的 目 的 澄 清 平 板 冷 凝 后，皿 盖 上 会 凝 结 水 珠，凝 固 后 的 培 养 基 外 表 的 湿 度 也 比 拟 高，将 平 板 倒 置，既 可 以 使 培 养 基 外 表 的 水 分 更 好 地 挥 发，又 可 以 防 止 皿 盖 上 的 水 珠 落 入 培 养 基，造 成 污 染。关 注 点 8 不 了 解 影 响 加 酶 洗 衣 粉 洗 涤 效 果 的 因 素 澄 清 影 响 加 酶 洗 衣
18、 粉 洗 涤 效 果 的 因 素 有 水 温、水 量、水 质、洗 衣 粉 的 用 量，衣 物 的 质 料、大 小 及 浸 泡 时 间 和 洗 涤 的 时 间 等。在 实 验 中 应 控 制 好 自 变 量 之 外 的 无 关 变 量。关 注 点 9 不 明 确 酵 母 细 胞 固 定 化 实 验 中，海 藻 酸 钠 和 氯 化 钙 的作 用 澄 清 海 藻 酸 钠 作 为 酵 母 菌 的 包 埋 剂。氯 化 钙 能 与 海 藻 酸 钠 反 响，形 成 凝 胶 珠。关 注 点 1 0 不 明 确 D N A 粗 提 取 和 鉴 定 实 验 中，两 次 使 用 蒸 储 水 的 作 用 澄 清 第
19、一 次 加 蒸 储 水，使 鸡 血 细 胞 吸 水 涨 碳；第 二 次 加 蒸 馆 水，使 含 D N A 的 NaCl溶 液 浓 度 降 低，析 出 D N A 分 子。专 题 复 习 2主 攻 点 之（一）传 统 发 酵 技 术 和 微 生 物 的 利 用 且 基 础 主 干 知 识 一 网 打 尽（基 稳 才 能 楼 高）1.传 统 发 酵 技 术 的 应 用（填 图）果 酒 和 果 醋 的 制 作：果 酒 制 作 i 挑 选 一 一 一 m冲 洗 一 榨 汁 一 团 酒 精 发 酵 一 醋 酸 发 酵：实 验 流 程 条 件 控 制 1 计 条 件 控 制 国 18 25 C 温 度
20、30 3 5匕 先 通 气，后 国 密 封 空 气 全 程 通 气 肉 10 12 d 时 间 8 d果 醋 制 作 腐 乳 的 制 作:制 作 原 理：空 气 中 的 一 些 真 菌.1 起 主 要 作 用 的 是 由 毛 霉 蛋 白 质 芸，子 的 迦，咽 蟠 实 验 流 程 及 影 响 因 素:证 复 腐 E而 连 应 二 遍 遍 i二 加 面 拓 痂 二 i 国 城;二 一 口 验 流 至）I 70%|含 水 量 J 一）雨 T 毛 坯:盐=Q I|四 5 1 8 式 1 温 度 匕-1团 12%|I发 酵 时 间 I希 痂 2.图 解 识 记 微 生 物 的 培 养、别 离 与 计
21、数（填 图）研 考 占|在 平 板 划 线 法 L pH、02 等 怛 碳 源 M 犯 源、水、|无 腌 N 长 因 子 利 用 选 择 培 养 基 对 微 生 物 筛 选|显 微 镜 直 接 计 薮 考 什 么 U1生 的 养 汨 微 物 培 无 菌 微 生 物 的 分 离 微 生 物 的 计 数 方 法 X释 稀 涂 布 平 板 平 消 H酒 精 等 化 学 药 物 I毒 T 灼 烧 灭 菌 灭 U 紫 外 线 消 毒 一 I 干 热 灭 菌 菌 实 例 I分 解 尿 素 的 细 菌|分 解 纤 维 素 的 细 菌 I!图 稀 释 涂 布 平 藤 高 频 考 点 一 包 在 内（方 向 比
22、 努 力 更 重 要）考 点 考 法 探 究 用 应 种 考 点（一）果 酒 果 醋 和 腐 乳 的 制 作 1.（2017 江 苏 高 考）（多 项 选 择）如 图 是 探 究 果 酒 与 气 体 喝 簪 腮 果 醋 发 酵 的 装 置 示 意 图。以 下 相 关 表 达 正 确 的 选 项 是）A.改 变 通 入 气 体 种 类，可 以 研 究 呼 吸 作 用 类 型 对 发 酵 的 影 响 果 酒 发 酵 中 期 通 入 氮 气，酵 母 菌 将 从 有 氧 呼 吸 转 变 为 无 氧 呼 吸 C.果 醋 的 发 酵 周 期 与 实 验 设 定 的 温 度 密 切 相 关 D.气 体 入
23、口 与 气 体 出 口 可 以 交 换 使 用 解 析：选 ABC 改 变 通 入 气 体 的 种 类，例 如 分 别 通 入 氮 气 和 氧 气，可 研 究 无 氧 呼 吸 和 有 氧 呼 吸 对 发 酵 的 影 响；果 酒 发 酵 中 期 通 入 氮 气，更 利 于 创 造 无 氧 条 件，酵 母 菌 将 从 有 氧 呼 吸 转 变 为 无 氧 呼 吸；果醋 发 酵 的 菌 种 是 醋 酸 杆 菌，其 生 长 的 适 宜 温 度 是 30 35,温 度 能 影 响 醋 酸 杆 菌 的 代 谢，从 而 影 响 果 醋 的 发 酵 周 期；气 体 的 入 口 必 须 伸 入 培 养 液 中，气
24、 体 出 口 不 能 伸 入 培 养 液 中，如 果 气 体 的 入 口 和 出 口 交 换，会 导 致 发 酵 液 喷 出。2.（2016江 然 高 考）以 下 关 于 中 学“腐 乳 的 制 作”实 验，表 达 正 确 的 选 项 是（）A.加 盐 主 要 是 为 了 调 节 水 分，利 于 毛 霉 生 长 B.加 料 酒 主 要 是 为 了 灭 菌，防 止 腐 败 变 质 C.发 酵 过 程 中 起 主 要 作 用 的 是 乳 酸 杆 菌 D.实 验 室 制 作 的 腐 乳 不 宜 直 接 食 用 解 析：选 D 加 盐 主 要 是 为 了 抑 制 杂 菌 的 生 长，同 时 也 可 析
25、 出 水 分，有 利 于 腐 乳 成 形，因 此 加 盐 的 目 的 主 要 是 抑 制 杂 菌 生 长 而 不 是 调 节 水 分；加 料 酒 可 以 抑 制 微 生 物 的 生 长，同 时 能 使 腐 乳 具 有 独 特 的 风 味，但 不 能 灭 菌；在 腐 乳 制 作 的 发 酵 过 程 中 起 主 要 作 用 的 是 毛 霉；实 验 室 制 作 的 腐 乳 因 未 经 质 量 鉴 定，不 宜 直 接 食 用。联 知 识 1解 读 发 酵 装 置 图 装 置 图 结 构 或 操 作 目 的 由 口 4_.充 气 口 醋 酸 发 酵 时 连 接 充 气 泵 进 行 充 气 排 气 口 酒
26、 精 发 酵 时 用 来 排 出 CO2长 而 弯 曲 的 胶 管 防 止 空 气 中 微 生 物 的 污 染 制 酒 时 关 闭 充 气 口 制 醋 时 充 气 口 连 接 气 泵，输 入 无菌 空 气 考 点（二）微 生 物 的 实 验 室 培 养 和 别 离 3.（2017南 京 二 模）某 化 工 厂 的 污 水 池 中 含 有 一 种 有 害 的 难 以 降 解 的 有 机 化 合 物 A,研 究 人 员 用 化 合 物 A、磷 酸 盐、镁 盐 以 及 微 量 元 素 等 配 制 的 培 养 基，成 功 筛 选 到 能 高 效 降 解 化 合 物 A 的 细 菌（目 的 菌）。实 验
27、 的 主 要 步 骤 如 以 下 图 所 示。以 下 有 关 表 达 错 误 的 选 项 是（）起 杏 营 r 振 藩 培 养 若 干 天 后，测 定 接 种 污 罩 样 品 各 瓶 中 化 合 物 A 的 含 量 广、用 状 重 复 多 次，直 至 获 得 目 的 菌 A.培 养 基 中 参 加 化 合 物 A 作 为 唯 一 碳 源，目 的 是 为 了 筛 选 目 的 菌 B.实 验 培 养 过 程 中 进 行 振 荡 培 养，可 使 目 的 菌 和 培 养 液 充 分 接 触 C.实 验 操 作 过 程 中，获 得 纯 洁“目 的 菌 的 关 键 是 防 止 外 来 杂 菌 污 染 D.
28、将 固 体 培 养 基 得 到 的 目 的 菌 重 复 屡 次 上 述 实 验 的 目 的 是 获 得 大 量 菌 种 解 析：选 D 培 养 基 中 化 合 物 A 为 唯 一 碳 源，可 以 筛 选 能 高 效 降 解 化 合 物 A 的 细 菌；实 验 培 养 过 程 中 进 行 振 荡 培 养，既 可 使 目 的 菌 和 培 养 液 充 分 接 触，又 可 以 增 加 培 养 液 中 溶 氧 量；微 生 物 培 养 过 程 中 要 进 行 无 菌 操 作，防 止 外 来 杂 菌 的 污 染；将 固 体 培 养 基 得 到 的 目 的 菌 重 复 屡 次 上 述 实 验 是 为 了 纯
29、化 高 效 降 解 化 合 物 A 的 细 菌。4.（2015江 苏 高 考）人 工 瘤 胃 模 仿 了 牛 羊 等 反 刍 动 物 的 胃，可 用 来 发 酵 处 理 秸 秆，提 高 秸 秆 的 营 养 价 值。为 了 增 强 发 酵 效 果，研 究 人员 从 牛 胃 中 筛 选 纤 维 素 酶 高 产 菌 株,并 对 其 降 解 纤 维 素 能 力 进 行 了 研 究。请 答 复 以 下 问 题：(1)在 样 品 稀 释 和 涂 布 平 板 步 骤 中，以 下 选 项 不 需 要 的 是(填 序 号)。酒 精 灯 培 养 皿 显 微 镜 无 菌 水(2)在 涂 布 平 板 时，滴 加 到
30、培 养 基 外 表 的 菌 悬 液 量 不 宜 过 多 的 原 因 是(3)向 试 管 内 分 装 含 琼 脂 的 培 养 基 时，若 试 管 口 粘 附 有 培 养 基，需 要 用 酒 精 棉 球 擦 净 的 原 因 是(4)刚 果 红 可 以 与 纤 维 素 形 成 红 色 复 合 物，但 并 不 与 纤 维 素 降 解 产 物 纤 维 二 糖 和 葡 萄 糖 发 生 这 种 反 响。研 究 人 员 在 刚 果 红 培 养 基 平 板 上，筛 选 到 了 几 株 有 透 明 降 解 圈 的 菌 落(见 以 下 图)。图 中 降 解 圈 大 小 与 纤 维 素 酶 的 有 关。图 中 降 解
31、 纤 维 素 能 力 最 强 的 菌 株 是(填 图 中 序 号)。4-降 解 圈-菌 落(5)研 究 人 员 用 筛 选 到 的 纤 维 素 酶 高 产 菌 株 J1和 北，在 不 同 温 度 和 p H 条 件 下 进 行 发 酵，测 得 发 酵 液 中 酶 活 性 的 结 果 见 以 下 图，推 测菌 株 更 适 合 用 于 人 工 瘤 胃 发 酵，理 由 是 里 濡 躲 建 u g*-proteinooooO54321解 析：（1）在 样 品 稀 释 和 涂 布 平 板 过 程 中，需 要 在 酒 精 灯 火 焰 附 近 进 行 操 作，培 养 皿 用 于 盛 放 培 养 基 并 培
32、养 细 菌，无 菌 水 做 稀 释 的 溶 剂，此 处 唯 一 用 不 到 的 是 显 微 镜。（2）在 涂 布 平 板 时，要 取 少 量 菌 悬 液 滴 加 到 培 养 基 外 表，因 为 如 果 滴 加 菌 悬 液 量 过 多，菌 悬 液 就 会 堆 积 在 培 养 基 外 表 影 响 别 离 效 果。（3）在 向 试 管 内 分 装 含 琼 脂 的 培 养 基 时,如 果 试 管 口 粘 附 有 培 养 基，就 很 容 易 使 棉 塞 受 到 污 染，因 此，需 要 用 无 菌 的 酒 精 棉 球 将 试 管 口 擦 拭 干 净。（4）因 为 刚 果 红 可 以 与 纤 维 素 形 成
33、 红 色 复 合 物，且 不 与 纤 维 素 降 解 产 物 反 响。所 以 在 刚 果 红 培 养 基 平 板 上，菌 落 周 围 有 透 明 降 解 圈 是 纤 维 素 被 降 解 的 结 果，降 解 圈 大 小 由 纤 维 素 酶 的 活 性 和 量 决 定。图 中 菌 落 周 围 的 降 解 圈 最 大，因 此 其 降 解 纤 维 素 的 能 力 最 强。（5）考 虑 到 人 工 瘤 胃 的 发 酵 过 程 会 使 发 酵 液 酸 性 增 加，温 度 升 高，在 这 个 前 提 下 观 察 在 不 同 温 度 和 p H条 件 下 测 得 的 发 酵 液 中 酶 活 性 的 结 果 图
34、，从 图 中 可 以 看 出，在 高 温 和 低 p H条 件 下 都 是 北 菌 株 中 的 纤 维 素 酶 的 活 性 较 高，因 而 该 菌 株 更 适 合 用 于 人 工 瘤 胃 发 酵。答 案：（2）培 养 基 外 表 的 菌 悬 液 会 出 现 积 液，导 致 菌 体 堆 积，影 响 别 离 效 果（3）防 止 培 养 基 污 染 棉 塞（4）量 与 活 性 J 4 发 酵 过 程 会 产 热 和 产 酸，J 4菌 株 在 较高 温 度 和 酸 性 环 境 下 酶 的 活 性 更 高 联 知 识 1微 生 物 纯 化 方 法 的 比 拟 方 法 平 板 划 线 法 稀 释 涂 布
35、平 板 法 平 板 划 线 法 图 示 稀 释 涂 布 平 板 法 操 作 注 意 事 项 接 种 环 的 灼 烧：第 一 次 划 线 前：杀 死 接 种 环 上 的 微 生 物，防 止 污 染 培 养 物 之 后 每 次 划 线 前：杀 死 残 留 菌 种，保 证 每 次 划 线 菌 种 来 自 上 次 划 线 末 端 划 线 结 束 后：杀 死 残 留 菌 种，防 止 污 染 环 境 和 感 染 操 作 者 灼 烧 接 种 环 之 后，要 冷 却 后 再 进 行 操 作，以 免 温 度 太 高 杀 死 菌 种(3)划 线 时 最 后 一 区 域 不 要 与 第 一 区 域 相 连(4)划
36、线 用 力 要 大 小 适 当，防 止 用 稀 释 操 作 时，每 支 试 管 及 其 中 的 9 m L 水、移 液 管 等 均 需 灭 菌；操 作 时，试 管 口 和 移 液 管 应 在 离 火 焰 1 2 c m 处(2)涂 布 平 板 时：涂 布 器 用 体 积 分 数 为 70%的 酒 精 消 毒，取 出 时 让 多 余 酒 精 在 烧 杯 中 滴 尽，然 后 将 沾 有 少 量 酒 精 的 涂 布 器 在 酒 精 灯 火 焰 上 引 燃 不 要 将 过 热 的 涂 布 器 放 在 盛 放 酒 精 的 烧 杯 中，以 免 引 燃 其 中 的 酒 精 酒 精 灯 与 培 养 皿 距 离
37、 要 适力 过 大 将 培 养 基 划 破 宜，移 液 管 管 头 不 要 接 触 任 何 物 体 优 点 可 以 观 察 菌 落 特 征，对 混 合 菌 进 行 别 离 既 可 以 计 数，乂 可 以 观 察 曲 落 特 征 缺 点 不 能 计 数 吸 收 量 较 少，较 麻 烦，平 板 不 枯 燥 效 果 不 显 著，容 易 蔓 延 适 用 范 围 适 用 于 好 氧 菌 适 用 于 厌 氧 菌 和 兼 性 厌 氧 菌 目 的 在 培 养 基 上 形 成 由 单 个 菌 种 繁 殖 而 来 的 子 细 胞 群 体 菌 落 培 养 平 板 冷 凝 后 倒 置 培 养，使 培 养 基 外 表
38、的 水 分 更 好 地 挥 发，防 止 皿 盖 上 水 珠 落 入 培 养 基 造 成 污 染 怎 样 考-考 题 考 情 分 析 1.（2015江 茅 高 考）关 于“腐 乳 的 制 作”实 验，以 下 表 达 错 误 的 选 项 是（）A.将 腐 乳 坯 堆 积 起 来 会 导 致 堆 内 温 度 升 高，影 响 毛 霉 生 长 B.腐 乳 坯 若 被 细 菌 污 染，则 腐 乳 坯 外 表 会 出 现 黏 性 物 C.勤 向 腐 乳 坯 外 表 喷 水，有 利 于 毛 霉 菌 丝 的 生 长 D.装 坛 阶 段 参 加 料 酒，可 有 效 防 止 杂 菌 污 染 解 析：选 C 毛 霉
39、有 氧 呼 吸 能 释 放 大 量 能 量，大 局 部 以 热 能 形 式 散 失，堆 内 温 度 过 高 会 影 响 毛 霉 生 长。毛 霉 是 丝 状 真 菌，若 腐 乳 坯 外 表 出 现 黏 性 物，可 能 是 被 其 他 杂 菌 污 染。毛 霉 是 好 氧 真 菌，经 常 向 腐乳 坯 外 表 喷 水，不 利 于 毛 霉 菌 丝 的 生 长。料 酒 能 抑 制 微 生 物 的 生 长,故 能 有 效 防 止 杂 菌 污 染。2.（2015江 琰 高 考）做“微 生 物 的 别 离 与 培 养 实 验 时，以 下 表 达 正 确 的 选 项 是（）A.高 压 灭 菌 加 热 结 束 时
40、，翻 开 放 气 阀 使 压 力 表 指 针 回 到 零 后，开 启 锅 盖 B.倒 平 板 时，应 将 翻 开 的 皿 盖 放 到 一 边，以 免 培 养 基 溅 到 皿 盖 上 C.为 了 防 止 污 染，接 种 环 经 火 焰 灭 菌 后 应 趁 热 快 速 挑 取 菌 落 D.用 记 号 笔 标 记 培 养 皿 中 菌 落 时，应 标 记 在 皿 底 上 解 析：选 D 在 高 压 灭 菌 的 操 作 过 程 中，加 热 结 束 后 应 让 灭 菌 锅 内 温 度 自 然 下 降，待 压 力 表 的 压 力 降 到 零 时，翻 开 放 气 阀，旋 松 螺 栓,翻 开 盖 子。倒 平 板
41、 时，用 左 手 将 培 养 皿 翻 开 一 条 稍 大 于 瓶 口 的 缝 隙，而 不 是 完 全 取 下 放 到 一 边。接 种 环 经 火 焰 灼 烧 灭 菌 后 应 在 火 焰 旁 冷 却 后，再 用 其 挑 取 菌 落。在 微 生 物 的 培 养 中，一 般 将 培 养 皿 倒 置，在 皿 底 上 用 记 号 笔 做 标 记。3.（2015江 苏 高 考）（多 项 选 择）右 图 为 苹 果 酒 的 发 酵 装 置 示 意 图，以 下 表 达 错 误 的 选 项 是（）A.发 酵 过 程 中 酒 精 的 产 生 速 率 越 来 越 快 B.集 气 管 中 的 气 体 是 酵 母 菌
42、无 氧 呼 吸 产 生 的 CO2C.发 酵 过 程 中 酵 母 种 群 呈“J 型 增 长 D.若 发 酵 液 外 表 出 现 菌 膜，最 可 能 原 因 是 发 酵 瓶 漏 气 解 析：选 ABC 酵 母 菌 发 酵 过 程 中 因 营 养 物 质 的 消 耗、pH的 变 化 等，酒 精 的 产 生 速 率 会 越 来 越 慢。集 气 管 收 集 的 气 体 除 酵 母 菌 无 氧 呼 吸 产 生 的 CO2外，还 有 有 氧 呼 吸 产 生 的 CO2。发 酵 过 程 中，随 着营 养 物 质 消 耗 p H 降 低 等，酵 母 菌 的 繁 殖 速 度 会 变 慢，其 种 群 不 会 呈
43、 J”型 增 长。发 酵 液 外 表 出 现 的 菌 膜 可 能 是 醋 酸 菌 在 有 氧 条 件 下 繁 殖 产 生 的，说 明 发 酵 瓶 可 能 漏 气。4.（2016江 苏 高 考）（多 项 选 择）漆 酶 属 于 木 质 素 降 解 酶 类，在 环 境 修 复、农 业 生 产 等 领 域 有 着 广 泛 用 途。以 下 图 是 别 离、纯 化 和 保 存 漆 酶 菌 株 的 过 程，相 关 表 达 正 确 的 选 项 是（）A.生 活 污 水 中 含 有 大 量 微 生 物，是 别 离 产 漆 酶 菌 株 的 首 选 样 品 B.筛 选 培 养 基 中 需 要 参 加 漆 酶 的
44、底 物，通 过 菌 落 特 征 挑 出 产 漆 酶 的 菌 落 C.在 涂 布 平 板 上 长 出 的 菌 落，再 通 过 划 线 进 一 步 纯 化 D.斜 面 培 养 基 中 含 有 大 量 营 养 物，可 在 常 温 下 长 期 保 存 菌 株 解 析：选 BC 生 活 污 水 中 含 木 质 素 的 物 质 相 对 较 少，产 漆 酶 菌 株 也 较 少，不 宜 作 为 别 离 产 漆 酶 菌 株 的 样 品；产 漆 酶 菌 株 可 降 解 木 质 素，在 筛 选 培 养 基 中 参 加 木 质 素 可 筛 选 产 漆 酶 的 菌 株，筛 选 时 可 通 过 菌 落 特 征 挑 出 产
45、 漆 酶 的 菌 落;在 涂 布 平 板 上 生 长 的 菌 落 可 能 还 有 其 他 杂 菌，可 再 通 过 平 板 划 线 法 进 一 步 纯 化；对 于 需 要 长 期 保 存 的 菌 种，可 以 采 用 甘 油 管 藏 的 方 法，即 在 一 20 的 冷 冻 箱 中 保 存。5.（2017江 班 高 考）以 下 关 于“腐 乳 的 制 作”实 验，表 达 正 确 的 选 项 是（）A.控 制 发 酵 温 度 的 主 要 目 的 是 腐 乳 调 味 B.腐 乳 制 作 后 期 参 加 香 辛 料 和 料 酒 有 防 腐 作 用 C.毛 霉 的 主 要 作 用 是 分 解 脂 肪 和
46、淀 粉 D.成 品 腐 乳 外 表 的 粘 性 物 质 主 要 由 细 菌 产 生解 析：选 B 控 制 发 酵 温 度 主 要 目 的 是 利 于 菌 种 繁 殖 和 代 谢；腐 乳 制 作 后 期 参 加 香 辛 料 和 料 酒 有 防 腐 作 用；毛 霉 的 作 用 主 要 是 分 解 蛋 白 质 和 脂 肪；成 品 腐 乳 外 表 的 粘 性 物 质 主 要 是 毛 霉 产 生 的 菌 丝。6.(2017江 苏 高 考)苯 酚 及 其 衍 生 物 广 泛 存 在 于 工 业 废 水 中，对 环 境 有 严 重 危 害。小 明 同 学 准 备 依 据 如 图 操 作 步 骤，从 处 理
47、废 水 的 活 性 污 泥 中 别 离 筛 选 酚 降 解 高 效 菌 株。请 答 复 以 下 问 题：，芯 匕：日 目 目 目 目 平 板 活 性 污 泥 富 集 培 养 10-,10 2 10 3 10 10 5(1)酚 降 解 菌 富 集 培 养 基 含 有 蛋 白 陈、K2HPO4、MgSO4 苯 酚 和 水，其 中 可 作 为 碳 源 的 有 o(2)将 采 集 到 的 样 品 接 种 培 养，苯 酚 用 量 应 随 转 接 次 数 增 加 而 逐 渐，以 到 达 富 集 酚 降 解 菌 的 目 的。若 上 图 平 板 中 菌 落 过 于 密 集，应 进 一 步,以 便 于 菌 落
48、计 数 与 别 离。制 备 平 板 培 养 基 时 除 了 需 要 水、营 养 物 质 外，还 必 须 添 加 o(3)右 图 为 连 续 划 线 法 示 意 图，在 图 中(填 图 中 序 号)区 域 更 易 获 得 单 菌 落。(4)采 用 比 色 测 定 法(使 用 苯 酚 显 色 剂)检 测 降 解 后 的 废 水 中 苯 酚 残 留 量。先 制 作 系 列 浓 度 梯 度 并 进 行 显 色 反 响，下 表 中 1 5 号 比 色 管 的 苯 酚 浓 度 应 分 别 为 o|1|2|3|4|5|61苯 酚 浓 度(mg/L)如 果 废 水 为 50 mg/L苯 酚 溶 液，降 解 后
49、 约 有 21%的 苯 酚 残 留，则 需 将 残 留 液 稀 释（填 序 号：5 1 0 20）倍 后，再 进 行 比 色。解 析：（1）富 集 培 养 基 中 蛋 白 陈、苯 酚 都 是 含 碳 的 有 机 物，可 作 为 碳 源。（2）欲 富 集 酚 降 解 菌，随 转 接 次 数 的 增 加，应 逐 渐 增 加 培 养 基 中 苯 酚 的 含 量；若 接 种 培 养 后 平 板 上 菌 落 过 于 密 集，则 应 进 一 步 稀 释 后 再 进 行 涂 布，以 降 低 平 板 上 菌 落 密 度，便 于 菌 落 计 数 与 别 离；平 板 培 养 基 是 固 体 培 养 基，除 含 有
50、 水、营 养 物 质（碳 源、氮 源、无 机 盐 等）外，还 需 添 加 琼 脂 作 为 凝 固 剂。（3）利 用 连 续 划 线 法 接 种 时，最 后 的 划 线 区 域（）中，菌 体 的 密 度 较 小，容 易 获 得 单 菌 落。（4）因 系 列 浓 度 梯 度 中 6 号 比 色 管 中 苯 酚 浓 度 为 1 m g/L,故 1 5号 比 色 管 中 的 苯 酚 浓 度 应 分 别 为 0 mg/L、0.2 mg/L、0.4 mg/L、0.6 mg/L、0.8 mg/L;根 据 题 意，废 水 为 50 mg/L苯 酚 溶 液，降 解 后 约 有 21%的 苯 酚 残 留，要 使